摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 绪论 | 第12-27页 |
1.1 植物抗旱性研究 | 第12-19页 |
1.1.1 干旱对植物的影响 | 第12-13页 |
1.1.2 植物抗干旱生理机制 | 第13-15页 |
1.1.3 植物抗干旱分子机制 | 第15-19页 |
1.2 调控基因表达的启动子研究进展 | 第19-22页 |
1.2.1 组成型启动子 | 第19页 |
1.2.2 组织特异型启动子 | 第19-20页 |
1.2.3 诱导型启动子 | 第20-22页 |
1.3 AtPUB19启动子与DR1172基因 | 第22-23页 |
1.3.1 AtPUB19启动子 | 第22页 |
1.3.2 DR1172基因 | 第22-23页 |
1.4 研究目的和意义 | 第23-25页 |
1.5 技术路线 | 第25-27页 |
2 两种植物表达载体的构建以及AtPUB19启动子的生物信息学分析 | 第27-44页 |
2.1 材料 | 第27-28页 |
2.1.1 菌种 | 第27页 |
2.1.2 菌用培养基 | 第27页 |
2.1.3 试剂 | 第27页 |
2.1.4 仪器和设备 | 第27-28页 |
2.1.5 主要缓冲液 | 第28页 |
2.2 方法 | 第28-35页 |
2.2.1 构建植物表达载体PBI121-CaMV35S::DR1172和pCambia-AtPUB19::DR1172 | 第28-30页 |
2.2.2 大肠杆菌的活化 | 第30页 |
2.2.3 载体片段的获取 | 第30-31页 |
2.2.4 DR1172基因目的片段的获取 | 第31-32页 |
2.2.5 DR1172基因与线性载体的重组连接 | 第32-33页 |
2.2.6 感受态细胞的制备和连接产物的转化 | 第33-35页 |
2.2.7 AtPUB19启动子的生物信息学分析 | 第35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-42页 |
2.3.1 大肠杆菌的活化 | 第35-36页 |
2.3.2 载体片段的获取 | 第36-37页 |
2.3.3 DR1172基因目的片段的获取 | 第37-38页 |
2.3.4 植物表达载体的重组连接和转化 | 第38-40页 |
2.3.5 AtPUB19启动子的生物信息学分析 | 第40-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
3 转基因阳性苗的获得 | 第44-58页 |
3.1 材料 | 第44-45页 |
3.1.1 植物材料 | 第44页 |
3.1.2 植物培养基 | 第44-45页 |
3.1.3 试剂 | 第45页 |
3.2 方法 | 第45-48页 |
3.2.1 农杆菌介导法实现油菜的遗传转化 | 第45-47页 |
3.2.2 转基因油菜苗的PCR检测 | 第47-48页 |
3.3 结果与分析 | 第48-54页 |
3.3.1 农杆菌介导法获取转基因油菜 | 第48-53页 |
3.3.2 转基因油菜苗的PCR检测 | 第53-54页 |
3.4 讨论 | 第54-58页 |
3.4.1 褐化现象 | 第54-55页 |
3.4.2 白化现象 | 第55-56页 |
3.4.3 玻璃化现象 | 第56-57页 |
3.4.4 畸形现象 | 第57-58页 |
4 不同启动子驱动DR1172转基因甘蓝型油菜的抗旱性研究 | 第58-82页 |
4.1 材料 | 第58页 |
4.1.1 植物材料 | 第58页 |
4.1.2 试剂 | 第58页 |
4.2 方法 | 第58-63页 |
4.2.1 植物的培养和胁迫过程 | 第58-59页 |
4.2.2 生理指标的测定与方法 | 第59-60页 |
4.2.3 油菜叶片中CaMV35S::DR1172基因与AtPUB19::DR1172基因在干旱胁迫下相对表达量的检测 | 第60-63页 |
4.2.4 数据统计分析 | 第63页 |
4.3 结果与分析 | 第63-78页 |
4.3.1 干旱胁迫下油菜叶片中叶绿素的变化 | 第63-65页 |
4.3.2 干旱胁迫下油菜叶片中抗氧化酶活性的变化 | 第65-68页 |
4.3.3 干旱胁迫下油菜叶片中相对含水量的变化 | 第68-69页 |
4.3.4 干旱胁迫下油菜叶片中相对电导率的变化 | 第69-70页 |
4.3.5 干旱胁迫下油菜叶片中可溶性糖的变化 | 第70-72页 |
4.3.6 干旱胁迫下油菜叶片中丙二醛的变化 | 第72-73页 |
4.3.7 干旱胁迫下油菜叶片中脯氨酸含量的变化 | 第73-74页 |
4.3.8 干旱胁迫下不同启动子驱动的DR1172基因在甘蓝型油菜叶片 中的表达量 | 第74-75页 |
4.3.9 植株形态特征的变化 | 第75-78页 |
4.4 讨论 | 第78-82页 |
4.4.1 不同启动子驱动的DR1172基因对甘蓝型油菜叶片中生理生化指标的影响 | 第78-81页 |
4.4.2 不同启动子驱动的DR1172基因在甘蓝型油菜叶片中的表达情况分析 | 第81-82页 |
结论 | 第82-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-99页 |
攻读学位期间发表的与学位论文相关的学术论文及研究成果 | 第99-100页 |
附录 1 | 第100页 |