| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-17页 |
| ·植物几丁质酶 | 第9-13页 |
| ·植物几丁质酶的分类 | 第9-10页 |
| ·植物几丁质酶的特性 | 第10页 |
| ·植物几丁质酶的基因结构 | 第10-11页 |
| ·植物几丁质酶基因的诱导表达与调控作用 | 第11页 |
| ·植物几丁质酶在植物病害防治方面的应用 | 第11-13页 |
| ·植物几丁质酶研究的新成果 | 第13页 |
| ·几丁质酶的应用及研究前景 | 第13-15页 |
| ·研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 2 材料方法 | 第17-34页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·水稻 | 第17页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·质粒 | 第17页 |
| ·试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-19页 |
| ·实验方法 | 第19-34页 |
| ·水稻几丁质酶基因chAB 和ch24 的克隆及序列分析 | 第19-22页 |
| ·水稻基因组DNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·水稻几丁质酶基因chAB 和ch24 的扩增 | 第20页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第20-21页 |
| ·克隆载体pUC18-T的制备 | 第21页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第21页 |
| ·连接与转化 | 第21-22页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第22页 |
| ·序列分析与蛋白质三维结构模型的构建 | 第22页 |
| ·表达载体pAB-32a 和p24-32a 的构建与表达 | 第22-29页 |
| ·pAB-32a 和p24-32a 表达载体的构建 | 第22-23页 |
| ·pAB-32a 和p24-32a 的诱导表达 | 第23-29页 |
| ·pAB-32a 和p24-32a 目的基因表达条件的优化及蛋白的复性与纯化 | 第29-32页 |
| ·重组蛋白表达条件的优化 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的复性与纯化 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白体外抑菌 | 第31-32页 |
| ·表达载体pAB-MBP (P)和p24-MBP (P) 的构建与表达 | 第32-34页 |
| ·构建表达载体 | 第32-33页 |
| ·表达载体的诱导表达 | 第33页 |
| ·重组蛋白体外抑菌 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-56页 |
| ·目的基因chAB、ch24 的克隆、测序及序列分析 | 第34-39页 |
| ·水稻基因组的提取结果 | 第34页 |
| ·获取目的基因的 PCR 结果 | 第34-35页 |
| ·重组质粒pCHAB 和pCH24 的鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·序列分析与蛋白质三维结构模型的构建 | 第36-39页 |
| ·pAB-32a 与p24-32a 表达载体的构建与表达 | 第39-50页 |
| ·载体pET-32a 和PCR 产物chAB、ch24 双酶切结果 | 第39-41页 |
| ·重组质粒pAB-32a 和p24-32a 的鉴定 | 第41页 |
| ·表达载体pAB-32a 和p24-32a 的诱导表达 | 第41-44页 |
| ·pAB-32a 和p24-32a 表达条件的正交优化 | 第44-50页 |
| ·表达载体pAB-MBP (P) 和p24-MBP (P) 的构建与表达 | 第50-56页 |
| ·构建表达载体 | 第50-51页 |
| ·构建表达载体的鉴定 | 第51-52页 |
| ·表达载体pAB-MBP (P) 和p24-MBP (P) 诱导表达 | 第52-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·水稻几丁质酶基因chAB 和ch24 的克隆及表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·包涵体的处理及复性 | 第57页 |
| ·重组蛋白活性及抑菌效果 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第69页 |
