| 致谢 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 中英文缩略 | 第11-17页 |
| 1 绪论 | 第17-41页 |
| 1.1 细胞质核酸识别通路与抗病毒天然免疫概况 | 第17-18页 |
| 1.2 细胞质RNA识别 | 第18-28页 |
| 1.2.1 视黄酸诱导蛋白样(RIG-I-like)受体 | 第19-20页 |
| 1.2.2 RLR识别异源RNA的机制 | 第20-21页 |
| 1.2.3 RLR激活的结构基础 | 第21-22页 |
| 1.2.4 RLR通路接头蛋白MAVS的激活机制 | 第22-23页 |
| 1.2.5 关键激酶TBK1和转录因子IRF3的功能与调节 | 第23-26页 |
| 1.2.6 RLR通路的调控 | 第26-27页 |
| 1.2.7 其他细胞质RNA识别受体 | 第27-28页 |
| 1.3 细胞质DNA识别 | 第28-34页 |
| 1.3.1 关键细胞质DNA识别受体cGAS | 第28-29页 |
| 1.3.2 DNA识别通路的关键接头蛋白STING/MITA | 第29-30页 |
| 1.3.3 环二核苷酸与STING/MITA的活化 | 第30-31页 |
| 1.3.4 其他细胞质DNA识别受体 | 第31-34页 |
| 1.4 蛋白激酶Mst1的研究进展 | 第34-41页 |
| 1.4.1 Mst1概况 | 第34-35页 |
| 1.4.2 Mst1在Hippo信号通路中的研究 | 第35-36页 |
| 1.4.3 Mst1在凋亡信号通路中的研究 | 第36-39页 |
| 1.4.4 Mst1在自身免疫性疾病中的研究 | 第39-41页 |
| 2 材料和方法 | 第41-59页 |
| 2.1 分子生物学实验 | 第41-47页 |
| 2.1.1 提取组织和细胞RNA | 第41-42页 |
| 2.1.2 mRNA反转录 | 第42页 |
| 2.1.3 荧光实时定量PCR | 第42-44页 |
| 2.1.4 质粒构建 | 第44-47页 |
| 2.1.5 晶体结构模拟 | 第47页 |
| 2.2 生化实验 | 第47-53页 |
| 2.2.1 蛋白免疫共沉淀(Co-IP) | 第47-48页 |
| 2.2.2 蛋白免疫印迹实验(Western blot) | 第48-51页 |
| 2.2.3 DNA沉降实验(DNA Pull-down) | 第51-52页 |
| 2.2.4 体外激酶分析实验(kinase assay) | 第52-53页 |
| 2.3 细胞实验 | 第53-57页 |
| 2.3.0 细胞培养 | 第53-54页 |
| 2.3.1 细胞转染 | 第54页 |
| 2.3.2 RNA干扰实验 | 第54-55页 |
| 2.3.3 荧光素酶(luciferase)报告基因实验 | 第55页 |
| 2.3.4 免疫荧光染色 | 第55-56页 |
| 2.3.5 CRISPR-Cas9系统构建基因敲除细胞系 | 第56-57页 |
| 2.4 动物实验 | 第57-59页 |
| 2.4.1 小鼠培养 | 第57页 |
| 2.4.2 VSV病毒小鼠尾静脉注射 | 第57-58页 |
| 2.4.3 小鼠实验数据收集 | 第58页 |
| 2.4.4 VSV病毒感染Mst1转基因斑马鱼实验 | 第58-59页 |
| 3 Mst1在细胞质核酸识别通路和宿主抗病毒防御中的功能 | 第59-71页 |
| 3.1 蛋白激酶Mst1抑制细胞质核酸识别通路 | 第59-64页 |
| 3.1.1 Mst1抑制caRIG-I/STING介导的RNA/DNA识别信号 | 第59-60页 |
| 3.1.2 Mst1抑制细胞质核酸识别通路的功能依赖于其蛋白激酶活性 | 第60-62页 |
| 3.1.3 siRNA介导的内源Mst1敲低增强宿主细胞的Ⅰ型干扰素应答 | 第62-63页 |
| 3.1.4 内源Mst1的激活抑制宿主抗病毒信号应答 | 第63-64页 |
| 3.2 细胞与模型动物中Mst1的抗病毒宿主防御功能 | 第64-69页 |
| 3.2.1 Mst1基因敲除增强细胞抗病毒应答信号 | 第64-66页 |
| 3.2.2 Mst1基因敲除增强宿主细胞RNA/DNA病毒抗性 | 第66-68页 |
| 3.2.3 Mst1基因敲除小鼠抗病毒能力显著增强 | 第68-69页 |
| 3.3 表达Mst1削弱斑马鱼的抗病毒防御 | 第69-71页 |
| 4 Mst1抑制细胞质核酸识别通路的分子机制 | 第71-86页 |
| 4.1 Mst1抑制病毒感染诱导的TBK1激活 | 第71-74页 |
| 4.1.1 敲除或敲低Mst1增强TBK1 S172位点磷酸化 | 第71-72页 |
| 4.1.2 Mst1表达抑制TBK1/IKKε自我磷酸化、磷酸化底物IRF3 | 第72-74页 |
| 4.2 Mst1直接结合并磷酸化修饰IRF3 | 第74-78页 |
| 4.2.1 Mst1磷酸化修饰IRF3并抑制IRF3转录活性 | 第75-76页 |
| 4.2.2 Mst1与IRF3直接相互作用 | 第76-77页 |
| 4.2.3 Mst1直接磷酸化修饰IRF3 | 第77-78页 |
| 4.3 Mst1磷酸化修饰IRF3的位点及作用 | 第78-81页 |
| 4.3.1 Mst1直接磷酸化IRF3 T75和T253位点 | 第78-80页 |
| 4.3.2 Mst1磷酸化修饰IRF3 T75和T253位点抑制其转录活性 | 第80-81页 |
| 4.4 Mst1介导IRF3磷酸化修饰失活的分子基础 | 第81-84页 |
| 4.4.1 T253位点磷酸化修饰抑制IRF3形成同源二聚体 | 第82-83页 |
| 4.4.2 T75位点磷酸化修饰抑制IRF3结合DNA | 第83-84页 |
| 4.5 Mst1调控细胞质核酸识别通路的工作模型 | 第84-86页 |
| 5 讨论和总结 | 第86-89页 |
| 5.1 Mst1通过磷酸化IRF3调节细胞质核酸识别的机制 | 第86-87页 |
| 5.2 Mst1在宿主防御中的功能和展望 | 第87-89页 |
| 6 参考文献 | 第89-108页 |
| 作者简历及博士期间取得的科研成绩 | 第108-109页 |
