致谢 | 第5-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
缩略词表 | 第17-22页 |
第一部分 Shank3分子在小鼠大脑皮层内的时空表达分布及细胞化学特点 | 第22-49页 |
1 引言 | 第22-23页 |
2 材料和方法 | 第23-37页 |
2.1 实验动物 | 第23页 |
2.2 主要器材和试剂 | 第23-29页 |
2.2.1 主要器材 | 第23-24页 |
2.2.2 主要试剂 | 第24-26页 |
2.2.3 常用试剂配方 | 第26-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-37页 |
2.3.1 组织处理及免疫荧光染色 | 第29-31页 |
2.3.2 组织RNA提取及荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第31-35页 |
2.3.3 组织蛋白提取和蛋白印记(Western Blot) | 第35-37页 |
3 实验结果 | 第37-46页 |
3.1 成年小鼠大脑皮层内Shank3免疫阳性细胞的分布模式 | 第37-39页 |
3.2 Shank3免疫阳性分子在成年小鼠大脑皮层内的细胞分布及细胞化学特点 | 第39-41页 |
3.3 Shank3免疫阳性分子在神经元内的亚细胞定位 | 第41-42页 |
3.4 不同发育时期小鼠大脑皮层内Shank3表达量变化 | 第42-44页 |
3.5 不同发育时期小鼠大脑皮层内Shank3阳性细胞的分布模式 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
5 小结 | 第48-49页 |
第二部分 Shank3分子对大脑皮层锥体神经元树突发育的影响 | 第49-75页 |
1 引言 | 第49-50页 |
2 材料和方法 | 第50-59页 |
2.1 主要器材和试剂 | 第50-53页 |
2.1.1 主要器材 | 第50-51页 |
2.1.2 主要试剂 | 第51-52页 |
2.1.3 常用试剂配方 | 第52-53页 |
2.2 实验动物 | 第53页 |
2.3 实验方法 | 第53-59页 |
2.3.1 构建Shank3下调质粒 | 第53-54页 |
2.3.2 验证Shank3 shRNA表达质粒下调效率 | 第54页 |
2.3.3 质粒克隆 | 第54-55页 |
2.3.4 胚胎电转 | 第55-56页 |
2.3.5 Shank3B KO小鼠鉴定 | 第56-57页 |
2.3.6 Golgi染色及数据分析 | 第57-58页 |
2.3.7 动物行为学检测 | 第58-59页 |
3 实验结果 | 第59-72页 |
3.1 Shank3 shRNA表达质粒下调效率检测结果 | 第59-61页 |
3.2 下调Shank3基因表达对出生后不同发育期小鼠大脑皮层内锥体神经元突起的影响 | 第61-63页 |
3.3 Shank3B KO小鼠鉴定结果 | 第63-64页 |
3.4 Shank3基因敲除对不同发育期小鼠大脑皮层锥体神经元树突形态的影响 | 第64-67页 |
3.5 Shank3基因敲除对不同发育期小鼠大脑皮层锥体神经元树突棘数目的影响 | 第67-71页 |
3.6 成年Shank3B KO小鼠行为学改变 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-74页 |
5 小结 | 第74-75页 |
第三部分 Shank3在发育过程中对前扣带回皮层突触功能的影响 | 第75-94页 |
1 引言 | 第75-76页 |
2 材料与方法 | 第76-82页 |
2.1 实验动物 | 第76页 |
2.2 主要试剂与药物 | 第76-77页 |
2.3 主要实验器材 | 第77-78页 |
2.4 实验所需主要液体的配制 | 第78-79页 |
2.4.1 切片液(cutting solution)(mM) | 第78页 |
2.4.2 人工脑脊液(ACSF)(mM) | 第78-79页 |
2.4.3 葡萄糖酸钾电极内液(mM) | 第79页 |
2.5 实验方法 | 第79-82页 |
2.5.1 脑片准备 | 第79-80页 |
2.5.2 钳制细胞及数据采集 | 第80-81页 |
2.5.3 ACC锥体神经元的定位、钳制封接及记录 | 第81-82页 |
2.5.4 统计学分析 | 第82页 |
3 实验结果 | 第82-91页 |
3.1 Shank3敲除在出生两周后抑制兴奋性突触前递质的释放 | 第82-84页 |
3.2 Shank3敲除在出生两周后抑制兴奋性突触后信息传递 | 第84-86页 |
3.3 Shank3敲除不影响AMPA受体的通道特性 | 第86-88页 |
3.4 Shank3敲除对前扣带回皮层的Ⅱ/Ⅲ层锥体神经元传入传出特性的影响 | 第88-91页 |
4 讨论 | 第91-93页 |
5 小结 | 第93-94页 |
全文总结 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-105页 |
综述 神经元树突发育过程及调控机制 | 第105-130页 |
参考文献 | 第116-130页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第130-131页 |