摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1 杨树组织培养和转化体系的研究概况 | 第12-13页 |
1.1 毛白杨简介 | 第12页 |
1.2 杨树组织培养和转化体系的相关研究 | 第12-13页 |
2 花青素的生物合成及调控 | 第13-18页 |
2.1 花青素的简介及功能 | 第13-14页 |
2.2 花青素的生物合成途径 | 第14-15页 |
2.3 调控花青素合成的主要转录因子 | 第15-18页 |
3 花青素在植物上的应用 | 第18页 |
4 本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
第二章 毛白杨叶片再繁和遗传转化体系的优化 | 第20-36页 |
1 实验材料与试剂 | 第23-24页 |
1.1 实验的植物材料 | 第23页 |
1.2 实验菌株和质粒 | 第23页 |
1.3 培养基 | 第23-24页 |
1.4 环境条件 | 第24页 |
2 毛白杨叶片再繁体系的建立 | 第24-25页 |
2.1 组培无菌苗的获得 | 第24页 |
2.2 毛白杨再生系统的建立 | 第24-25页 |
3 毛白杨转化体系的建立 | 第25-27页 |
3.1 含AtPAP2基因的质粒转入根癌农杆菌LBA4404 | 第25-26页 |
3.2 农杆菌介导的叶盘转化法转化毛白杨 | 第26-27页 |
4 实验结果与分析 | 第27-33页 |
4.1 基本培养基的筛选 | 第27-28页 |
4.2 茎段继代生根培养基的筛选 | 第28页 |
4.3 叶片处理方式和激素配比对叶片分化的影响 | 第28-29页 |
4.4 生根培养基的筛选 | 第29-30页 |
4.5 菌液PCR验证 | 第30页 |
4.6 影响毛白杨遗传转化的因素 | 第30-32页 |
4.7 转化结果 | 第32-33页 |
5 小结 | 第33-36页 |
5.1 叶片再繁体系的优化 | 第33-34页 |
5.2 影响遗传转化效率的因素 | 第34-36页 |
第三章 毛白杨转AtPAP2基因的验证和花青素含量的测定 | 第36-48页 |
1 植物材料 | 第37页 |
2 AtPAP2基因的同源性比较 | 第37页 |
3 转基因毛白杨的RNA水平检测 | 第37-38页 |
3.1 毛白杨的RNA提取 | 第37-38页 |
3.2 提取RNA的质量检测 | 第38页 |
4 荧光定量PCR | 第38-41页 |
4.1 荧光定量PCR引物设计 | 第38-39页 |
4.2 cDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
4.3 普通PCR验证 | 第40页 |
4.4 RT-PCR | 第40-41页 |
5 花青素的提取和相对含量测定 | 第41-42页 |
5.1 花青素的提取 | 第41页 |
5.2 毛白杨花青素可见光最大吸收波长的确定 | 第41-42页 |
6 实验结果与分析 | 第42-46页 |
6.1 AtPAP2基因的同源性比较 | 第42-43页 |
6.2 RNA的提取 | 第43页 |
6.3 引物的设计 | 第43-44页 |
6.4 普通RCR结果 | 第44-45页 |
6.5 RT-PCR结果 | 第45-46页 |
6.6 花青素可见光最大吸收波长 | 第46页 |
6.7 花青素的相对含量 | 第46页 |
7 小结 | 第46-48页 |
第四章 讨论 | 第48-50页 |
本文创新点 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58页 |