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铜绿假单胞菌中两个调节子基因对致病因子的调控研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩写对比表第13-14页
第一章 绪论第14-24页
    1.1 铜绿假单胞菌的特性及致病性第14-15页
    1.2 Rsm转录后调控系统第15页
    1.3 双组份系统第15-16页
    1.4 群体感应系统第16-17页
    1.5 三型分泌系统第17-18页
    1.6 生物被膜第18-20页
    1.7 第二信使c-di-GMP第20-21页
    1.8 ABC超家族蛋白第21-22页
    1.9 本研究的目的及意义第22-24页
第二章 材料和方法第24-41页
    2.1 试验材料第24-28页
        2.1.1 菌株、质粒及引物第24-26页
        2.1.2 培养基、缓冲液及相关条件第26-27页
        2.1.3 试剂和仪器第27-28页
    2.2 试验方法第28-41页
        2.2.1 菌体单菌落计数实验第28页
        2.2.2 基因互补实验第28-29页
        2.2.3 果蝇存活率实验第29-30页
        2.2.4 白菜致病斑实验第30页
        2.2.5 c-di-GMP分离提取实验第30-31页
        2.2.6 质粒mini-CTX1在基因组上的重组第31-32页
        2.2.7 细胞周质、胞质和生物膜的分离第32-33页
        2.2.8 SDS-PAGE凝胶电泳第33-34页
        2.2.9 融合蛋白的表达第34-36页
        2.2.10 动物免疫实验及多克隆抗体制备第36-37页
        2.2.11 蛋白免疫印迹实验第37-38页
        2.2.12 细菌总RNA的提取第38页
        2.2.13 DNase I处理总RNA样品第38-39页
        2.2.14 反转录合成cDNA第39页
        2.2.15 实时定量PCR(real-time quantitative PCR)第39-41页
第三章 结果与分析第41-59页
    3.1 PA4664基因的研究第41-54页
        3.1.1 PA4664基因的基本信息第41页
        3.1.2 突变体△PA4664的单菌落形态第41-46页
        3.1.3 PA4664基因突变影响菌体的泳动、丛动和蹭行运动第46-49页
        3.1.4 PA4664基因对绿脓菌素合成和菌体致病性的影响第49-51页
        3.1.5 △PA4664中T3SS相关蛋白基因表达降低第51-53页
        3.1.6 第二信使c-di-GMP水平在突变体△PA4664中降低第53-54页
    3.2 PA4595基因及蛋白研究第54-59页
        3.2.1 PA4595基因的基本信息第54页
        3.2.2 PA4595蛋白多克隆抗体制备第54-55页
        3.2.3 PA4595蛋白亚细胞定位第55-56页
        3.2.4 PA4595基因对T3SS调节途径的探究第56-59页
第四章 小结与讨论第59-62页
    4.1 铜绿假单胞菌中prmC基因在菌体中作用第59-61页
    4.2 PA4595蛋白定位及其对T3SS的调节第61-62页
参考文献第62-74页
致谢第74页

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