摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩写对比表 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
1.1 铜绿假单胞菌的特性及致病性 | 第14-15页 |
1.2 Rsm转录后调控系统 | 第15页 |
1.3 双组份系统 | 第15-16页 |
1.4 群体感应系统 | 第16-17页 |
1.5 三型分泌系统 | 第17-18页 |
1.6 生物被膜 | 第18-20页 |
1.7 第二信使c-di-GMP | 第20-21页 |
1.8 ABC超家族蛋白 | 第21-22页 |
1.9 本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 材料和方法 | 第24-41页 |
2.1 试验材料 | 第24-28页 |
2.1.1 菌株、质粒及引物 | 第24-26页 |
2.1.2 培养基、缓冲液及相关条件 | 第26-27页 |
2.1.3 试剂和仪器 | 第27-28页 |
2.2 试验方法 | 第28-41页 |
2.2.1 菌体单菌落计数实验 | 第28页 |
2.2.2 基因互补实验 | 第28-29页 |
2.2.3 果蝇存活率实验 | 第29-30页 |
2.2.4 白菜致病斑实验 | 第30页 |
2.2.5 c-di-GMP分离提取实验 | 第30-31页 |
2.2.6 质粒mini-CTX1在基因组上的重组 | 第31-32页 |
2.2.7 细胞周质、胞质和生物膜的分离 | 第32-33页 |
2.2.8 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第33-34页 |
2.2.9 融合蛋白的表达 | 第34-36页 |
2.2.10 动物免疫实验及多克隆抗体制备 | 第36-37页 |
2.2.11 蛋白免疫印迹实验 | 第37-38页 |
2.2.12 细菌总RNA的提取 | 第38页 |
2.2.13 DNase I处理总RNA样品 | 第38-39页 |
2.2.14 反转录合成cDNA | 第39页 |
2.2.15 实时定量PCR(real-time quantitative PCR) | 第39-41页 |
第三章 结果与分析 | 第41-59页 |
3.1 PA4664基因的研究 | 第41-54页 |
3.1.1 PA4664基因的基本信息 | 第41页 |
3.1.2 突变体△PA4664的单菌落形态 | 第41-46页 |
3.1.3 PA4664基因突变影响菌体的泳动、丛动和蹭行运动 | 第46-49页 |
3.1.4 PA4664基因对绿脓菌素合成和菌体致病性的影响 | 第49-51页 |
3.1.5 △PA4664中T3SS相关蛋白基因表达降低 | 第51-53页 |
3.1.6 第二信使c-di-GMP水平在突变体△PA4664中降低 | 第53-54页 |
3.2 PA4595基因及蛋白研究 | 第54-59页 |
3.2.1 PA4595基因的基本信息 | 第54页 |
3.2.2 PA4595蛋白多克隆抗体制备 | 第54-55页 |
3.2.3 PA4595蛋白亚细胞定位 | 第55-56页 |
3.2.4 PA4595基因对T3SS调节途径的探究 | 第56-59页 |
第四章 小结与讨论 | 第59-62页 |
4.1 铜绿假单胞菌中prmC基因在菌体中作用 | 第59-61页 |
4.2 PA4595蛋白定位及其对T3SS的调节 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-74页 |
致谢 | 第74页 |