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西瓜食酸菌抗铜性相关基因cusB的功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第1章 绪论第9-19页
   ·瓜类细菌性果斑病概况第9-15页
     ·BFB的危害第9-10页
     ·病原菌的生物学特征第10-11页
     ·发病症状第11-12页
     ·遗传多样性分析第12页
     ·寄主范围与分布第12-14页
     ·发生及传播规律第14页
     ·检疫措施和防治对策第14-15页
   ·植物相关铜抗性细菌研究进展第15-18页
     ·铜的生物学功能及毒理第15-16页
     ·抗铜基因在植物相关细菌中的分布第16-17页
     ·植物相关细菌铜抗性机制第17-18页
   ·研究目的及意义第18-19页
第2章 西瓜食酸菌Cus B蛋白的生物信息学分析第19-29页
   ·材料与方法第19页
   ·方法第19-20页
     ·cus B基因基本信息第19-20页
     ·病原菌膜融合蛋白的理化性质比较第20页
     ·病菌膜融合蛋白氨基酸序列比对及系统发育树构建第20页
     ·Cus B蛋白疏水性、跨膜结构域与磷酸化位点预测第20页
     ·Cus B序列信号肽预测及蛋白质到达的亚细胞位点第20页
     ·西瓜食酸菌Cus B序列Tat系统预测第20页
     ·西瓜食酸菌Cus B蛋白二级结构和三级结构的预测第20页
   ·结果与分析第20-27页
     ·cus B基因基本信息第20-21页
     ·革兰氏阴性菌膜融合蛋白的理化性质比较第21-22页
     ·病菌膜融合蛋白氨基酸序列比对及系统发育树构建第22-23页
     ·Cus B蛋白疏水性、跨膜结构域及磷酸化位点预测第23-24页
     ·Cus B序列信号肽预测及蛋白质到达的亚细胞位点第24-25页
     ·Cus B序列Tat系统预测第25-26页
     ·Cus B蛋白二级结构和三级结构预测第26-27页
   ·讨论第27-29页
第3章 西瓜食酸菌cus B基因克隆以及功能分析第29-55页
   ·实验材料第29-32页
     ·供试植株、质粒与菌株第29-30页
     ·引物第30-31页
     ·试剂及主要仪器第31页
     ·培养基第31-32页
   ·实验方法第32-42页
     ·野生型西瓜食酸菌FC440菌株基因组DNA提取第32-33页
     ·引物设计与PCR扩增目的基因cus B第33-34页
     ·目的片段的回收与纯化第34-35页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第35-36页
     ·cus B基因与T载体重组质粒的构建第36-37页
     ·质粒DNA提取与酶切验证第37-38页
     ·cus B基因表达载体的构建第38-39页
     ·cus B基因突变体功能互补菌株的制备第39-41页
     ·FC440-p HC60菌株的制备第41-42页
   ·cus B基因的表型分析第42-45页
     ·抗铜性检测第42-43页
     ·胞外纤维素酶检测第43页
     ·胞外蛋白酶检测第43-44页
     ·胞外多糖测定第44页
     ·生物膜形成检测第44页
     ·致病性及过敏性反应检测第44-45页
   ·结果与分析第45-53页
     ·目的片段的扩增第45-46页
     ·功能互补菌株的制备第46-47页
     ·互补菌株的验证第47-48页
     ·抗铜性检测第48-49页
     ·胞外纤维素酶分泌检测第49-50页
     ·胞外蛋白酶检测第50页
     ·胞外多糖的测定第50-51页
     ·生物膜形成检测第51-52页
     ·致病性及过敏性反应第52-53页
   ·小结与讨论第53-55页
第4章 全文结论第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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