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MSH1 RNAi干扰载体的构建及转基因芥菜的获得

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·植物雄性不育研究情况第10-11页
     ·植物雄性不育第10页
     ·细胞质雄性不育第10-11页
   ·植物线粒体基因组的特点第11-12页
   ·线粒体基因表达与细胞质雄性不育第12-13页
   ·核基因组中与线粒体基因组稳定性相关的基因第13-14页
     ·MSH1基因第13-14页
     ·RECA3基因第14页
     ·OSB1基因第14页
   ·核基因表达调控的线粒体重组与植株表型变化第14-16页
     ·MSH1基因表达调控的线粒体重组与表型变化第14-15页
     ·msh1 recA3双重突变体对线粒体重组与植株表型的影响第15-16页
   ·RNAi及反义RNA的研究与应用第16-22页
     ·RNAi的定义第16页
     ·RNAi的作用机制第16-17页
     ·RNAi的特点第17-18页
     ·反义RNA第18-19页
     ·RNAi及反义RNA在植物中的应用第19-22页
第二章 引言第22-24页
   ·研究的目的与意义第22-23页
   ·研究内容第23页
   ·研究的技术路线第23-24页
第三章 材料与方法第24-34页
   ·材料第24-25页
     ·实验材料第24页
     ·主要溶液与培养基第24-25页
     ·主要生化试剂第25页
     ·主要仪器设备第25页
   ·实验方法第25-34页
     ·甘蓝叶片RNA提取以及逆转录第25-26页
     ·甘蓝cDNA中MSH1基因的克隆及序列分析第26页
     ·芥菜MSH1基因序列与甘蓝MSH1基因序列的同源性比较第26页
     ·植物表达载体的构建第26-28页
     ·质粒转化农杆菌第28-29页
     ·农杆菌介导法转化芥菜第29-30页
     ·获得的转基因芥菜PCR检测第30-31页
     ·转基因芥菜的表型分析第31-32页
     ·转基因芥菜T_1代分析第32-34页
第四章 结果与分析第34-48页
   ·拟南芥、白菜、甘蓝MSH1基因序列的同源性比较第34-36页
   ·甘蓝MSH1基因RNAi干扰片段的获得第36-37页
   ·芥菜MSH1和甘蓝MSH1同源性分析第37-39页
   ·植物表达载体pCA13BarMSH1RNAi的构建及检测第39-42页
     ·MSH1 RNAi干扰植物表达载体pCA13BarMSH1RNAi的构建第39-40页
     ·pCA13BarMSH1RNAi载体检测第40-42页
   ·转基因芥菜的获得第42-44页
     ·农杆菌介导法获得转基因芥菜植株第42-43页
     ·抗除草剂芥菜的PCR检测第43-44页
   ·T_0代转基因芥菜的表型观察第44-45页
   ·转基因芥菜T_1代幼苗的PPT筛选和PCR检测第45-48页
第五章 讨论第48-50页
第六章 结论第50-52页
   ·MSH1基因序列在不同十字花科蔬菜中高度保守第50页
   ·利用甘蓝的MSH1基因片段构建了干扰载体第50页
   ·干扰载体pCA13BarMSH1RNAi被转入芥菜获得相应的转基因植株第50-52页
参考文献第52-60页
致谢第60-62页
附录第62-66页
 附录1 缩写词第62-63页
 附录2 人工拼接甘蓝的MSH1全长第63-65页
 附录3 从甘蓝cDNA中克隆得到的MSH1序列第65-66页
 附录4 在学期间发表文章第66页

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