| 致谢 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 摘要 | 第13-15页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-29页 |
| 1 小麦孢囊线虫病的发生与危害 | 第16-17页 |
| 2 生物防治在防治小麦孢囊线虫病中的应用 | 第17-19页 |
| ·利用生防真菌防治小麦孢囊线虫病 | 第17页 |
| ·利用生防细菌防治小麦孢囊线虫病 | 第17-18页 |
| ·利用生防放线菌防治小麦孢囊线虫病 | 第18页 |
| ·小麦孢囊线虫病的自然衰退与抑制性土壤 | 第18-19页 |
| 3 生防菌株在植物根际的定殖 | 第19-21页 |
| ·传统方法 | 第19-20页 |
| ·外源基因标记法 | 第20页 |
| ·利用特异性引物的PCR技术 | 第20-21页 |
| ·免疫学方法 | 第21页 |
| 4 基于绿色荧光蛋白标记的丝状真菌遗传转化 | 第21-24页 |
| ·绿色荧光蛋白 | 第21-22页 |
| ·绿色荧光蛋白的特征 | 第22页 |
| ·绿色荧光蛋白在丝状真菌研究中的应用 | 第22页 |
| ·丝状真菌遗传转化的方法 | 第22-24页 |
| ·PEG介导的原生质体转化法 | 第22-23页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第23-24页 |
| ·电激转化法 | 第24页 |
| ·基因枪转化法 | 第24页 |
| 5 土壤微生物的多样性研究技术 | 第24-29页 |
| ·高通量测序技术 | 第25-26页 |
| ·变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术 | 第26页 |
| ·基因克隆文库法 | 第26-29页 |
| 第二章 小麦孢囊线虫生防菌株的鉴定及防效测定 | 第29-49页 |
| 1 材料与方法 | 第30-35页 |
| ·供试生防菌株 | 第30页 |
| ·主要培养基和溶液 | 第30页 |
| ·生防菌株的鉴定 | 第30-32页 |
| ·形态学鉴定 | 第30页 |
| ·生理生化鉴定 | 第30-31页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第31-32页 |
| ·生防菌株对小麦孢囊线虫的离体活性测定 | 第32-33页 |
| ·病土的采集与孢囊的分离 | 第32页 |
| ·卵悬浮液和线虫液的制备 | 第32页 |
| ·生防菌株发酵滤液的制备 | 第32页 |
| ·生防菌株发酵滤液对CCN卵孵化的抑制作用和对二龄线虫的致死作用 | 第32-33页 |
| ·生防真菌 08F04对卵和线虫的寄生作用 | 第33页 |
| ·生防菌株的防效测定 | 第33-35页 |
| ·供试小麦品种及对照药剂 | 第33页 |
| ·生防菌剂的制备 | 第33页 |
| ·室内防效测定 | 第33-34页 |
| ·生防菌株对小麦孢囊线虫病的田间防效测定 | 第34页 |
| ·生防菌剂对小麦植株的安全性评价 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-46页 |
| ·生防菌株的鉴定 | 第35-40页 |
| ·生防真菌 08F04的鉴定 | 第35-36页 |
| ·生防细菌 09B18和 09X01的鉴定 | 第36-38页 |
| ·生防放线菌S07的鉴定 | 第38-40页 |
| ·生防菌株对小麦孢囊线虫的离体活性测定 | 第40-41页 |
| ·生防菌株发酵滤液对J2的致死作用和对卵孵化的抑制作用 | 第40-41页 |
| ·生防真菌 08F04对卵和线虫的寄生作用 | 第41页 |
| ·生防菌株对小麦孢囊线虫病的室内防效测定 | 第41-42页 |
| ·生防菌株对小麦孢囊线虫病的田间防效测定 | 第42-43页 |
| ·生防菌株对小麦植株的安全性评价 | 第43-46页 |
| 3 结论与讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 球孢白僵菌 08F04菌株的绿色荧光标记及定殖研究 | 第49-69页 |
| 1 材料与方法 | 第50-57页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·仪器 | 第50-51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·引物 | 第51页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株的绿色荧光标记 | 第51-55页 |
| ·p CAM-gfp质粒的提取 | 第51-52页 |
| ·p CAM-gfp质粒转化农杆菌AGL-1 感受态细胞 | 第52页 |
| ·农杆菌AGL-1 转化子的筛选及验证 | 第52页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株对潮霉素B的敏感浓度筛选 | 第52页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株的遗传转化 | 第52-53页 |
| ·转化子的筛选 | 第53页 |
| ·转化子的PCR验证 | 第53页 |
| ·转化子的Southern杂交验证 | 第53-54页 |
| ·转化子的荧光检测 | 第54页 |
| ·转化子的稳定性，菌落形态及生长速度的测定 | 第54页 |
| ·转化子对孢囊寄生作用的测定 | 第54-55页 |
| ·利用real-time PCR和平板菌落计数研究生防菌株的定殖能力 | 第55-57页 |
| ·盆栽种植及取样 | 第55页 |
| ·土壤总DNA的提取 | 第55-56页 |
| ·Real-time PCR引物特异性的测定 | 第56页 |
| ·Real-time PCR标准曲线的构建及引物的灵敏度测定 | 第56-57页 |
| ·利用real-time PCR研究菌株定殖能力 | 第57页 |
| ·利用平板菌落计数研究菌株定殖能力 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-66页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株的绿色荧光标记 | 第57-61页 |
| ·真菌表达载体p CAM-gfp的农杆菌AGL-1 转化 | 第57页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株对潮霉素B的敏感浓度筛选 | 第57-58页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株的遗传转化和转化子的获得 | 第58页 |
| ·转化子的PCR验证 | 第58-59页 |
| ·转化子的Southern杂交验证 | 第59页 |
| ·转化子的荧光检测 | 第59-60页 |
| ·转化子的遗传稳定性分析 | 第60页 |
| ·转化子菌落形态及生长速度的测定 | 第60-61页 |
| ·转化子对小麦孢囊线虫的寄生作用测定 | 第61页 |
| ·利用real-time PCR和平板菌落计数研究生防菌株的定殖能力 | 第61-66页 |
| ·土壤总DNA的提取 | 第61-62页 |
| ·Real-time PCR引物特异性的测定 | 第62页 |
| ·Real-time PCR引物的灵敏度测定 | 第62-63页 |
| ·Real-time PCR标准曲线的构建 | 第63-64页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株在室内盆栽中的定殖情况研究 | 第64-65页 |
| ·室内盆栽中球孢白僵菌 08F04转化子G10对孢囊的寄生作用 | 第65-66页 |
| 3 结论与讨论 | 第66-69页 |
| 第四章 球孢白僵菌 08F04菌株对土壤微生物多样性的影响 | 第69-103页 |
| 1 材料与方法 | 第70-71页 |
| ·供试生防菌株及生防菌剂的制备 | 第70页 |
| ·生防菌的施用和播种 | 第70页 |
| ·土壤样品的采集 | 第70页 |
| ·土壤基因组的DNA提取 | 第70页 |
| ·PCR扩增及产物纯化 | 第70-71页 |
| ·建库及高通量测序 | 第71页 |
| ·数据分析 | 第71页 |
| ·测序数据预处理及质控 | 第71页 |
| ·OTU分析及物种注释 | 第71页 |
| ·样品复杂度分析 | 第71页 |
| 2 结果分析 | 第71-100页 |
| ·土壤总DNA的提取和PCR扩增 | 第71-72页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株对土壤真菌多样性的影响 | 第72-87页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株对郑州地区土壤真菌多样性的影响 | 第72-84页 |
| ·球孢白僵菌株 08F04菌株对许昌地区土壤真菌多样性的影响 | 第84-87页 |
| ·球孢白僵菌株 08F04菌株对土壤细菌多样性的影响 | 第87-100页 |
| ·球孢白僵菌株 08F04菌株对郑州地区土壤细菌多样性的影响 | 第87-97页 |
| ·球孢白僵菌 08F04菌株对许昌地区土壤细菌多样性的影响 | 第97-100页 |
| 3 结论与讨论 | 第100-103页 |
| 参考文献 | 第103-119页 |
| 附：攻读博士学位期间发表的论文 | 第119页 |
