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松树PicW同源基因的克隆及抗冻功能分析

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
缩略词表第5-9页
1 引言第9-21页
   ·植物抗冻蛋白的研究第9-14页
     ·植物抗冻蛋白第10-12页
     ·植物抗冻相关蛋白第12-14页
   ·脱水素蛋白的研究进展第14-16页
     ·脱水素蛋白的结构特征第14-15页
     ·脱水素的功能及作用机制第15-16页
   ·抗冻蛋白的研究技术第16-18页
     ·热滞活性测定第16-18页
     ·冰晶形态分析第18页
   ·研究目的和意义第18-19页
   ·技术路线第19-21页
2 美国花旗松和华北落叶松PicW同源基因的克隆和生物信息学分析第21-37页
   ·材料与方法第21-26页
     ·实验材料第21页
     ·实验方法第21-26页
       ·植物DNA提取第21-22页
       ·植物RNA提取第22-23页
       ·目的基因的克隆第23-24页
       ·目的片段回收第24页
       ·目的片段与克隆载体连接第24-25页
       ·大肠杆菌Top10感受态细胞的制备与转化第25页
       ·鉴定阳性克隆第25-26页
       ·基因序列及蛋白结构的预测分析软件第26页
   ·研究结果第26-36页
     ·火炬松基因组数据库中PicW同源基因的鉴定第26-27页
     ·美国花旗松和华北落叶松的PicW同源基因的表达模式分析第27-28页
     ·美国花旗松和华北落叶松PicW同源基因全长的克隆第28-30页
     ·PmCAP和LpCAP基因的生物信息学分析第30-36页
   ·讨论第36-37页
3 PmCAP和LpCAP基因原核表达载体的构建及蛋白提取纯化第37-45页
   ·材料与方法第37-40页
     ·实验材料第37-38页
     ·实验方法第38-40页
   ·研究结果第40-44页
     ·PmCAP和LpCAP基因原核表达载体的构建第40-41页
     ·PmCAP和LpCAP基因的转化第41-42页
     ·PmCAP和LpCAP蛋白的诱导表达第42-43页
     ·PmCAP和LpCAP蛋白的纯化第43-44页
   ·讨论第44-45页
4 PmCAP和LpCAP蛋白的功能分析第45-53页
   ·材料与方法第45-46页
     ·目的蛋白溶液配制第45页
     ·PmCAP和LpCAP蛋白的热滞值测定第45页
     ·低温下细胞存活率检测与分析第45-46页
   ·实验结果第46-51页
     ·PmCAP和LpCAP蛋白的热滞值测定第46-48页
     ·PmCAP和LpCAP基因转化大肠杆菌的抗冻性分析第48-51页
   ·讨论第51-53页
5 结论第53-55页
参考文献第55-61页
个人简介第61-63页
导师简介第63-65页
获得成果目录第65-67页
致谢第67页

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