| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 主要缩略词对照表 | 第8-13页 |
| 第一章 升麻中一种新环菠萝蜜烷型三萜类化合物SM306诱导MCF-7细胞凋亡及其机制的研究 | 第13-41页 |
| 1 前言 | 第13-19页 |
| ·程序性细胞死亡 | 第13页 |
| ·凋亡 | 第13-18页 |
| ·凋亡分子机制 | 第13-15页 |
| ·Caspase家族 | 第15页 |
| ·Bcl-2家族与线粒体 | 第15-16页 |
| ·p53、JNK与凋亡 | 第16-18页 |
| ·升麻中环菠萝蜜烷型三萜类成分研究现状 | 第18-19页 |
| ·研究目的及意义 | 第19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-29页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·药品及试剂 | 第19-21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂配置方法 | 第22-24页 |
| ·实验方法 | 第24-29页 |
| ·细胞培养 | 第24-25页 |
| ·肿瘤细胞体外增殖抑制实验 | 第25页 |
| ·克隆形成实验 | 第25页 |
| ·Hoechst 33258染色观察 | 第25页 |
| ·PI单染法检测细胞周期 | 第25-26页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第26页 |
| ·线粒体膜电位(MMP)的检测 | 第26页 |
| ·Western blot免疫印迹法 | 第26-29页 |
| ·统计学分析 | 第29页 |
| 3 实验结果 | 第29-37页 |
| ·SM306具有较好的体外抗肿瘤活性 | 第29-31页 |
| ·体外细胞毒性筛选 | 第29-30页 |
| ·SM306明显抑制MCF-7细胞的克隆形成能力 | 第30-31页 |
| ·SM306诱导MCF-7细胞发生周期阻滞 | 第31-32页 |
| ·SM306诱导MCF-7细胞周期阻滞于G_2/M期 | 第31-32页 |
| ·SM306对周期相关蛋白水平的影响 | 第32页 |
| ·SM306诱导MCF-7细胞发生凋亡 | 第32-35页 |
| ·SM306诱导MCF-7细胞染色质凝集 | 第32-33页 |
| ·SM306引起MCF-7细胞凋亡率增加 | 第33-34页 |
| ·SM306对凋亡标志性蛋白PARP的影响 | 第34-35页 |
| ·SM306激活线粒体凋亡信号通路并抑制Akt蛋白的磷酸化 | 第35-36页 |
| ·SM306引起MCF-7细胞线粒体膜电位下降 | 第35页 |
| ·SM306对线粒体凋亡信号通路相关蛋白水平的影响 | 第35-36页 |
| ·SM306抑制Raf/MEK/ERK信号通路 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-41页 |
| 第二章 升麻中环菠萝蜜烷型三萜类化合物SM308诱导HepG2/ADM细胞自噬流损伤及凋亡的机制研究 | 第41-73页 |
| 1 前言 | 第41-51页 |
| ·自噬 | 第41-47页 |
| ·自噬的定义及分类 | 第41-42页 |
| ·自噬相关蛋白 | 第42-43页 |
| ·细胞自噬活性的检测 | 第43-47页 |
| ·自噬相关信号通路 | 第47-49页 |
| ·自噬损伤与疾病 | 第49-50页 |
| ·研究目的及意义 | 第50-51页 |
| 2 实验材料与方法 | 第51-54页 |
| ·实验材料 | 第51-53页 |
| ·细胞株 | 第51页 |
| ·药品及试剂 | 第51-52页 |
| ·实验仪器 | 第52页 |
| ·主要试剂配置方法 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·细胞培养 | 第53页 |
| ·肿瘤细胞体外增殖抑制实验 | 第53页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第53页 |
| ·MDC染色观察 | 第53页 |
| ·细胞亚显微结构观察 | 第53页 |
| ·Western blot免疫印迹法 | 第53-54页 |
| ·siRNA转染 | 第54页 |
| ·细胞免疫荧光分析 | 第54页 |
| ·统计学分析 | 第54页 |
| 3 实验结果 | 第54-68页 |
| ·SM308对HepG2/ADM细胞具有显著的增殖抑制作用 | 第54-56页 |
| ·SM308诱导HepG2/ADM细胞自噬流损伤 | 第56-61页 |
| ·SM308诱导HepG2/ADM细胞出现MDC染色呈阳性的酸性囊泡 | 第56-57页 |
| ·SM308对HepG2/ADM细胞自噬相关蛋白水平的影响 | 第57-58页 |
| ·SM308抑制HepG2/ADM细胞自噬流 | 第58-59页 |
| ·SM308抑制HepG2/ADM细胞自噬溶酶体中包裹物的降解 | 第59-60页 |
| ·SM308抑制HepG2/ADM细胞溶酶体的酶活性 | 第60-61页 |
| ·PI3K/Akt信号通路异常活化与SM308诱导的细胞自噬流损伤的相关性 | 第61-64页 |
| ·SM308诱导HepG2/ADM细胞PI3K/Akt信号通路异常活化 | 第61-62页 |
| ·抑制PI3K可减轻SM308对HepG2/ADM细胞自噬流的抑制 | 第62-63页 |
| ·Akt siRNA预处理可减轻SM308对HepG2/ADM细胞自噬流的抑制 | 第63-64页 |
| ·SM308诱导HepG2/ADM细胞发生凋亡 | 第64-66页 |
| ·SM308对HepG2/ADM细胞凋亡率的影响 | 第64页 |
| ·SM308对凋亡相关蛋白水平的影响 | 第64-65页 |
| ·泛Caspase抑制剂和Caspase 8抑制剂对SM308抑制HepG2/ADM细胞增殖的影响 | 第65-66页 |
| ·SM308诱导细胞自噬流损伤与其诱导的细胞凋亡的相关性 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-73页 |
| ·SM308诱导HepG2/ADM细胞自噬流损伤的探讨 | 第68-69页 |
| ·PI3K/Akt信号通路异常活化与SM308诱导的细胞自噬流损伤的相关性探讨 | 第69-70页 |
| ·SM308诱导细胞自噬流损伤与其诱导的细胞凋亡相关性探讨 | 第70-73页 |
| 第三章 研究创新点及展望 | 第73-74页 |
| ·研究创新点 | 第73页 |
| ·研究展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 附录 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
