| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-17页 |
| 第一部分 Vero细胞无血清培养基的研制 | 第17-48页 |
| 1. 实验材料 | 第17-18页 |
| ·细胞株 | 第17页 |
| ·细胞培养基 | 第17页 |
| ·细胞培养基添加成分 | 第17页 |
| ·实验试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| 2. 实验方法 | 第18-27页 |
| ·种子细胞复苏 | 第18-19页 |
| ·细胞传代 | 第19页 |
| ·细胞无血清饥饿 | 第19页 |
| ·无血清培养基的优化 | 第19-20页 |
| ·无血清细胞冻存 | 第20页 |
| ·分析方法 | 第20-22页 |
| ·细胞形态学观察 | 第20页 |
| ·细胞计数 | 第20-21页 |
| ·长期稳定性实验 | 第21页 |
| ·细胞生长曲线绘制 | 第21页 |
| ·CCK-8法测定细胞增值 | 第21-22页 |
| ·统计学分析 | 第22页 |
| ·无血清培养基优化设计 | 第22-26页 |
| ·单因素实验 | 第23页 |
| ·Plackett-Burman实验设计 | 第23-25页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第25页 |
| ·中心组合实验 | 第25-26页 |
| ·优化组合验证 | 第26-27页 |
| 3. 结果和分析 | 第27-38页 |
| ·单因素实验 | 第27-29页 |
| ·Plackett-Burman实验结果 | 第29-30页 |
| ·最陡爬坡实验结果 | 第30-32页 |
| ·中心组合实验结果 | 第32-35页 |
| ·优化组合的验证 | 第35页 |
| ·长期稳定性实验 | 第35-37页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第37-38页 |
| 讨论 | 第38-40页 |
| 小结 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 第二部分 Vero细胞无血清培养基培养H5N1流感病毒 | 第48-63页 |
| 1. 实验材料 | 第48-49页 |
| ·病毒株 | 第48页 |
| ·细胞株 | 第48页 |
| ·主要仪器设备 | 第48-49页 |
| ·实验试剂 | 第49页 |
| 2. 实验方法 | 第49-51页 |
| ·流感病毒A/Anhui/1/2005 Va(H5N1)的扩增 | 第49-50页 |
| ·流感病毒A/Anhui/1/2005 Va(H5N1)的收获 | 第50页 |
| ·MOI的计算 | 第50页 |
| ·病毒测定 | 第50-51页 |
| ·感染性滴度测定(TCID50) | 第50-51页 |
| ·病毒血凝值(HA)测定 | 第51页 |
| ·统计学分析 | 第51页 |
| 3. 结果与分析 | 第51-59页 |
| ·流感病毒感染SFM-Vero20细胞的条件优化 | 第51-56页 |
| ·TPCK-胰蛋白酶添加量的优化 | 第51-53页 |
| ·补加TPCK-胰蛋白酶的影响 | 第53-54页 |
| ·MOI的优化 | 第54-56页 |
| ·三种培养基中Vero细胞生产病毒情况对比 | 第56-59页 |
| 讨论 | 第59-61页 |
| 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 附录Ⅰ缩略词表 | 第63-64页 |
| 附录Ⅱ 主要溶液及培养基配置 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简历 | 第71-73页 |
