摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第1章 前言 | 第8-10页 |
第2章 实验材料 | 第10-13页 |
·实验对象 | 第10页 |
·主要实验仪器 | 第10页 |
·实验试剂 | 第10-12页 |
·主要试剂配制 | 第12-13页 |
第3章 实验方法与步骤 | 第13-27页 |
·实验相关器材的准备与处理 | 第13页 |
·细胞培养级玻璃容器的清洗及消毒 | 第13页 |
·提取RNA耗材 | 第13页 |
·细胞培养 | 第13-14页 |
·复苏及培养 | 第13页 |
·细胞传代 | 第13-14页 |
·细胞冻存 | 第14页 |
·姜黄素母液的配制 | 第14-15页 |
·姜黄素物理特性 | 第14-15页 |
·具体步骤 | 第15页 |
·MTS法检测姜黄素对A549细胞增殖影响 | 第15-16页 |
·MTS法原理 | 第15页 |
·操作步骤 | 第15-16页 |
·q RT-PCR法测定不同浓度姜黄素处理后的A549细胞miR-21表达情况 | 第16-20页 |
·不同浓度姜黄素处理A549细胞 | 第16页 |
·提取总RNA | 第16-18页 |
·miRNA cDNA第一链的合成 | 第18-19页 |
·SYBR Green I法进行miR-21的荧光定量检测 | 第19-20页 |
·细胞转染 | 第20-22页 |
·实验分组 | 第20-21页 |
·使用lipofectamine 2000(Invitrogen)进行细胞转染 | 第21-22页 |
·miR-21的转染方法同si RNA | 第22页 |
·Western Blot法检测转染前后PTEN蛋白水平的表达 | 第22-25页 |
·蛋白样品制备 | 第22-23页 |
·BCA法进行蛋白定量 | 第23页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第23-24页 |
·转膜 | 第24-25页 |
·免疫反应 | 第25页 |
·ECL化学发光显影 | 第25页 |
·统计学方法 | 第25-27页 |
第4章 实验结果 | 第27-33页 |
·姜黄素对肺腺癌A549细胞增殖的影响 | 第27-28页 |
·姜黄素对miR-21在A549细胞中表达的影响 | 第28-30页 |
·沉默PTEN基因、过表达miR-21分别与姜黄素处理对A549细胞PTEN蛋白表达的影响 | 第30-33页 |
·沉默PTEN基因与姜黄素处理对A549细胞PTEN蛋白表达的影响 | 第30-31页 |
·过表达miR-21与姜黄素处理对A549细胞PTEN蛋白表达的影响 | 第31-33页 |
第5章 讨论 | 第33-36页 |
第6章 结论与展望 | 第36-37页 |
·结论 | 第36页 |
·展望 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
综述 | 第42-50页 |
参考文献 | 第46-50页 |