摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
前言 | 第15-18页 |
主要材料与试剂 | 第18-23页 |
1 实验用细胞株 | 第18页 |
2 主要试剂和产地 | 第18-19页 |
3 主要仪器及产地 | 第19-20页 |
4 试剂的配制 | 第20-23页 |
第一部分 绝经后妇女ERβ 基因多态性与膳食植物雌激素骨密度效应关联研究 | 第23-42页 |
1 资料与方法 | 第23-31页 |
·前期研究 | 第23-25页 |
·植物雌激素摄入量 | 第23-24页 |
·不同剂量植物雌激素摄入量与骨密度 | 第24-25页 |
·全血基因组DNA提取 | 第25-26页 |
·候选基因的选择 | 第26-27页 |
·候选基因位点的PCR扩增 | 第27-28页 |
·PCR产物酶切 | 第28-29页 |
·PCR产物及酶切产物的鉴定 | 第29-30页 |
·PCR产物的鉴定 | 第29页 |
·PCR产物纯化 | 第29页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定酶切产物 | 第29-30页 |
·质量控制 | 第30-31页 |
2 结果分析及统计 | 第31-32页 |
3 结果 | 第32-39页 |
·基因多态性检测结果 | 第32-33页 |
·ERβ AluI,RsaI酶切位点基因型与骨密度 | 第33-36页 |
·不同剂量植物雌激素摄入量对AluI,RsaI酶切位点各基因型的骨密度影响 | 第36-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
第二部分 细胞实验: 金雀异黄酮对成骨细胞和破骨细胞效应的受体分析 | 第42-58页 |
1 材料与方法 | 第42-47页 |
·细胞培养 | 第42-43页 |
·细胞复苏与换液 | 第42页 |
·细胞传代 | 第42-43页 |
·实验分组 | 第43-44页 |
·成骨细胞诱导模型的建立以及实验分组 | 第43页 |
·破骨细胞诱导模型的建立以及实验分组 | 第43-44页 |
·检测方法 | 第44-47页 |
·碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ERβ 阻断后GEN对MC3T3-E1向成熟成骨细胞分化能力的影响 | 第44-45页 |
·茜素红染色观察在ER阻断后GEN对成骨细胞矿化功能的影响 | 第45页 |
·酸酸性磷酸酶(TRAP)染色试剂盒观察GEN对ERβ 阻断后RAW264.7 细胞的破骨化能力的影响 | 第45-46页 |
·ER阻断后GEN对体外破骨细胞骨吸收能力的影响 | 第46-47页 |
2 结果 | 第47-54页 |
·碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ERβ 阻断后GEN对MC3T3向成熟成骨细胞分化能力的影响 | 第47-49页 |
·茜素红染色观察在 ER 阻断后 GEN 对成骨细胞矿化功能的影响 | 第49-50页 |
·抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色试剂盒观察GEN对ER阻断后RAW264.7 细胞的破骨化能力的影响 | 第50-52页 |
·ER阻断后GEN对体外破骨细胞骨吸收能力的影响 | 第52-54页 |
3 讨论 | 第54-57页 |
4 结论 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
综述 | 第63-72页 |
参考文献 | 第68-72页 |