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雌激素受体β介导植物雌激素骨代谢效应的流行病学与细胞学研究

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
前言第15-18页
主要材料与试剂第18-23页
 1 实验用细胞株第18页
 2 主要试剂和产地第18-19页
 3 主要仪器及产地第19-20页
 4 试剂的配制第20-23页
第一部分 绝经后妇女ERβ 基因多态性与膳食植物雌激素骨密度效应关联研究第23-42页
 1 资料与方法第23-31页
   ·前期研究第23-25页
     ·植物雌激素摄入量第23-24页
     ·不同剂量植物雌激素摄入量与骨密度第24-25页
   ·全血基因组DNA提取第25-26页
   ·候选基因的选择第26-27页
   ·候选基因位点的PCR扩增第27-28页
   ·PCR产物酶切第28-29页
   ·PCR产物及酶切产物的鉴定第29-30页
     ·PCR产物的鉴定第29页
     ·PCR产物纯化第29页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定酶切产物第29-30页
   ·质量控制第30-31页
 2 结果分析及统计第31-32页
 3 结果第32-39页
   ·基因多态性检测结果第32-33页
   ·ERβ AluI,RsaI酶切位点基因型与骨密度第33-36页
   ·不同剂量植物雌激素摄入量对AluI,RsaI酶切位点各基因型的骨密度影响第36-39页
 4 讨论第39-41页
 5 结论第41-42页
第二部分 细胞实验: 金雀异黄酮对成骨细胞和破骨细胞效应的受体分析第42-58页
 1 材料与方法第42-47页
   ·细胞培养第42-43页
     ·细胞复苏与换液第42页
     ·细胞传代第42-43页
   ·实验分组第43-44页
     ·成骨细胞诱导模型的建立以及实验分组第43页
     ·破骨细胞诱导模型的建立以及实验分组第43-44页
   ·检测方法第44-47页
     ·碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ERβ 阻断后GEN对MC3T3-E1向成熟成骨细胞分化能力的影响第44-45页
     ·茜素红染色观察在ER阻断后GEN对成骨细胞矿化功能的影响第45页
     ·酸酸性磷酸酶(TRAP)染色试剂盒观察GEN对ERβ 阻断后RAW264.7 细胞的破骨化能力的影响第45-46页
     ·ER阻断后GEN对体外破骨细胞骨吸收能力的影响第46-47页
 2 结果第47-54页
   ·碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ERβ 阻断后GEN对MC3T3向成熟成骨细胞分化能力的影响第47-49页
   ·茜素红染色观察在 ER 阻断后 GEN 对成骨细胞矿化功能的影响第49-50页
   ·抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色试剂盒观察GEN对ER阻断后RAW264.7 细胞的破骨化能力的影响第50-52页
   ·ER阻断后GEN对体外破骨细胞骨吸收能力的影响第52-54页
 3 讨论第54-57页
 4 结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-63页
综述第63-72页
 参考文献第68-72页

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