| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-20页 |
| 第一章 立题背景 | 第20-35页 |
| ·基因载体 | 第20-22页 |
| ·病毒型基因载体 | 第20-21页 |
| ·非病毒型基因载体 | 第21-22页 |
| ·阳离子聚合物基因传递的途径及屏障 | 第22-27页 |
| ·聚合物结构 | 第23页 |
| ·血清稳定性 | 第23-24页 |
| ·细胞吸收 | 第24-25页 |
| ·内涵体逃逸 | 第25-26页 |
| ·DNA的释放 | 第26页 |
| ·细胞核的内含化作用 | 第26-27页 |
| ·典型阳离子聚合物基因载体 | 第27-31页 |
| ·局部降解PAMAM(Superfect) | 第28页 |
| ·PAMAM的PEG修饰 | 第28-29页 |
| ·PAMAM的氨基酸修饰 | 第29页 |
| ·PAMAM的谷氨酰胺修饰 | 第29页 |
| ·PAMAM的壳聚糖修饰 | 第29-30页 |
| ·PAMAM的药物、病毒修饰 | 第30页 |
| ·多功能化PAMAM接枝物 | 第30-31页 |
| ·PAMAM的内核修饰 | 第31页 |
| ·环糊精作为基因载体的研究 | 第31-33页 |
| ·本研究目的、意义和内容 | 第33-35页 |
| 第二章 α-CD-PAMAM聚合物的合成与表征 | 第35-49页 |
| ·试剂和仪器 | 第35-36页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-39页 |
| ·PAMAM的合成 | 第36-37页 |
| ·α-CD-PAMAM的合成 | 第37-38页 |
| ·α-CD-PAMAM的FT-IR分析 | 第38页 |
| ·α-CD-PAMAM的1H NMR核磁分析 | 第38-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-48页 |
| ·PAMAM的合成 | 第39-40页 |
| ·α-CD-PAMAM的合成 | 第40-42页 |
| ·α-CD-PAMAM的FT-IR检测 | 第42-44页 |
| ·α-CD-PAMAM的1H NMR检测 | 第44-47页 |
| ·α-CD-PAMAM的构象分析 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第三章 α-CD-PAMAM/PDNA复合物的性能研究 | 第49-65页 |
| ·试剂和仪器 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·仪器 | 第50页 |
| ·试验方法 | 第50-53页 |
| ·LB液体培养基的配制 | 第50-51页 |
| ·pEGFP-C1的提取制备 | 第51-52页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物溶液的配制 | 第52页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物的粒径电位测定 | 第52页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物的凝胶阻滞电泳 | 第52-53页 |
| ·聚合物与pDNA结合比例分析 | 第53页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物对DNase Ⅰ的稳定性实验 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-63页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物的凝胶阻滞电泳 | 第53-54页 |
| ·聚合物与pDNA结合比例分析 | 第54-56页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物对DNase Ⅰ的稳定性 | 第56-57页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物的粒径分析 | 第57-61页 |
| ·阳离子载体/pDNA复合物的粒度分布 | 第61-62页 |
| ·聚合物载体/pDNA复合物的表面电位分析 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第四章 α-CD-PAMAM聚合物的细胞毒性试验 | 第65-82页 |
| ·试剂和仪器 | 第66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·仪器 | 第66页 |
| ·试验方法 | 第66-69页 |
| ·细胞培养 | 第66-67页 |
| ·聚合物储备溶液的配制 | 第67页 |
| ·聚合物CD-PG1、CD-PG2的细胞毒性考察 | 第67页 |
| ·聚合物CD-PG1、CD-PG2在不同细胞系中的细胞活力 | 第67-68页 |
| ·细胞形态观察 | 第68页 |
| ·聚合物的体外溶血毒性考察 | 第68-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-81页 |
| ·MTT比色法测定细胞活力 | 第69-75页 |
| ·细胞形态观察 | 第75-77页 |
| ·聚合物体外溶血性考察 | 第77-81页 |
| ·本章小结 | 第81-82页 |
| 第五章 α-CD-PAMAM聚合物介导基因体外细胞转染研究 | 第82-116页 |
| ·试剂和仪器 | 第82-83页 |
| ·试剂 | 第82-83页 |
| ·仪器 | 第83页 |
| ·试验方法 | 第83-88页 |
| ·细胞培养 | 第83页 |
| ·pEGFP-C1质粒的提取 | 第83-85页 |
| ·体外细胞转染 | 第85页 |
| ·不同细胞系中的转染实验 | 第85-86页 |
| ·细胞转染率的测定 | 第86页 |
| ·不同质粒用量对于转染率的影响 | 第86页 |
| ·不同转染时间对于转染率的影响 | 第86-87页 |
| ·血清的存在对于细胞转染率的影响 | 第87页 |
| ·复合物进入细胞的激光共聚焦观察 | 第87-88页 |
| ·统计学分析 | 第88页 |
| ·结果与讨论 | 第88-114页 |
| ·聚合物CD-PG1和CD-PG2的体外转染结果 | 第88-93页 |
| ·聚合物CD-PG1和CD-PG2在不同细胞系体外转染考察 | 第93-99页 |
| ·不同质粒用量对于体外细胞转染的影响 | 第99-100页 |
| ·不同孵育时间对体外细胞转染的影响 | 第100-101页 |
| ·血清对CD-PG2转染效率的影响 | 第101-103页 |
| ·复合物细胞吸收动力学研究 | 第103-106页 |
| ·环糊精对细胞体外转染的影响研究 | 第106-114页 |
| ·本章小结 | 第114-116页 |
| 第六章 α-CD-PAMAM/PDNA复合物细胞吸收途径研究 | 第116-132页 |
| ·试剂和仪器 | 第116-117页 |
| ·试剂 | 第116-117页 |
| ·仪器 | 第117页 |
| ·试验方法 | 第117-120页 |
| ·细胞培养 | 第117页 |
| ·细胞转染实验 | 第117-118页 |
| ·细胞转染率的测定 | 第118页 |
| ·不同孵育温度对复合物吸收的影响 | 第118-119页 |
| ·代谢抑制剂对复合物吸收的影响 | 第119页 |
| ·高渗溶液对复合物吸收的影响 | 第119-120页 |
| ·吸收途径抑制剂对复合物吸收的影响 | 第120页 |
| ·结果与讨论 | 第120-130页 |
| ·CD-PG2/pDNA复合物的细胞吸收方式 | 第121-123页 |
| ·高渗溶液对复合物的吸收的影响 | 第123-124页 |
| ·CD-PG2/pDNA复合物的吸收途径考察 | 第124-128页 |
| ·α-CD对PAMAM吸收的影响 | 第128-130页 |
| ·本章小结 | 第130-132页 |
| 第七章 α-CD-PAMAM聚合物与细胞膜的相互作用研究 | 第132-145页 |
| ·试剂和仪器 | 第132-133页 |
| ·试剂 | 第132-133页 |
| ·仪器 | 第133页 |
| ·试验方法 | 第133-135页 |
| ·细胞培养 | 第133页 |
| ·聚合物储备溶液的配制 | 第133页 |
| ·聚合物诱导细胞LDH渗漏研究 | 第133-134页 |
| ·LDH的微板法测定 | 第134页 |
| ·不同浓度聚合物对LDH渗漏的影响 | 第134-135页 |
| ·温度对LDH渗漏的影响 | 第135页 |
| ·α-CD对LDH渗漏的影响 | 第135页 |
| ·统计学分析 | 第135页 |
| ·结果与讨论 | 第135-144页 |
| ·LDH检测标准曲线的绘制 | 第135-136页 |
| ·不同浓度聚合物对LDH渗漏的影响 | 第136-138页 |
| ·温度对LDH渗漏的影响 | 第138-140页 |
| ·α-CD对LDH渗漏的影响 | 第140-144页 |
| ·本章小结 | 第144-145页 |
| 参考文献 | 第145-161页 |
| 本研究主要创新点 | 第161-162页 |
| 攻读博士期间的论文成果 | 第162-163页 |
| 致谢 | 第163-165页 |
| 统计学审稿证明 | 第165页 |
