| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1. 湖羊品种简介 | 第10-12页 |
| ·湖羊的产区与分布情况 | 第10页 |
| ·体型外貌 | 第10页 |
| ·肉用性能 | 第10-11页 |
| ·产皮性能 | 第11页 |
| ·繁殖性能 | 第11-12页 |
| 2. Hippo通路的研究进展 | 第12-14页 |
| 3. Lats1基因简介 | 第14页 |
| 4. 本研究的目的与意义 | 第14-16页 |
| 第二章 湖羊Lats1基因克隆及生物信息学分析 | 第16-28页 |
| 1. 材料与方法 | 第16-19页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·总RNA的提取和RT-PCR反应 | 第16-17页 |
| ·引物设计和PCR扩增 | 第17-18页 |
| ·PCR产物回收、连接和转化 | 第18页 |
| ·重组质粒的筛选及鉴定 | 第18页 |
| ·Lats1基因序列测定及生物信息学分析 | 第18-19页 |
| 2. 结果与分析 | 第19-26页 |
| ·总RNA的纯度与完整性 | 第19页 |
| ·PCR扩增 | 第19-20页 |
| ·测序结果分析 | 第20页 |
| ·Lats1基因同源性和系统发育树分析 | 第20-21页 |
| ·湖羊Lats1基因蛋白结构分析 | 第21-26页 |
| 3. 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 湖羊Lats1基因的多态性及其与肌肉生长性状的关联分析 | 第28-36页 |
| 1 试验材料与方法 | 第28-32页 |
| ·试验动物 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要试剂的配置 | 第29页 |
| ·DNA提取 | 第29-30页 |
| ·引物设计 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增 | 第31页 |
| ·PCR-SSCP分析 | 第31页 |
| ·PCR产物测序 | 第31-32页 |
| ·数据统计分析 | 第32页 |
| 2 结果 | 第32-35页 |
| ·引物的扩增效果检测 | 第32页 |
| ·PCR-SSCP检测 | 第32-33页 |
| ·测序结果分析 | 第33页 |
| ·Lats1基因在湖羊中的遗传多态性 | 第33-34页 |
| ·Lats1基因的群体遗传特性分析 | 第34页 |
| ·Lats1基因外显子4的多态性与湖羊生长性状的关联分析 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 湖羊Lats1基因与YAP1基因、肌球蛋白重链亚型(MyHCⅠ、MyHCⅡA、MyHCⅡX)基因、MSTN、MyoG的时空表达研究及其与此六个基因的表达相关分析 | 第36-50页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| ·试验动物 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·总RNA的提取 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR引物的设计与合成 | 第37页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第37-38页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第38页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-48页 |
| ·总RNA的纯度与完整性 | 第39页 |
| ·扩增产物特异性 | 第39-41页 |
| ·Lats1基因在湖羊肌肉中的时空表达分析 | 第41-43页 |
| ·Lats1与YAP1、MyHC I、MyHCIIA、MyHCIIX、MSTN、MyoG基因表达的关联分析 | 第43-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 湖羊Lats1基因真核载体构建 | 第50-55页 |
| 1 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·湖羊Lats1基因载体构建引物设计 | 第50-51页 |
| ·湖羊背最长肌总RNA的提取及cDNA第一条链的合成 | 第51页 |
| ·湖羊Lats1编码区序列的扩增 | 第51页 |
| ·PCR产物回收、T载体连接和转化 | 第51页 |
| ·克隆质粒的鉴定及测序 | 第51页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·湖羊Lats1基因编码区的扩增 | 第52页 |
| ·湖羊Lats1真核表达载体的构建 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
