| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 序言 | 第10-23页 |
| ·生产D-塔格糖的意义和现状 | 第10-13页 |
| ·国内外甜味剂的发展现状 | 第10-11页 |
| ·D-塔格糖的研究进展 | 第11-13页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶的研究 | 第13-17页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶的资源研究 | 第13-14页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶的理化性质 | 第14-15页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶活性分析的研究 | 第15-17页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶与D-塔格糖的产生 | 第17页 |
| ·巴斯德毕赤酵母系统的研究 | 第17-20页 |
| ·巴斯德毕赤酵母系统的介绍 | 第18页 |
| ·巴斯德毕赤酵母系统的特点 | 第18-19页 |
| ·巴斯德毕赤酵母系统的启动子 | 第19-20页 |
| ·固态发酵 | 第20-21页 |
| ·固态发酵与液态发酵的比较 | 第20页 |
| ·固态发酵的应用 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·本研究技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 生产L-阿拉伯糖异构酶 | 第23-51页 |
| ·材料与方法 | 第23-37页 |
| ·材料 | 第23-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·常用的工具酶、抗生素和试剂(盒) | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·常用培养基、试剂和缓冲液 | 第24-26页 |
| ·核酸和蛋白电泳溶液 | 第26-27页 |
| ·酶活检测试剂 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-37页 |
| ·基因克隆 | 第28-29页 |
| ·表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·工程菌构建 | 第32-35页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶在毕赤酵母中组成型表达 | 第35-36页 |
| ·发酵条件研究 | 第36页 |
| ·固态发酵扩大生产研究 | 第36-37页 |
| ·发酵副产品回收利用 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-51页 |
| ·模板基因组DNA的提取 | 第37-38页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶的扩增及扩增产物的回收 | 第38-39页 |
| ·质粒的提取 | 第39-40页 |
| ·毕赤酵母组成型表达载体的构建 | 第40页 |
| ·重组子鉴定 | 第40-42页 |
| ·双酶切重组子鉴定 | 第40-41页 |
| ·PCR重组子鉴定 | 第41-42页 |
| ·测序分析 | 第42-44页 |
| ·重组子的筛选 | 第44-45页 |
| ·摇瓶表达 | 第45-46页 |
| ·发酵条件 | 第46-47页 |
| ·固态发酵扩大生产 | 第47-48页 |
| ·沼气的制备 | 第48-51页 |
| ·发酵沼气 | 第48-49页 |
| ·沼气发酵中毕赤酵母细胞的活性 | 第49-51页 |
| 第3章 应用L-阿拉伯糖异构酶转化D-半乳糖生产D-塔格糖 | 第51-62页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·实验材料 | 第51-52页 |
| ·纯化试剂 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51页 |
| ·常用的培养基、试剂和缓冲液 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶蛋白的纯化 | 第52页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶酶学性质的分析 | 第52页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶转化D-塔格糖 | 第52-53页 |
| ·D-塔格糖的纯化 | 第53页 |
| ·纯化样品的红外鉴定 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-62页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶的纯化 | 第53-54页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶酶学性质 | 第54-56页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶最适PH测定 | 第54-55页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶最适温度测定 | 第55-56页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶转化D-塔格糖 | 第56-57页 |
| ·D-塔格糖标准曲线的绘制 | 第56页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶转化D-半乳糖为D-塔格糖 | 第56-57页 |
| ·用Ca~(2+)离子分离树脂纯化 | 第57-59页 |
| ·D-塔格糖的初步纯化 | 第57-58页 |
| ·D-塔格糖脱色脱盐纯化 | 第58-59页 |
| ·红外鉴定 | 第59-62页 |
| 第4章 讨论 | 第62-65页 |
| ·基因供体的选择 | 第62页 |
| ·宿主菌与表达系统的选择 | 第62-63页 |
| ·发酵方式的选择 | 第63-64页 |
| ·L-阿拉伯糖异构酶生物法转化D-塔格糖 | 第64-65页 |
| 第5章 总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录一 缩写词(ABBREVIATION) | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |