| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| ·蛋白质磷酸化的研究状况及意义 | 第10-13页 |
| ·Daintain /AIF-1 结构研究 | 第13-17页 |
| ·Daintain /AIF-1 生理功能研究进展 | 第17-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 蛋白质的理化性质及磷酸化分析 | 第22-26页 |
| ·常用的蛋白磷酸化预测软件简介 | 第22-24页 |
| ·预测结果分析 | 第24-26页 |
| 3 实验材料与仪器 | 第26-30页 |
| ·实验菌株、质粒及细胞 | 第26页 |
| ·菌种培养所用培养基 | 第26页 |
| ·生化试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·实验室常用溶液的配制 | 第27-30页 |
| 4 实验方法 | 第30-43页 |
| ·稳定转染 pcDNA-Daintain 的 Raw264.7 细胞系的建立 | 第30-31页 |
| ·免疫沉淀和 Daintain/AIF-1 酪氨酸磷酸化检测 | 第31-32页 |
| ·Daintain/AIF-1Y54A突变体的构建 | 第32-38页 |
| ·Daintain/AIF-1Y54A基因的初步表达与鉴定 | 第38-39页 |
| ·克隆的 Daintain/AIF-1Y54A的分离纯化 | 第39-40页 |
| ·分离纯化蛋白的蛋白免疫印迹（Western blot）分析 | 第40-41页 |
| ·MTT 法检测 Daintain/AIF-1Y54A对 Raw264.7 细胞活力的影响 | 第41-42页 |
| ·一氧化氮含量检测 | 第42-43页 |
| 5 实验结果 | 第43-51页 |
| ·免疫沉淀及 Daintain/AIF-1 酪氨酸磷酸化分析 | 第43-44页 |
| ·Daintain/AIF-1Y54A突变体基因的克隆 | 第44-47页 |
| ·Daintain/AIF-1Y54A基因表达的鉴定 | 第47-48页 |
| ·蛋白免疫印迹（Western blot）分析 | 第48-49页 |
| ·MTT 鉴定细胞活性 | 第49-50页 |
| ·细胞培养基中 NO 浓度的测定 | 第50-51页 |
| 6 讨论 | 第51-57页 |
| ·Daintain/AIF-1 中酪氨酸磷酸化分析 | 第51-53页 |
| ·Daintain/AIF-1Y54A基因的克隆 | 第53页 |
| ·表达载体及宿主菌的选择 | 第53-54页 |
| ·融合蛋白表达的稳定性分析 | 第54-55页 |
| ·突变蛋白 Daintain/AIF-1Y54A的功能分析 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 主要缩略词表 | 第63页 |
