摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
第1章 引言 | 第8-11页 |
第2章 材料与方法 | 第11-30页 |
·细胞株 | 第11页 |
·主要试剂 | 第11-12页 |
·自配试剂 | 第12-14页 |
·主要仪器设备 | 第14-15页 |
·实验方法 | 第15-16页 |
·siRNA 瞬时转染 HepG2 细胞及 MHCC-97H 细胞后 mRNA 的检测 | 第16-21页 |
·设计合成针对 FAT10 基因的 siRNA 序列 | 第16-17页 |
·实时荧光定量 PCR 分析瞬转后细胞 FAT10 mRNA 的变化 | 第17-21页 |
·Western blot 检测 FAT10 蛋白表达变化 | 第21-24页 |
·细胞蛋白提取 | 第21页 |
·BCA 法测定蛋白浓度 | 第21-22页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第22-23页 |
·转膜 | 第23页 |
·免疫反应 | 第23-24页 |
·蛋白检测 | 第24页 |
·实时荧光定量 PCR 检测 miR-34a 表达水平 | 第24-27页 |
·细胞照射 | 第24页 |
·miRNA 的提取 | 第24-25页 |
·合成 miRNA 的 cDNA | 第25-26页 |
·实时荧光定量 PCR 检测 miR-34a 的表达水平 | 第26-27页 |
·Western blot 分析肝癌细胞 HepG2 和 MHCC97H 内 Bcl-2 及 Bax 蛋白表达水平 | 第27页 |
·细胞计数法绘制细胞生长曲线 | 第27-28页 |
·流式细胞术检测分析细胞周期的改变情况 | 第28页 |
·流式细胞术检测分析细胞凋亡的改变情况 | 第28-29页 |
·统计学分析 | 第29-30页 |
第3章 结果 | 第30-36页 |
·转染 FAT10-siRNA 至肝癌细胞检测 FAT10 的表达 | 第30-31页 |
·干扰 FAT10 后肝癌细胞中 miR-34a 的表达变化 | 第31页 |
·干扰 FAT10 后肝癌细胞中 Bcl-2 和 Bax 的表达变化 | 第31-32页 |
·细胞生长曲线的变化 | 第32页 |
·流式细胞术分析细胞周期及凋亡变化 | 第32-36页 |
第4章 讨论 | 第36-39页 |
第5章 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第44-45页 |
综述 | 第45-53页 |
参考文献 | 第50-53页 |