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清热利湿饮对TNF-α活化的HaCaT细胞系增殖的影响

提要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-11页
引言第11-13页
前言第13页
一、 实验材料第13-16页
 (一) 细胞第13页
 (二) 实验试剂第13-14页
 (三) 主要实验器材第14-16页
 (四) 药物的制备第16页
二、 实验方法第16-23页
 (一) 细胞培养基的配制及试剂第16-17页
 (二) 细胞复苏第17页
 (三) 细胞传代第17页
 (四) HaCaT 细胞的计数第17页
 (五) HaCaT 细胞冻存第17页
 (六) MTT 比色法测定 TNF-α对 HaCaT 细胞增殖的影响第17-18页
 (七) MTT 比色法测定 MTX 对 HaCaT 细胞增殖的影响第18页
 (八) MTT 法测定中药提取液对 HaCaT 细胞增殖的影响第18-19页
 (九) 光镜观察细胞形态第19页
 (十) 流式细胞仪检测细胞周期第19页
 (十一)流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死第19-20页
 (十二)RT-PCR 法检测 IL-6mRNA、IL-8mRNA 和 IL-10mRNA 表达第20-22页
 (十三)ELISA 法检测细胞培养上清中的 IL-8 和 IL-10第22页
 (十四)统计学处理第22-23页
三、 实验结果第23-31页
 (一) 不同时相 TNF-α对 HaCaT 细胞增殖的影响第23页
 (二) 不同浓度 TNF-α对 HaCaT 细胞增殖的影响第23页
 (三) 不同时相 MTX 对 HaCaT 细胞增殖的影响第23-24页
 (四) 不同浓度 MTX 对 HaCaT 细胞增殖的影响第24页
 (五) 不同浓度清热利湿饮全方①提取液对 HaCaT 细胞增殖的影响第24-25页
 (六) 不同浓度清热利湿饮拆方②提取液对 HaCaT 细胞增殖的影响第25-26页
 (七) 不同浓度清热利湿饮拆方③提取液对 HaCaT 细胞增殖的影响第26页
 (八) 清热利湿饮全方和拆方中药提取液对 HaCaT 细胞增殖抑制效应的比较第26-29页
 (九) 清热利湿饮提取液对 HaCaT 细胞形态学的影响第29页
 (十) 清热利湿饮提取液对 HaCaT 细胞凋亡的影响第29-30页
 (十一)清热利湿饮提取液对 HaCaT 细胞周期的影响第30页
 (十二)清热利湿饮提取液对 HaCaT 细胞表达 IL-6mRNA、IL-8mRNA 和 IL-10mRNA的影响第30-31页
 (十三)清热利湿饮提取液对 HaCaT 细胞分泌 IL-8 和 IL-10 的影响第31页
四、 讨论第31-41页
 (一) 本课题研究的必要性第31页
 (二) 清热利湿饮的方药分析第31-32页
 (三) 清热利湿饮的既往临床及实验研究第32-33页
 (四) 清热利湿饮的药理作用第33-34页
 (五) MTT 比色法测定 HaCaT 细胞增殖的原理第34-35页
 (六) 流式细胞仪检测细胞周期第35页
 (七) 流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死的原理第35页
 (八) ELISA 酶联免疫吸附实验原理第35-36页
 (九) 关于 HaCaT 细胞体外实验方法的选择第36页
 (十) 关于中药复方水提液的选择第36页
 (十一)关于阳性对照药甲氨喋呤及其实验浓度的选择第36-37页
 (十二)TNF-α及其实验浓度的选择第37页
 (十三)清热利湿饮提取液对 HaCaT 细胞抑制增殖的作用第37-38页
 (十四)清热利湿饮对 HaCaT 细胞诱导凋亡的作用第38页
 (十五)清热利湿饮对 HaCaT 细胞周期的影响第38-39页
 (十六)清热利湿饮对 HaCaT 细胞表达和分泌 IL-6mRNA、IL-8mRNA 和 IL-10mRNA的影响第39-40页
 (十七)清热利湿饮对 HaCaT 细胞分泌 IL-8 和 IL-10 的影响第40-41页
结语第41-42页
参考文献第42-48页
本研究的创新性第48页
本研究的不足之处第48-49页
综述第49-79页
 综述一第49-65页
  参考文献第61-65页
 综述二第65-79页
  参考文献第73-79页
附录第79-106页
致谢第106-107页
查新报告第107-115页
发表论文第115-135页
详细摘要第135-143页

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