缩氨基硫脲类螯合剂抑制胞内超氧化物歧化酶1活性的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 本论文主要创新点 | 第8-9页 |
| 主要缩写词表 | 第9-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-31页 |
| ·生物体内的活性氧 | 第14-17页 |
| ·活性氧的种类及来源 | 第14-16页 |
| ·活性氧的清除机制 | 第16-17页 |
| ·活性氧的生物学作用 | 第17-20页 |
| ·活性氧对生物大分子的氧化损伤 | 第17页 |
| ·ROS与细胞的增殖、分化和凋亡 | 第17-19页 |
| ·活性氧的信号转导途径 | 第19-20页 |
| ·铜锌超氧化物歧化酶 | 第20-28页 |
| ·SOD1的结构特征与催化机理 | 第20-23页 |
| ·铜锌超氧化物歧化酶与肿瘤癌症 | 第23页 |
| ·铜锌超氧化物歧化酶与肌萎缩脊髓侧索硬化症 | 第23-25页 |
| ·铜锌超氧化物歧化酶与ROS信号转导 | 第25-28页 |
| ·超氧化物歧化酶活性抑制剂的研究 | 第28-30页 |
| ·课题研究内容和意义 | 第30-31页 |
| 第二章 螯合剂对SOD1活性的抑制研究 | 第31-43页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·实验材料与方法 | 第31-36页 |
| ·试剂与仪器 | 第31页 |
| ·溶液配制 | 第31-33页 |
| ·氯化NBT还原法测定SOD1活性 | 第33-34页 |
| ·黄嘌呤氧化酶法测定SOD1活性 | 第34-36页 |
| ·实验结果与讨论 | 第36-42页 |
| ·FC系列螯合剂对SOD1活性的抑制 | 第36-41页 |
| ·缩氨基硫脲类螯合剂对SOD1活性的抑制 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 SOD1过表达体系的构建 | 第43-53页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验材料与方法 | 第43-49页 |
| ·菌株和质粒 | 第43页 |
| ·试剂及仪器 | 第43-44页 |
| ·溶液配制 | 第44页 |
| ·SOD1真核表达载体质粒的提取 | 第44-47页 |
| ·质粒DNA序列测定 | 第47页 |
| ·质粒DNA纯度及浓度检测 | 第47页 |
| ·SOD1真核表达载体质粒转染细胞实验 | 第47-49页 |
| ·SOD1稳定表达细胞株的构建 | 第49页 |
| ·实验结果与讨论 | 第49-52页 |
| ·质粒DNA序列测定 | 第49-50页 |
| ·质粒DNA纯度及浓度检测 | 第50页 |
| ·SOD1真核表达载体质粒转染细胞实验 | 第50-52页 |
| ·SOD1稳定表达细胞株的构建 | 第52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 细胞内活性氧(ROS)水平的检测 | 第53-62页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验材料和仪器 | 第53-54页 |
| ·试剂与仪器 | 第53页 |
| ·溶液配制 | 第53-54页 |
| ·实验方法和步骤 | 第54-55页 |
| ·MTT法测定螯合剂的细胞毒性 | 第54页 |
| ·黄嘌呤氧化酶法测定胞内SOD1的活性 | 第54-55页 |
| ·荧光探针法测定胞内活性氧水平 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-60页 |
| ·MTT法测定螯合剂的细胞毒性 | 第55-57页 |
| ·黄嘌呤氧化酶法测定胞内SOD1的活性 | 第57-58页 |
| ·细胞内活性氧水平的测定 | 第58-60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 第五章 抑制剂对胞内MAPK信号转导网络的影响 | 第62-67页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·实验材料与方法 | 第62-65页 |
| ·试剂与配制 | 第62-63页 |
| ·溶液配制 | 第63页 |
| ·实验原理 | 第63-64页 |
| ·实验方法与步骤 | 第64-65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-67页 |
| ·蛋白免疫印迹实验(Western Blot) | 第65-67页 |
| 结论与展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
