目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-28页 |
第一节 水稻黑条矮缩病毒的研究进展 | 第10-15页 |
1 水稻黑条矮缩病的发生与危害 | 第10-11页 |
2 水稻黑条矮缩病病害症状 | 第11页 |
3 水稻黑条矮缩病传播介体 | 第11-12页 |
4 水稻黑条矮缩病病原性质 | 第12页 |
5 RBSDV基因组 | 第12-15页 |
第二节 病毒与介体互作研究 | 第15-18页 |
1 酵母双杂交系统的原理 | 第16-17页 |
2 酵母双杂交系统的特点 | 第17-18页 |
第三节 RNAi技术及其在抗病毒研究中的应用 | 第18-20页 |
1 RNAi作用机理 | 第18页 |
2 RNAi的作用特点 | 第18页 |
3 RNAi在植物抗病毒中的应用 | 第18-20页 |
第四节 病毒编码的RNA沉默抑制子的研究进展 | 第20-25页 |
1 病毒编码的RNA沉默抑制子 | 第20-21页 |
2 沉默抑制子的作用方式及作用机理 | 第21-23页 |
3 沉默抑制子的鉴定方法 | 第23-25页 |
第五节 研究目的和意义 | 第25-28页 |
1 与RBSDV P10互作的灰飞虱蛋白因子筛选 | 第25页 |
2 抗RBSDV和SRBSDV RNAi表达载体的构建 | 第25-26页 |
3 P9-1沉默抑制子活性分析 | 第26-28页 |
第二章 与RBSDVP10互作的灰飞虱蛋白因子筛选 | 第28-56页 |
1 材料与方法 | 第28-41页 |
·材料 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-41页 |
2 结果与分析 | 第41-53页 |
·诱饵载体的构建 | 第41-42页 |
·以RBSDV P10为诱饵筛选灰飞虱cDNA文库 | 第42-51页 |
·互作蛋白基因全长的扩增 | 第51-53页 |
3 讨论 | 第53-56页 |
第三章 水稻黑条矮缩病毒和南方水稻黑条矮缩病毒双价RNA沉默载体的构建 | 第56-64页 |
1 材料与方法 | 第56-58页 |
·材料 | 第56-57页 |
·方法 | 第57-58页 |
2 结果与分析 | 第58-61页 |
·融合基因的构建 | 第58-59页 |
·pBS-hp(R6-SR6)和pBS-hp(R10-SR10)重组载体的构建 | 第59-60页 |
·RNA沉默载体pCAMBIA1301-hp(R6-SR6)和pCAMBIA1301-hp(R10-SR10)的构建 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-64页 |
第四章 RBSDV P9-1的RNA沉默抑制子活性分析 | 第64-78页 |
1 材料与方法 | 第64-68页 |
·材料 | 第64-66页 |
·方法 | 第66-68页 |
2 结果与分析 | 第68-76页 |
·基因克隆及载体构建 | 第68-70页 |
·RBSDV编码的P9-1能抑制GFP 16c本氏烟的局部沉默 | 第70页 |
·RBSDV编码的P9-1不能抑制由dsRNA引起的局部沉默 | 第70-71页 |
·RBSDV P9-1能延缓但不能抑制系统沉默的产生 | 第71页 |
·RBSDV P9-1能阻止沉默信号的传导 | 第71-73页 |
·RBSDV病毒基因组表达量的分析 | 第73-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
附录 | 第86-94页 |
附录1 常用缓冲液及试剂配方 | 第86-89页 |
附录2 常用术语缩写 | 第89-90页 |
附录3 载体图谱 | 第90-94页 |
硕士期间发表文章 | 第94-96页 |
致谢 | 第96页 |