| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 前沿 | 第11-18页 |
| ·我国海水养殖产业概况 | 第11-12页 |
| ·大菱鲆简介 | 第12页 |
| ·鱼类疫苗研究情况 | 第12-13页 |
| ·迟缓爱德华氏菌简介 | 第13-16页 |
| ·迟缓爱德华氏菌在海水养殖中的概况 | 第13页 |
| ·迟缓爱德华氏菌入侵机体的过程及相关毒力因子 | 第13-15页 |
| ·迟缓爱德华氏菌病的防治 | 第15-16页 |
| ·细菌菌毛简介 | 第16-17页 |
| ·P1SW 和 V3SW 无毒株简介 | 第17页 |
| ·本论文研究的目的以及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 迟缓爱德华氏菌 FimA 突变菌株的构建及毒力检测 | 第18-35页 |
| ·试验材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·迟缓爱德华氏菌突变株 TXfimA 的构建 | 第20-26页 |
| ·fimA 缺失片段的获取 | 第20-22页 |
| ·fimA 缺失片段连接到自杀性质粒 PDM4 | 第22-24页 |
| ·通过两次同源重组获得 fimA 缺失的突变菌株 TXfimA | 第24-26页 |
| ·突变株毒力的检测 | 第26-29页 |
| ·生长曲线的测定 | 第26页 |
| ·生物膜形成能力的检测 | 第26-27页 |
| ·突变株体外侵染大菱鲆 PBL 和 FG 细胞能力的检测 | 第27-28页 |
| ·体内侵染组织能力的检测 | 第28-29页 |
| ·血清杀菌能力的测定 | 第29页 |
| ·实验结果 | 第29-33页 |
| ·迟缓爱德华氏菌突变株 TXfimA 的构建 | 第29页 |
| ·TXfimA 与 TX01 生长情况的比较 | 第29-30页 |
| ·TXfimA 和 TX01 生物膜形成能力的比较 | 第30-31页 |
| ·TXfimA 与 TX01 侵染细胞能力的差异 | 第31-32页 |
| ·突变株和野生株组织侵染能力的差异 | 第32-33页 |
| ·突变株和野生株抗血清杀菌能力的比较 | 第33页 |
| ·分析与讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 迟缓爱德华氏菌 FimA 蛋白的表达纯化及其作为疫苗和佐剂应用潜力的研究 | 第35-54页 |
| ·实验材料与方法 | 第35-46页 |
| ·实验材料 | 第35-37页 |
| ·fimA 基因的克隆与蛋白的提取 | 第37-40页 |
| ·fimA 基因的克隆 | 第37页 |
| ·连接转化 | 第37-38页 |
| ·FimA 蛋白的提取与纯化 | 第38-40页 |
| ·rFimA 作为亚单位疫苗免疫保护效率的研究 | 第40-44页 |
| ·鱼体的免疫 | 第40页 |
| ·鱼体的攻毒以及 RPS 的检测 | 第40-41页 |
| ·Western blot 检测抗体的产生 | 第41页 |
| ·ELISA 检测抗体效价 | 第41-42页 |
| ·血清杀菌能力的检测 | 第42页 |
| ·血清封闭 TX01 后侵染 FG 细胞能力的检测 | 第42-43页 |
| ·免疫荧光检测血清与 TX01 的相互作用 | 第43-44页 |
| ·rFimA 佐剂效应的研究 | 第44-46页 |
| ·鱼体的免疫 | 第44页 |
| ·鱼体的攻毒和 RPS 检测 | 第44-45页 |
| ·ELISA 检测抗体效价 | 第45页 |
| ·qRT-PCR 检测免疫相关基因表达的情况 | 第45-46页 |
| ·实验结果 | 第46-52页 |
| ·rFimA 蛋白的表达纯化 | 第46-47页 |
| ·rFimA 做为亚单位疫苗以及佐剂对大菱鲆相对保护率的计算 | 第47页 |
| ·Western blot 结果 | 第47-48页 |
| ·rFimA 做为亚单位疫苗和佐剂免疫鱼体后血清中抗体效价的检测 | 第48-49页 |
| ·血清杀菌能力的比较 | 第49-50页 |
| ·血清封闭 TX01 后侵染 FG 细胞能力检测 | 第50-51页 |
| ·免疫荧光结果 | 第51-52页 |
| ·qRT-RCR 检测免疫相关基因的表达结果 | 第52页 |
| ·分析与讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 P1SW 和 V3SW 交叉免疫保护效率的研究 | 第54-68页 |
| ·试验材料与方法 | 第54-59页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·P1SW、V3SW 以及 P1V3 免疫保护效率的研究 | 第55-58页 |
| ·鱼体的免疫 | 第55-56页 |
| ·鱼体的攻毒以及 RPS 的计算 | 第56页 |
| ·ELISA 检测抗体效价 | 第56-57页 |
| ·免疫荧光检测血清与迟缓爱德华氏菌之间的相互作用 | 第57-58页 |
| ·血清杀菌能力的检测 | 第58页 |
| ·P1SW 和 V3SW 在鱼体内存活情况检测 | 第58-59页 |
| ·P1SW、V3SW 以及 P1V3 体内刺激巨噬细胞呼吸爆发[80]能力的检测 | 第59页 |
| ·试验结果 | 第59-65页 |
| ·相对保护率的计算 | 第59-60页 |
| ·抗体效价检测结果 | 第60-61页 |
| ·免疫荧光检测血清与迟缓爱德华氏菌相互作用的结果 | 第61-62页 |
| ·血清杀菌能力检测结果 | 第62-63页 |
| ·P1SW 和 V3SW 在鱼体内的存活情况检测结果 | 第63-64页 |
| ·呼吸爆发结果 | 第64-65页 |
| ·分析与讨论 | 第65-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 作者简介及硕士期间发表的文章 | 第78页 |
