缩略词表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
前言 | 第15-20页 |
1. 咪唑啉受体相关研究 | 第15-16页 |
2. IRAS 蛋白的发现及其结构和功能研究 | 第16-18页 |
3. 本课题的研究内容 | 第18-20页 |
第一部分 IRAS 基因敲除小鼠的构建及初步表型分析 | 第20-78页 |
1. 打靶策略 | 第20-22页 |
2. 打靶载体 I 的构建及胚胎干细胞的筛选 | 第22-40页 |
·材料方法 | 第22-23页 |
·打靶载体 1 的设计及胚胎干细胞筛选策略 | 第23-26页 |
·打靶质粒的构建及 ES 细胞的筛选 | 第26-40页 |
3. 打靶载体 II 的构建及胚胎干细胞的筛选 | 第40-49页 |
·打靶载体 II 的设计及胚胎干细胞筛选策略 | 第40-42页 |
·打靶质粒的构建及 ES 细胞的筛选 | 第42-49页 |
4. 各基因型小鼠的获得和鉴定 | 第49-54页 |
·重组杂合子小鼠的获得和鉴定 | 第49-50页 |
·Floxed 小鼠的获得和鉴定 | 第50-51页 |
·完全敲除小鼠的获得和鉴定 | 第51-54页 |
5. 初步表型分析 | 第54-69页 |
·生殖发育和动物一般生理指标 | 第54-61页 |
·生殖能力 | 第54-55页 |
·动物发育方面 | 第55-59页 |
·死亡 | 第59-60页 |
·摄食量 | 第60页 |
·基础血糖和糖耐量测定 | 第60页 |
·体温 | 第60-61页 |
·神经和精神行为 | 第61-69页 |
·一般行为方面 | 第61-62页 |
·运动能力方面 | 第62页 |
·动物基础痛阈 | 第62-64页 |
·学习记忆能力 | 第64-65页 |
·焦虑抑郁方面表型 | 第65-66页 |
·精神分裂症方面的表现 | 第66-67页 |
·吗啡镇痛和躯体依赖 | 第67-69页 |
6. 讨论 | 第69-78页 |
·基因打靶及打靶效率 | 第69-70页 |
·完全敲除小鼠的鉴定 | 第70-71页 |
·IRAS 与疼痛及吗啡镇痛 | 第71-73页 |
·IRAS 与生长发育 | 第73-76页 |
·IRAS 与抑郁 | 第76-78页 |
第二部分 相互作用蛋白的筛选 | 第78-95页 |
1. 材料方法 | 第78-83页 |
·质粒构建 | 第78-79页 |
·酵母双杂交 | 第79-81页 |
·试剂 | 第79-80页 |
·酵母双杂交的基本流程 | 第80页 |
·酵母转化流程 | 第80-81页 |
·文库筛选 | 第81页 |
·自激活鉴定 | 第81页 |
·免疫共沉淀 | 第81-82页 |
·试剂材料 | 第81-82页 |
·免疫共沉淀步骤 | 第82页 |
·荧光能量共振转移(FRET) | 第82页 |
·哺乳动物双杂交 | 第82-83页 |
·试剂仪器 | 第82-83页 |
·操作步骤 | 第83页 |
2. 结果 | 第83-91页 |
·相互作用蛋白的筛选 | 第83-85页 |
·蛋白相互作用的验证 | 第85-91页 |
·IBD 与 SERTAD1 的相互作用验证 | 第85-86页 |
·IRAS 与 SERTAD1 相互作用的验证 | 第86-89页 |
·IRAS 与 SERTAD1 相互作用部位的寻找 | 第89-91页 |
3. 讨论 | 第91-95页 |
结论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-104页 |
综述 | 第104-112页 |
参考文献 | 第109-112页 |
在读期间发表文章 | 第112-118页 |
个人简历 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |