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IRAS基因敲除小鼠的构建及相互作用蛋白的筛选

缩略词表第1-6页
摘要第6-11页
Abstract第11-15页
前言第15-20页
 1. 咪唑啉受体相关研究第15-16页
 2. IRAS 蛋白的发现及其结构和功能研究第16-18页
 3. 本课题的研究内容第18-20页
第一部分 IRAS 基因敲除小鼠的构建及初步表型分析第20-78页
 1. 打靶策略第20-22页
 2. 打靶载体 I 的构建及胚胎干细胞的筛选第22-40页
     ·材料方法第22-23页
     ·打靶载体 1 的设计及胚胎干细胞筛选策略第23-26页
     ·打靶质粒的构建及 ES 细胞的筛选第26-40页
 3. 打靶载体 II 的构建及胚胎干细胞的筛选第40-49页
     ·打靶载体 II 的设计及胚胎干细胞筛选策略第40-42页
     ·打靶质粒的构建及 ES 细胞的筛选第42-49页
 4. 各基因型小鼠的获得和鉴定第49-54页
     ·重组杂合子小鼠的获得和鉴定第49-50页
     ·Floxed 小鼠的获得和鉴定第50-51页
     ·完全敲除小鼠的获得和鉴定第51-54页
 5. 初步表型分析第54-69页
     ·生殖发育和动物一般生理指标第54-61页
       ·生殖能力第54-55页
       ·动物发育方面第55-59页
       ·死亡第59-60页
       ·摄食量第60页
       ·基础血糖和糖耐量测定第60页
       ·体温第60-61页
     ·神经和精神行为第61-69页
       ·一般行为方面第61-62页
       ·运动能力方面第62页
       ·动物基础痛阈第62-64页
       ·学习记忆能力第64-65页
       ·焦虑抑郁方面表型第65-66页
       ·精神分裂症方面的表现第66-67页
       ·吗啡镇痛和躯体依赖第67-69页
 6. 讨论第69-78页
     ·基因打靶及打靶效率第69-70页
     ·完全敲除小鼠的鉴定第70-71页
     ·IRAS 与疼痛及吗啡镇痛第71-73页
     ·IRAS 与生长发育第73-76页
     ·IRAS 与抑郁第76-78页
第二部分 相互作用蛋白的筛选第78-95页
 1. 材料方法第78-83页
     ·质粒构建第78-79页
     ·酵母双杂交第79-81页
       ·试剂第79-80页
       ·酵母双杂交的基本流程第80页
       ·酵母转化流程第80-81页
       ·文库筛选第81页
       ·自激活鉴定第81页
     ·免疫共沉淀第81-82页
       ·试剂材料第81-82页
       ·免疫共沉淀步骤第82页
     ·荧光能量共振转移(FRET)第82页
     ·哺乳动物双杂交第82-83页
       ·试剂仪器第82-83页
       ·操作步骤第83页
 2. 结果第83-91页
     ·相互作用蛋白的筛选第83-85页
     ·蛋白相互作用的验证第85-91页
       ·IBD 与 SERTAD1 的相互作用验证第85-86页
       ·IRAS 与 SERTAD1 相互作用的验证第86-89页
       ·IRAS 与 SERTAD1 相互作用部位的寻找第89-91页
 3. 讨论第91-95页
结论第95-96页
参考文献第96-104页
综述第104-112页
 参考文献第109-112页
在读期间发表文章第112-118页
个人简历第118-119页
致谢第119页

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