中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
前言 | 第11-13页 |
材料与方法 | 第13-21页 |
1 材料 | 第13-16页 |
·主要实验材料及试剂 | 第13-14页 |
·主要仪器 | 第14页 |
·主要试剂配制 | 第14-16页 |
2. 方法 | 第16-21页 |
·分离制备血小板 | 第16-17页 |
·免疫共沉淀实验 | 第17-18页 |
·多肽合成 | 第18页 |
·钙调蛋白结合分析 | 第18页 |
·荧光标记钙调蛋白滴定实验 | 第18页 |
·免疫印迹 | 第18-19页 |
·共聚焦荧光显微镜样品制备 | 第19页 |
·流式细胞仪检测血小板活化 | 第19页 |
·金属蛋白酶 ADAM17 活性检测 | 第19页 |
·突变分析 | 第19-20页 |
·统计学分析 | 第20-21页 |
结果 | 第21-37页 |
1. 血小板 Sema4D 钙调蛋白结合序列的鉴定 | 第21-26页 |
·Sema4D 钙调蛋白结合序列的检测 | 第21-22页 |
·在静息血小板中,Sema4D 与钙调蛋白结合;血小板活化后 Sema4D-钙调蛋白复合体解离 | 第22-24页 |
·Sema4D 钙调蛋白结合肽 CBPS 与重组钙调蛋白以及血小板中的天然钙调蛋白结合 | 第24-26页 |
2. 钙调蛋白参与 Sema4D 分子切割调控的机制研究 | 第26-37页 |
·CBPS 穿过细胞膜进入血小板内部 | 第26-28页 |
·CBPS 诱导血小板中 Sema4D 分子切割 | 第28-30页 |
·CBPS 诱导的 Sema4D 切割不伴随血小板活化和 ADAM17 活性变化 | 第30-32页 |
·CBPS 诱导血小板中 GPIbα和 GPVI 分子切割 | 第32-34页 |
·钙调蛋白抑制剂 W7 诱导 Sema4D 分子切割 | 第34-35页 |
·删除 Sema4D 钙调蛋白结合区域可增加 Sema4D 的自发切割 | 第35-37页 |
讨论 | 第37-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
综述 | 第45-63页 |
综述参考文献 | 第55-63页 |
攻读学位期间本人出版和公开发表的论著、论文 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |