中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-13页 |
前言 | 第13-19页 |
1. 前列腺癌的流行病学概况 | 第13-14页 |
2. 前列腺癌的西医治疗现状 | 第14-15页 |
3. 前列腺癌西医治疗的难点热点 | 第15-16页 |
4. 中医药治疗PCA现状和思考 | 第16-17页 |
5. 姜黄素的研究概况 | 第17-18页 |
6. 本课题研究的思路和主要内容 | 第18-19页 |
实验研究一 姜黄素对人前列腺癌DU-145细胞生长的影响 | 第19-34页 |
1. 实验材料 | 第19-20页 |
·实验药物 | 第19页 |
·细胞来源 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要实验仪器 | 第20页 |
2. 实验方法 | 第20-26页 |
·常用溶液配制 | 第20-21页 |
·人前列腺癌DU-145细胞培养及保存 | 第21-23页 |
·人前列腺癌DU-145细胞的培养及换液 | 第21-22页 |
·人前列腺癌DU-145细胞的传代培养 | 第22页 |
·人前列腺癌DU-145细胞的冻存 | 第22-23页 |
·实验用药的配制和作用 | 第23-24页 |
·姜黄素和多沙唑嗪的溶解 | 第23页 |
·药物作用于DU-145细胞 | 第23-24页 |
·姜黄素对DU-145细胞的作用 | 第23页 |
·多沙唑嗪溶液对DU-145细胞的作用 | 第23-24页 |
·观测指标及实验方法 | 第24-26页 |
·DU-145细胞形态学观察 | 第24页 |
·标本制备(细胞爬片,加药) | 第24页 |
·形态学观察 | 第24页 |
·MTT法检测姜黄素对DU-145细胞生长的影响 | 第24-25页 |
·MTT法实验原理 | 第24-25页 |
·MTT法实验步骤 | 第25页 |
·细胞生长抑制率计算 | 第25-26页 |
·统计学方法 | 第26页 |
3. 实验结果与分析 | 第26-30页 |
·姜黄素对DU-145细胞形态学变化的影响 | 第26-28页 |
·姜黄素对DU-145细胞生长的影响 | 第28-29页 |
·姜黄素对DU-145细胞生长抑制率的影响 | 第29-30页 |
4. 研究小结 | 第30-34页 |
实验研究二 ELLISA法测定姜黄素对人前列腺癌DU-145细胞TGF-B/SMADS信号传导通路的影响 | 第34-45页 |
1. 实验材料 | 第34-35页 |
·实验药物 | 第34页 |
·细胞来源 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·主要实验设备和仪器 | 第35页 |
2. 实验方法 | 第35-37页 |
·ELLSA法检测原理 | 第35-36页 |
·实验步骤 | 第36-37页 |
·细胞培养和药物作用 | 第36页 |
·姜黄素对DU-145细胞的作用 | 第36页 |
·多沙唑嗪溶液对DU-145细胞的作用 | 第36页 |
·ELLISA法检测标准步骤 | 第36-37页 |
3. 实验结果与分析 | 第37-42页 |
·姜黄素对TGF-B表达的影响 | 第37-39页 |
·姜黄素对SMAD2浓度的影响 | 第39-40页 |
·姜黄素对SMAD4浓度的影响 | 第40-41页 |
·姜黄素对SMAD7浓度的影响 | 第41-42页 |
4. 研究小结 | 第42-45页 |
实验研究三 RT-PCR法测定姜黄素对人前列腺癌DU-145细胞TGF-B/SMADS信号传导通路的影响 | 第45-65页 |
1. 实验材料 | 第45-47页 |
·实验药物 | 第45页 |
·细胞来源 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-46页 |
·主要实验设备和仪器 | 第46-47页 |
2. 实验方法 | 第47-53页 |
·不同浓度梯度的药物直接作用DU-145细胞 | 第47-48页 |
·DU-145细胞培养 | 第47页 |
·细胞计数 | 第47页 |
·接种 | 第47页 |
·分组 | 第47-48页 |
·加药 | 第48页 |
·细胞总RNA的提取 | 第48-49页 |
·RT-PCR基因表达产物扩增 | 第49-53页 |
·RNA质量检测及含量测定 | 第49页 |
·将RNA反转录为cDNA | 第49-50页 |
·引物序列 | 第50-52页 |
·PCR基因扩增 | 第52-53页 |
3. 实验结果与分析 | 第53-60页 |
·RNA电泳结果 | 第53页 |
·RT-PCR结果 | 第53-60页 |
·ACTB(β-actin) | 第53-54页 |
·姜黄素对DU-145细胞TGF-β表达量的影响 | 第54-55页 |
·姜黄素对DU-145细胞SMAD2表达量的影响 | 第55-57页 |
·姜黄素对DU-145细胞SMAD4表达量的影响 | 第57-59页 |
·姜黄素对DU-145细胞SMAD7表达量的影响 | 第59-60页 |
4. 研究小结 | 第60-65页 |
讨论 | 第65-103页 |
1. 中医对前列腺癌的认识 | 第65-71页 |
·中医对前列腺癌病名的认识 | 第65-66页 |
·病因的认识 | 第66-67页 |
·病机的认识 | 第67-71页 |
·正虚为本 | 第67-69页 |
·邪实为标 | 第69-70页 |
·虚实相互影响致病 | 第70-71页 |
·前列腺癌中医认识小结 | 第71页 |
2. 现代医学对雄激素非依赖性前列腺癌的认识 | 第71-80页 |
·前列腺癌的危险因素和预防因子 | 第71-72页 |
·前列腺癌的主要治疗方法和治疗难点 | 第72-73页 |
·激素非依赖性前列腺癌的发生机制 | 第73-76页 |
·细胞来源不同 | 第73-74页 |
·基因变异 | 第74页 |
·非雄激素通路 | 第74-75页 |
·共活化物和共阻遏物失衡 | 第75页 |
·凋亡与增殖失常 | 第75-76页 |
·前列腺癌干细胞 | 第76页 |
·激素非依赖性前列腺癌的治疗 | 第76-80页 |
·二线内分泌治疗 | 第76-77页 |
·化学治疗 | 第77-78页 |
·基因治疗 | 第78页 |
·骨转移的治疗 | 第78-79页 |
·中草药治疗 | 第79-80页 |
3. 选择中药提取物姜黄素的依据 | 第80-90页 |
·姜黄与姜黄素 | 第80-81页 |
·姜黄素具有广泛的药理作用 | 第81-83页 |
·确切的抗肿瘤作用 | 第81页 |
·抗炎作用 | 第81-82页 |
·抗氧化作用 | 第82页 |
·抗纤维化作用 | 第82页 |
·抗动脉粥样硬化作用 | 第82-83页 |
·调节免疫作用 | 第83页 |
·其他作用 | 第83页 |
·姜黄素广谱抗肿瘤作用的机制研究活跃 | 第83-86页 |
·抗突变 | 第83-84页 |
·诱导肿瘤细胞凋亡和细胞周期停滞 | 第84页 |
·抗肿瘤侵袭与转移 | 第84-86页 |
·抗肿瘤血管生成 | 第84-85页 |
·抑制细胞粘附和运动 | 第85页 |
·抑制锌离子(Zn2+)依赖性的基质金属蛋白酶(MMP) | 第85页 |
·抑制激活蛋白-1(activating protein-1,AP-1) | 第85页 |
·抑制NFκB活化 | 第85-86页 |
·增加肿瘤细胞化疗敏感性 | 第86页 |
·姜黄素治疗前列腺疾病的研究发展迅速 | 第86-89页 |
·姜黄素治疗前列腺炎的研究 | 第86页 |
·姜黄素在前列腺增生治疗中的研究 | 第86-87页 |
·姜黄素治疗前列腺癌的研究 | 第87-89页 |
·抑制前列腺癌细胞的增殖 | 第87页 |
·诱导前列腺癌细胞的凋亡 | 第87-88页 |
·抑制PSA基因的表达 | 第88页 |
·抑制雄激素受体(androgen receptor,AR)的表达 | 第88-89页 |
·增强前列腺癌对放、化疗的敏感性 | 第89页 |
·姜黄素几乎无毒副作用 | 第89-90页 |
4. 选择DU-145细胞的依据 | 第90-91页 |
5. 阳性对照药物多沙唑嗪的选择依据 | 第91-92页 |
6. TGF-B/SMADS信号传导通路与肿瘤 | 第92-97页 |
·TGF-B超家族及其受体 | 第92-94页 |
·TGF-β超家族 | 第92-93页 |
·TGF-β受体 | 第93-94页 |
·SMADS蛋白及在TGF-B/SMADS信号转导通路中的地位 | 第94-95页 |
·TGF-B信号通路传导过程 | 第95-96页 |
·TGF-B/SMADS信号传导通路与肿瘤发生发展密切相关 | 第96-97页 |
7. 姜黄素对DU-145细胞体外作用的影响 | 第97-98页 |
·对DU-145细胞形态的影响 | 第97-98页 |
·对DU-145细胞增殖的影响 | 第98页 |
8. 姜黄素对DU-145细胞TGF-B/SMADS信号传导通路的影响 | 第98-103页 |
·增加DU-145细胞中TGF-B的浓度及基因表达 | 第99-100页 |
·对TGF-B/SMADS信号通路中下游蛋白SMADS浓度及基因表达的影响 | 第100-103页 |
·增加Smad2的浓度及基因表达 | 第100-101页 |
·增加Smad4的浓度及基因表达 | 第101页 |
·抑制Smad7的浓度及基因表达 | 第101-103页 |
结论 | 第103-104页 |
问题与展望 | 第104-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-119页 |
附件一:综述 | 第119-132页 |
参考文献 | 第128-132页 |
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第132-133页 |