| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 目录 | 第11-16页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 第一章 前言 | 第17-54页 |
| 第一节 烟草花叶病毒 | 第18-45页 |
| ·烟草花叶病毒的发现和里程碑式成果 | 第18-21页 |
| ·烟草花叶病毒的基本生物学性质 | 第21-22页 |
| ·烟草花叶病毒颗粒的结构 | 第22-25页 |
| ·烟草花叶病毒的基因组RNA | 第25-30页 |
| ·烟草花叶病毒相关的蛋白质 | 第30-37页 |
| ·烟草花叶病毒壳蛋白和RNA的相互作用 | 第37-40页 |
| ·烟草花叶病毒的组装和解组装 | 第40-45页 |
| 第二节 安托芬(Antofine)及其类似物 | 第45-50页 |
| 第三节 烟草花叶病毒的研究现状 | 第50-51页 |
| 第四节 本文研究的目的及主要内容 | 第51-54页 |
| ·Antofine及其类似物对烟草花叶病毒体外组装的抑制 | 第52页 |
| ·体外筛选TMV起始组装序列文库的结果分析 | 第52-53页 |
| ·烟草花叶病毒的颗粒修饰与粒度调控 | 第53页 |
| ·烟草花叶病毒壳蛋白的体外表达 | 第53-54页 |
| 第二章 Antofine及类似物抑制烟草花叶病毒的体外组装 | 第54-95页 |
| 第一节 小分子与核酸相互作用的研究 | 第54-61页 |
| ·小分子与核酸的作用方式 | 第54-56页 |
| ·小分子与核酸相互作用的验证方法 | 第56-61页 |
| 第二节 核酸凸起结构及其生物学意义 | 第61-64页 |
| 第三节 研究目的和实验设计 | 第64-65页 |
| 第四节 实验材料与方法 | 第65-79页 |
| ·仪器 | 第65-66页 |
| ·材料 | 第66-67页 |
| ·DNA | 第67-71页 |
| ·去RNA酶的处理 | 第71页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第71-75页 |
| ·烟草花叶病毒的提取 | 第75-76页 |
| ·烟草花叶病毒RNA的制备 | 第76页 |
| ·烟草花叶病毒壳蛋白的制备 | 第76-77页 |
| ·安托芬与HT3AGT相互作用的紫外检测 | 第77页 |
| ·安托芬的EB取代实验 | 第77页 |
| ·荧光滴定实验 | 第77-78页 |
| ·组装反应及组装抑制作用的检测(核酸酶抗性实验) | 第78页 |
| ·电镜样品的制备 | 第78-79页 |
| ·平衡透析实验 | 第79页 |
| 第五节 Antofine与具有碱基凸起结构DNA的作用模式 | 第79-82页 |
| ·安托芬与HT3AGT相互作用的紫外检测 | 第80页 |
| ·安托芬的EB取代实验 | 第80-82页 |
| 第六节 Antofine及其类似物与核酸的特异性相互作用 | 第82-88页 |
| ·Antofine与不同凸起结构DNA的特异性相互作用 | 第82-86页 |
| ·Antofine的类似物与HT3AGT的特异性相互作用 | 第86-88页 |
| 第七节 Antofine及其类似物对烟草花叶病毒组装的抑制 | 第88-93页 |
| ·Antofine及其类似物与TMV RNA的特异性相互作用 | 第88-89页 |
| ·Antofine及其类似物对烟草花叶病毒组装的抑制 | 第89-91页 |
| ·Antofine与TMV壳蛋白的相互作用 | 第91-93页 |
| 第八节 总结与讨论 | 第93-95页 |
| 第三章 体外筛选烟草花叶病毒起始组装序列文库的结果分析 | 第95-105页 |
| 第一节 Selex的技术简介 | 第95-97页 |
| 第二节 研究目的和实验设计 | 第97-98页 |
| 第三节 体外筛选TMV起始组装序列文库的结果分析 | 第98-103页 |
| ·16个随机位点序列与顶端apex序列分析 | 第100-101页 |
| ·A40 bulge位置 | 第101页 |
| ·顶端stem位置 | 第101-102页 |
| ·固定区发生突变的序列 | 第102-103页 |
| ·序列出现丰度分析 | 第103页 |
| 第四节 总结与讨论 | 第103-105页 |
| 第四章 烟草花叶病毒的颗粒修饰与粒度调控 | 第105-130页 |
| 第一节 烟草花叶病毒的光化学交联 | 第106-112页 |
| ·实验背景介绍 | 第106-108页 |
| ·实验步骤和方法 | 第108-109页 |
| ·实验结果和讨论 | 第109-112页 |
| 第二节 烟草花叶病毒的荧光标记 | 第112-116页 |
| ·实验背景介绍 | 第112-114页 |
| ·实验步骤和方法 | 第114-115页 |
| ·实验结果与讨论 | 第115-116页 |
| 第三节 烟草花叶病毒的粒度调控 | 第116-128页 |
| ·RNA-DNA杂合链的构建 | 第117-125页 |
| ·生物纳米柱的精确构筑 | 第125-128页 |
| 第四节 总结与讨论 | 第128-130页 |
| 第五章 烟草花叶病毒壳蛋白的体外表达 | 第130-144页 |
| 第一节 研究背景和实验目的 | 第130页 |
| 第二节 实验仪器和材料 | 第130-131页 |
| ·实验仪器 | 第130-131页 |
| ·实验材料和溶液配制 | 第131页 |
| 第三节 体外构建具有感染性的TMV全病毒 | 第131-134页 |
| ·实验目的和意义 | 第131页 |
| ·实验方法和步骤 | 第131-133页 |
| ·实验结果和讨论 | 第133-134页 |
| 第四节 烟草花叶病毒壳蛋白重组质粒的构建 | 第134-139页 |
| ·壳蛋白基因序列的获取 | 第134-136页 |
| ·重组载体的选择 | 第136-137页 |
| ·目的片段和载体的双酶切反应 | 第137-138页 |
| ·目的片段和载体的连接反应 | 第138页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第138-139页 |
| ·制备甘油管并测序 | 第139页 |
| 第五节 烟草花叶病毒壳蛋白的体外表达和纯化 | 第139-141页 |
| ·烟草花叶病毒壳蛋白的体外表达 | 第139页 |
| ·烟草花叶病毒壳蛋白的纯化 | 第139-141页 |
| 第六节 体外表达壳蛋白的组装验证 | 第141-144页 |
| ·壳蛋白与TMV RNA组装条件的验证 | 第141-142页 |
| ·壳蛋白的透析和浓缩 | 第142-143页 |
| ·体外表达壳蛋白与TMV RNA组装的验证 | 第143-144页 |
| 第六章 全文总结与课题展望 | 第144-148页 |
| 第一节 全文总结 | 第144-146页 |
| 第二节 课题展望 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-164页 |
| 致谢 | 第164-166页 |
| 附录 | 第166-185页 |
| 个人简历 | 第185页 |
| 在学期间的学术论文与研究成果 | 第185页 |
