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体外SELEX技术筛选沙门氏菌O8适体的方法学研究及初步应用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
致谢第9-14页
第一章 绪论第14-19页
   ·沙门氏菌概况及危害第14页
   ·SELEX 技术的研究进展第14-19页
     ·SELEX 技术的发展和优点第14-15页
     ·SELEX 技术的基本原理第15-16页
     ·SELEX 技术的改进与应用第16-19页
第二章 体外 SELEX 技术筛选沙门氏菌 O8 适体方法的建立第19-30页
   ·材料第19-21页
     ·随机 ssDNA 文库的构建、引物的设计与合成第19页
     ·沙门氏菌悬液的制备第19页
     ·主要试剂配制第19-20页
     ·其它试剂第20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·方法第21-25页
     ·SELEX 筛选过程第21页
     ·比较两种方法制备 ssDNA 富集库第21-23页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定扩增产物第23-24页
     ·PCR 产物纯化第24页
     ·各轮 ssDNA 富集库与沙门氏菌 O8 结合率的测定第24-25页
   ·结果第25-28页
     ·不对称 PCR 法制备 ssDNA 富集库第25页
     ·M-280 链霉亲和素磁珠制备 ssDNA 富集库第25-26页
     ·ssDNA 富集库与沙门氏菌 O8 的 SELEX 筛选第26-27页
     ·各轮 ssDNA 富集库与沙门氏菌 O8 结合率的测定第27-28页
   ·讨论第28-29页
   ·小结第29-30页
第三章 适体的克隆、测序第30-50页
   ·材料第30-31页
     ·培养基配制第30页
     ·克隆相关试剂第30-31页
     ·测序第31页
   ·方法第31-33页
     ·第 9 轮筛选产物的扩增和扩增产物的纯化第31页
     ·PCR 纯化产物的克隆第31-32页
     ·测序第32页
     ·适体序列分析第32-33页
   ·结果第33-48页
     ·克隆适体一级结构同源性分析第33-43页
     ·克隆适体二级结构预测第43-48页
   ·讨论第48页
   ·小结第48-50页
第四章 沙门氏菌 O8 适体的结合率、特异性鉴定和分析第50-60页
   ·材料第50页
     ·引物的设计与合成第50页
     ·主要试剂第50页
     ·主要仪器第50页
   ·方法第50-52页
     ·克隆菌质粒抽提第50-51页
     ·地高辛标记的 ssDNA 的制备第51页
     ·克隆适体与沙门氏菌 O8 的结合率测定第51页
     ·克隆适体与沙门氏菌 O8 的饱和力测定第51页
     ·克隆适体与沙门氏菌 O8、反筛菌的特异性检测第51-52页
     ·建立荧光基团标记适体 B10 快速鉴定沙门氏菌 O8 的检测方法第52页
     ·荧光适体 B10 的灵敏度检测第52页
   ·结果第52-58页
     ·克隆适体与沙门氏菌 O8 结合率的测定结果第52-54页
     ·克隆适体与沙门氏菌 O8 的饱和力测定结果第54-55页
     ·克隆适体与沙门氏菌 O8、反筛菌的特异性检测结果第55-56页
     ·荧光基团标记适体 B10 快速鉴定沙门氏菌 O8 的检测结果第56-57页
     ·荧光适体 B10 灵敏度检测结果第57-58页
   ·讨论第58-59页
   ·小结第59-60页
第五章 结论与展望第60-62页
   ·结论第60页
   ·创新点第60页
   ·展望第60-62页
参考文献第62-67页
攻读硕士期间发表的论文第67-68页

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