| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1 引言 | 第9页 |
| 2 β-葡萄糖苷酶的研究进展 | 第9-15页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 | 第9-10页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分类 | 第10页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的结构 | 第10-11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的催化机理 | 第11-12页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的提取纯化方法 | 第12-13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的提取方法 | 第12页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的纯化方法 | 第12-13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的活性测定方法 | 第13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的酶学性质 | 第13-15页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分子量大小 | 第13-14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的最适pH值及pI值 | 第14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的最适反应温度和热稳定性 | 第14页 |
| ·金属离子及化合物对β-葡萄糖苷酶的影响 | 第14-15页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的应用及展望 | 第15页 |
| 3 PCR法获得新基因的方法 | 第15-18页 |
| ·重叠延伸PCR | 第15-16页 |
| ·连续延伸PCR法 | 第16-17页 |
| ·基于PCR的PTDS方法 | 第17-18页 |
| 4 耐盐嗜碱芽孢杆菌 | 第18-19页 |
| 5 研究目的和意义及内容 | 第19-21页 |
| ·研究目的和意义 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 BhbgI基因的化学合成及鉴定 | 第21-31页 |
| 1 材料与方法 | 第21-28页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·引物设计及PCR扩增反应 | 第22-25页 |
| ·克隆与序列分析 | 第25-28页 |
| ·DNA回收 | 第25-26页 |
| ·回收DNA与测序载体pMD18-T连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态DH5α的制备 | 第26页 |
| ·DNA与pMD18-T Vector的连接产物转化DH5α感受态 | 第26-27页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第27页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·DNA序列测定 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-30页 |
| ·Bhbg1基因的合成 | 第28-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 ：β-葡萄糖苷酶的原核表达和纯化 | 第31-40页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·细菌菌株和质粒 | 第31页 |
| ·化学试剂和酶制剂 | 第31-32页 |
| ·培养基 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·原核表达载体pYM4087构建 | 第33-34页 |
| ·载体酶切 | 第33页 |
| ·片段密码子改造 | 第33-34页 |
| ·载体与片段连接 | 第34页 |
| ·载体鉴定 | 第34页 |
| ·大肠杆菌TOP10感受态的制备及载体转化 | 第34-35页 |
| ·β-葡萄糖苷酶诱导和纯化 | 第35页 |
| ·β-葡萄糖苷酶SDS-PAGE验证 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-38页 |
| ·Bhbg1基因插入原核表达载体 | 第35-38页 |
| ·SDS-PAGE验证 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 ：β-葡萄糖苷酶的酶学性质研究 | 第40-48页 |
| 1 材料与方法 | 第40-42页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·化学试剂和酶制剂 | 第40页 |
| ·缓冲液 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·酶活性检测 | 第40-41页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第41页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因的基本生化特性分析 | 第41页 |
| ·β-葡萄糖苷酶酶动力学特性分析 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-46页 |
| ·重组酶最适温度及温度稳定性 | 第42-43页 |
| ·重组酶最适pH及pH稳定性 | 第43-44页 |
| ·金属离子对重组酶活性影响 | 第44-45页 |
| ·糖类化合物对重组酶活性影响 | 第45页 |
| ·重组酶的底物特异性 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第53-54页 |
| 专利 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |