| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 桃拉综合症病毒与草鱼呼肠孤病毒的研究概述 | 第14-23页 |
| 1 桃拉综合症病毒研究概述 | 第14-18页 |
| ·对虾养殖中的主要病毒性疾病 | 第14-16页 |
| ·桃拉综合症病毒的发现 | 第16页 |
| ·桃拉综合症病毒的基因组结构与特征 | 第16-17页 |
| ·桃拉综合症病毒的形态结构及理化特性 | 第16页 |
| ·桃拉综合症病毒感染的组织嗜性和病理变化 | 第16-17页 |
| ·桃拉综合症病毒的检测方法 | 第17页 |
| ·TSV 的防治措施 | 第17-18页 |
| 2 草鱼呼肠孤病毒的研究概述 | 第18-23页 |
| ·鱼类主要的病毒性疾病 | 第18-20页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的发现 | 第20页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的基因组结构与特征 | 第20-21页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的形态结构及理化特性 | 第20-21页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒感染的组织嗜性和病理变化 | 第21页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒多肽的免疫原性研究 | 第21-22页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的检测方法 | 第22页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的防治措施 | 第22-23页 |
| 第二章 桃拉综合症病毒结构蛋白 VP2 及 VP3 的克隆、表达及抗体的制备 | 第23-40页 |
| 1 材料与方法 | 第23-32页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·试验细胞 | 第23页 |
| ·抗体、酶类及试剂盒 | 第23页 |
| ·试验试剂及溶液配制 | 第23-24页 |
| ·溶液配制 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·病样的采集及前处理 | 第26-27页 |
| ·桃拉综合症病毒 RNA 的提取及 RT-PCR | 第27-28页 |
| ·桃拉综合症病毒 RNA 的提取 | 第27页 |
| ·桃拉综合症病毒 vp2 及 vp3 基因引物的引物合成 | 第27页 |
| ·cDNA 链的合成及目的基因的扩增 | 第27-28页 |
| ·VP2 及 VP3 多肽的合成 | 第28页 |
| ·重组表达载体的构建及表达 | 第28-29页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第29页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及纯化 | 第29页 |
| ·多抗血清的制备 | 第29-30页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
| ·Western Blot 及 ELISA 分析 | 第31-32页 |
| ·Western blot 法检测单克隆抗体及多克隆抗体的免疫特异性 | 第31页 |
| ·单克隆抗体的 ELISA 分析 | 第31-32页 |
| ·Immunodot Blot 分析 | 第32页 |
| 2．结果与分析 | 第32-37页 |
| ·vp2 及 vp3 基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·表达载体的构建及重组子的鉴定 | 第33-34页 |
| ·目的蛋白的表达及其可溶性分析 | 第34页 |
| ·Western Blot 检测多抗血清及单克隆抗体备 | 第34-37页 |
| ·单抗及多抗的 Western blot 分析 | 第34-35页 |
| ·M-vp2 及 M-vp3 的 ELISA 分析 | 第35-37页 |
| ·Immunodot Blot 检测 | 第37页 |
| 3．讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 草鱼呼肠孤病毒外壳蛋白 VP7 的表达及其单克隆抗体的制备 | 第40-54页 |
| 1 材料与方法 | 第40-47页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·试验细胞及抗体 | 第40页 |
| ·抗体、酶类及试剂盒 | 第40页 |
| ·试验试剂 | 第40页 |
| ·溶液配制 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41页 |
| ·样品的采集与处理 | 第41页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒宿主细胞的传代培养 | 第41-42页 |
| ·草鱼呼肠孤病毒的病毒扩增 | 第42页 |
| ·抗原制备 | 第42页 |
| ·多克隆抗体及单克隆抗体的制备 | 第42-45页 |
| ·多克隆抗体的效价测定及微量中和作用 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第44-45页 |
| ·腹水制备及抗体纯化 | 第45页 |
| ·抗体亚型的鉴定 | 第45页 |
| ·草鱼出血病病灶组织上清过滤液中草鱼呼肠孤病毒的检测 | 第45-47页 |
| ·ELISA 法对草鱼病样的检测 | 第45页 |
| ·RT-PCR 法对草鱼病样的检测 | 第45-47页 |
| 2．结果与分析 | 第47-52页 |
| ·VP7 蛋白的诱导表达及其多抗血清的制备 | 第47页 |
| ·多抗血清的微量中和效应 | 第47-48页 |
| ·杂交瘤细胞筛选 | 第48-51页 |
| ·单克隆抗体分型鉴定 | 第51页 |
| ·单克隆抗体对临床标本的检测 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 附录：论文发表情况 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
