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东平湖湖水蓝细菌多样性分析及mcyE基因的定量检测

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-28页
   ·蓝细菌水华概述第11-14页
     ·蓝细菌水华的形成原因第11-12页
     ·蓝细菌水华的常见危害第12页
     ·现有的蓝细菌水华的防控措施第12-13页
     ·蓝细菌水华的分子生物学研究进展第13-14页
   ·淡水蓝细菌多样性研究进展第14页
     ·淡水蓝细菌群落结构特征第14页
     ·淡水蓝细菌分子水平研究第14页
   ·微囊藻毒素第14-18页
     ·微囊藻毒素的危害第14-15页
     ·微囊藻毒素的结构特征第15页
     ·合成微囊藻毒素的分子机理第15-16页
     ·微囊藻毒素检测第16-18页
   ·蓝细菌菌群结构分析方法第18-25页
     ·T-RFLP第19-20页
     ·构建 16S rDNA 克隆文库第20-23页
     ·蓝细菌多样性分析第23-25页
       ·Shannon-wiener 指数第23-24页
       ·Margalef 指数第24页
       ·Simpson 指数第24页
       ·Pielou 指数第24页
       ·PCA 分析第24-25页
   ·荧光定量 PCR 概述第25-26页
     ·实时荧光定量 PCR 的应用第25-26页
   ·本实验的选题依据及研究意义第26-27页
   ·本研究的技术路线第27-28页
2 材料与方法第28-39页
   ·仪器设备第28页
   ·实验试剂第28页
   ·样品的采集第28-29页
   ·主要溶液的配制第29-30页
     ·LB 培养基第29页
     ·氨苄青霉素溶液第29页
     ·X-Gal 贮液第29页
     ·IPTG 贮液第29-30页
   ·PCR 引物第30页
   ·样品总 DNA 的提取及 T-RFLP第30-31页
     ·样品总 DNA 的提取第30页
     ·T-RFLP第30-31页
       ·荧光 PCR 产物的限制性酶切第30-31页
       ·酶切产物的基因扫描第31页
     ·PCR 扩增的反应条件第31页
     ·PCR 扩增产物的纯化第31页
   ·构建 16S rDNA 克隆文库第31-33页
     ·PCR 产物的连接第31-32页
     ·E. coli DH5 感受态细胞的制备第32页
     ·转化第32-33页
     ·阳性克隆的筛选第33页
     ·ARDRA 分型第33页
   ·数据分析第33-35页
     ·T-RFLP 分析第33-34页
     ·PCA 分析第34页
     ·16S rDNA 文库序列分析第34-35页
     ·系统发育分析第35页
   ·实时荧光定量 PCR第35-39页
     ·DNA 浓度检测及调节第35-36页
     ·荧光定量 PCR 及结果分析第36-39页
3 结果与分析第39-48页
   ·T-RFLP 分析第39-40页
     ·样品的 T-RFLP 图谱分析第39页
     ·多样性指数分析第39-40页
     ·T-RFLP 图谱中主要片段的定性分析第40页
   ·16S rDNA 克隆文库分析第40-45页
     ·阳性克隆子的验证第40-41页
     ·16S rDNA 扩增片段的 ARDRA 分型第41页
     ·嵌合体检测及库容的估算第41-42页
     ·东平湖水蓝细菌群落结构分析第42-43页
     ·系统发育树分析第43-44页
     ·基于 16S rDNA 文库的主成分分析第44-45页
   ·荧光定量 PCR第45-48页
     ·荧光定量 PCR 数据分析第45-46页
     ·mcyE 基因差异分析第46-48页
4 讨论第48-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-60页
致谢第60-61页
在读期间发表论文第61页

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