| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 1 绪论 | 第13-20页 |
| ·课题背景 | 第13-18页 |
| ·氧化应激反应中Prx1的作用 | 第13-14页 |
| ·氧化信号通路的激活 | 第14页 |
| ·PRAK参与氧化信号通路的调节 | 第14-15页 |
| ·Prx1的磷酸化与其活性的关系 | 第15-17页 |
| ·蛋白的磷酸化修饰及其研究方法 | 第17-18页 |
| ·研究的目的与意义 | 第18页 |
| ·技术路线 | 第18-20页 |
| 2 第一部分：体外PRAK对Prx1的磷酸化水平检测 | 第20-42页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·质粒、蛋白和菌株 | 第20页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验主要试剂来源 | 第21页 |
| ·实验主要试剂的配置 | 第21-23页 |
| ·实验方法 | 第23-35页 |
| ·pET14b-Prx1重组质粒的构建 | 第23-29页 |
| ·His-Prx1融合蛋白的原核表达与纯化 | 第29-31页 |
| ·Western Blot技术检测体外Prx1的磷酸化水平 | 第31-33页 |
| ·2D-DIGE技术检测体外Prx1的磷酸化水平 | 第33-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-41页 |
| ·pET14b-Prx1重组质粒构建结果 | 第35-37页 |
| ·His-Prx1融合蛋白的原核表达与纯化 | 第37-38页 |
| ·蛋白定量 | 第38页 |
| ·Western Blot技术检测体外Prx1的磷酸化水平 | 第38-39页 |
| ·2D-DIGE技术检测体外Prx1的磷酸化水平 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 3 第二部分：细胞内PRAK对Prx1的磷酸化水平检测 | 第42-45页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·细胞系 | 第42页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第42页 |
| ·实验主要试剂来源 | 第42页 |
| ·实验主要试剂的配置 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·细胞培养 | 第42页 |
| ·细胞总蛋白的获取 | 第42-43页 |
| ·Bradford法蛋白定量 | 第43页 |
| ·Western Blot检测 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| ·结论 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 4 第三部分：Prx1过氧化物酶活性检测系统的建立以及测定 | 第45-53页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·质粒、菌株和细胞 | 第45页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第45页 |
| ·实验主要试剂来源 | 第45页 |
| ·实验主要试剂的配置 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-48页 |
| ·pET14b-yTrx1、pET14b-yTrxR重组质粒的构建 | 第45-47页 |
| ·His-yTrx1、His-yTrxR融合蛋白的原核表达与纯化 | 第47页 |
| ·Prx1过氧化物酶活性的测定 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·pET14b-yTrx1、pET14b-yTrxR重组质粒的构建结果 | 第48-50页 |
| ·融合蛋白的原核表达与纯化结果 | 第50页 |
| ·Prx1过氧化物酶活性的测定结果 | 第50-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| ·结论 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
