| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| · | 第14-23页 |
| ·羊奶与山羊产业 | 第14-15页 |
| ·羊奶营养特点及其脂肪酸组成 | 第15-18页 |
| ·羊奶膻味的形成与研究进展 | 第18-23页 |
| ·羊奶脂肪酸来源与乳脂脂解 | 第23-25页 |
| ·不同物种奶的脂解系统差异 | 第24-25页 |
| ·羊奶脂解系统与膻味的关系 | 第25页 |
| ·脂蛋白脂酶的研究进展 | 第25-31页 |
| ·脂蛋白脂酶 | 第25页 |
| ·脂蛋白脂酶的结构 | 第25-27页 |
| ·脂蛋白脂酶的功能 | 第27-28页 |
| ·脂蛋白脂酶的 RNA 干扰 | 第28-29页 |
| ·脂蛋白脂酶的活性抑制研究 | 第29-31页 |
| ·研究的目的与意义 | 第31-32页 |
| 第二章 西农萨能羊乳腺组织 LPL 基因的 cDNA 克隆及生物信息学分析 | 第32-41页 |
| ·材料与方法 | 第32-36页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-39页 |
| ·乳腺组织总 RNA 的提取 | 第36页 |
| ·LPL 基因 cDNA 全长克隆与生物信息学分析 | 第36-37页 |
| ·奶山羊 LPL 基因的氨基酸序列同源性分析 | 第37-38页 |
| ·奶山羊 LPL 基因的初级蛋白结构分析 | 第38-39页 |
| ·基于奶山羊 LPL 氨基酸序列的系统进化树构建 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第三章 西农萨能羊 LPL 基因的组织表达分析 | 第41-47页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-45页 |
| ·提取组织总 RNA | 第43页 |
| ·定量引物的检测 | 第43-44页 |
| ·奶山羊 LPL 的组织表达分析 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·组织总 RNA 提取的注意事项 | 第45页 |
| ·定量引物的设计 | 第45页 |
| ·LPL 基因的组织表达 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第四章 西农萨能羊 LPL 基因的 RNA 干扰研究 | 第47-61页 |
| ·材料与方法 | 第47-53页 |
| ·主要实验试剂 | 第47-48页 |
| ·针对 LPL 基因的 siRNA 的选择及 shRNA 的设计 | 第48-49页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建 | 第49页 |
| ·pDsRed-C1-LPL 载体的构建 | 第49页 |
| ·shRNA 序列的筛选 | 第49-50页 |
| ·pENTR/CMV-CFP/U6-shRNA 重组腺病毒载体的构建与鉴定 | 第50页 |
| ·腺病毒的包装、扩增及滴度测定 | 第50-52页 |
| ·腺病毒感染乳腺上皮细胞最佳 MOI 值的测定 | 第52页 |
| ·LPL 基因的 RNA 干扰效率检测及干扰对乳腺上皮细胞脂质代谢相关基因的影响 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-58页 |
| ·pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 载体的构建 | 第53页 |
| ·pDsRed-C1-LPL 载体的构建 | 第53-54页 |
| ·shRNA 序列的筛选 | 第54-55页 |
| ·pAd/PL-DEST/CMV-CFP/U6-shRNA 重组腺病毒载体的构建与鉴定 | 第55页 |
| ·腺病毒的包装、扩增及滴度测定 | 第55-56页 |
| ·腺病毒感染乳腺上皮细胞最佳 MOI 值的测定 | 第56-57页 |
| ·LPL 基因的 RNA 干扰效率检测及干扰对乳腺上皮细胞脂质代谢相关基因的影响 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·本实验选择的其它与脂质代谢相关的基因 | 第58-59页 |
| ·LPL 的 RNA 干扰对其它脂质代谢相关基因的影响 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第五章 Orlistat 对 LPL 及乳脂代谢相关基因的影响 | 第61-66页 |
| ·材料与方法 | 第61-63页 |
| ·主要实验试剂 | 第61页 |
| ·实验重要溶液的配制 | 第61-62页 |
| ·Orlistat 处理奶山羊乳腺上皮细胞 | 第62页 |
| ·乳腺上皮细胞总 RNA 的提取与第一链 cDNA 的合成 | 第62-63页 |
| ·实时荧光定量 PCR 检测乳脂代谢相关基因的 mRNA 表达水平 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-64页 |
| ·乳腺上皮细胞总 RNA 的提取与第一链 cDNA 的合成 | 第63页 |
| ·Orlistat 处理乳腺上皮细胞后脂质代谢相关基因的表达 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·脂酶抑制剂 Orlistat 及其对脂质代谢的影响 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录 | 第74-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
