中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-36页 |
·水稻插入突变体库创建的现状 | 第13-19页 |
·利用物理和化学方法创建突变体库 | 第13-14页 |
·利用转座子创建突变体库 | 第14页 |
·利用反转座转座子创建突变体库 | 第14-15页 |
·利用T-DNA创建突变体库 | 第15-19页 |
·WD40蛋白的概述 | 第19-26页 |
·WD40蛋白在植物中的作用 | 第20-26页 |
·参与胚胎发育的WD40蛋白 | 第22页 |
·参与配子体发育的WD40蛋白 | 第22-23页 |
·参与花的发育和开花时间的WD40蛋白 | 第23-24页 |
·参与初生和次生发育的WD40蛋白 | 第24-25页 |
·参与光信号传导的WD40蛋白 | 第25页 |
·水稻中的WD40蛋白家族基因 | 第25-26页 |
·植物花药的发育过程 | 第26-33页 |
·植物花药发育过程的分期 | 第26-29页 |
·植物减数分裂的过程 | 第29-30页 |
·植物花药发育的突变体分析 | 第30-33页 |
·水稻株高的研究进展 | 第33-36页 |
2 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
3 材料与方法 | 第37-42页 |
·实验材料 | 第37页 |
·植物材料 | 第37页 |
·质粒载体和细菌菌株 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-42页 |
·水稻大型T-DNA插入突变体库的构建 | 第37-38页 |
·突变体的种植和表型筛选 | 第38页 |
·突变家系植株DNA的抽提和PCR阳性检测 | 第38页 |
·突变家系植株T-DNA侧翼序列的分离 | 第38页 |
·突变家系的突变表型与T-DNA插入的共分离验证 | 第38-39页 |
·水稻各组织总RNA的抽提、检测和RT-PCR | 第39-40页 |
·遗传转化载体的构建 | 第40-41页 |
·成熟花粉的碘染 | 第41页 |
·oslis-l1突变体的细胞学观察 | 第41-42页 |
4 结果与分析 | 第42-67页 |
·水稻大型T-DNA插入突变体库的构建 | 第42页 |
·突变体的种植和突变表型的鉴定 | 第42-43页 |
·一个半矮和低育性突变体osl-l1-1的获得 | 第43-45页 |
·oslis-l1-1突变体T-DNA侧翼序列的分离及其突变表型的共分离验证 | 第45-48页 |
·oslis-l1-1等位突变体oslis-l1-2的鉴定 | 第48-49页 |
·转双链RNAi植株重现突变表型 | 第49-51页 |
·基因功能互补实验 | 第51-53页 |
·在两个等位突变体中,由于T-DNA的插入产生2个不同的截断的转录本 | 第53-54页 |
·OSLIS-L1不影响花粉母细胞的减数分离过程 | 第54-56页 |
·半薄切片观察oslis-l1-2花药的发育过程 | 第56-59页 |
·透射电镜(TEM)观察oslis-l1-2突变体花药 | 第59-60页 |
·oslis-l1-2茎的细胞学观察 | 第60-62页 |
·OSLIS-L1基因的表达分析和亚细胞定位 | 第62-64页 |
·水稻中OSLIS-L1的同源基因 | 第64-67页 |
5 讨论 | 第67-73页 |
·水稻插入突变体库的现状及利用 | 第67-68页 |
·WD40重复结构域在OsLIS-L1的生物学功能中的作用 | 第68-69页 |
·OSLIS-L1在雄配子体发育中的作用 | 第69-71页 |
·OsLIS-L1在水稻茎第一节间发育中的作用 | 第71页 |
·本研究后续工作的一些设想 | 第71-73页 |
·OsLIS-L1是否形成同源二聚体 | 第71-72页 |
·原位杂交 | 第72页 |
·OsLIS-L1可能参与GA信号转导途径 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-89页 |
附录:部分是实验的详细步骤及试剂配方 | 第89-106页 |
Protocol 1:Agrobacterium-mediated genetic transformation of Rice | 第89-96页 |
Protocol 2:水稻DNA的制备法(CTAB法)和Southern blotting | 第96-100页 |
水稻DNA的少量制备法 | 第96页 |
水稻DNA的大量制备法 | 第96-97页 |
Southern blotting | 第97-100页 |
Protocol 3:RNA的抽提和反转录 | 第100-101页 |
RNA的抽提 | 第100-101页 |
RNA的反转录 | 第101页 |
Protocol 4:Plasmid DNA extraction | 第101-103页 |
Protocol 5:基因功能互补载体的构建方法 | 第103-104页 |
Protocol 6:树脂包埋半薄切片技术 | 第104-106页 |
作者简历 | 第106-108页 |
致谢 | 第108页 |