| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一篇 人源磷酸核糖焦磷酸合成酶（hPRS1）致病突变体及hPR52 的结构和功能研究 | 第12-65页 |
| 第一章 综述（原发性痛风与PRS1 突变体） | 第12-24页 |
| ·痛风病的总述 | 第12-13页 |
| ·痛风病的发病率 | 第12-13页 |
| ·痛风病的分类 | 第13页 |
| ·原发性痛风的致病机制研究 | 第13-15页 |
| ·尿酸生成过多 | 第13-15页 |
| ·尿酸排泄减少 | 第15页 |
| ·原发性痛风与嘌呤核苷酸代谢途径 | 第15-17页 |
| ·从头合成途径（De novo synthesis） | 第16页 |
| ·补救途径（Salvage pathway） | 第16-17页 |
| ·PRPP 与核苷酸代谢调节 | 第17页 |
| ·磷酸核糖焦磷酸合成酶PRS 与原发性痛风 | 第17-24页 |
| 第二章实验材料、设备和方法 | 第24-33页 |
| ·实验材料与设备 | 第24-26页 |
| ·菌株、质粒和培养基 | 第24页 |
| ·酶与试剂 | 第24-25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-33页 |
| ·溶液的配置 | 第26页 |
| ·目的基因的重组克隆质粒构建 | 第26-28页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·PCR 扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的回收和连接 | 第27-28页 |
| ·连接产物的转化和鉴定 | 第28页 |
| ·培养基配制 | 第28页 |
| ·目的蛋白的表达和纯化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞 | 第28页 |
| ·重组蛋白表达情况鉴定 | 第28页 |
| ·目标蛋白的大量表达 | 第28-29页 |
| ·蛋白纯化 | 第29页 |
| ·蛋白理化性质研究 | 第29-33页 |
| ·蛋白质浓度测定（pierce 公司BCA Protein Assay Kit） | 第29页 |
| ·凝胶层析判断蛋白颗粒的分子量 | 第29-30页 |
| ·hPRS1 的酶学活性测定 | 第30-32页 |
| ·hPRS1 在溶液中的聚集状态测定 | 第32-33页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第33-58页 |
| ·质粒的构建（点突变PCR 的讨论） | 第33-35页 |
| ·hPRS1 野生型与七个突变体蛋白质的表达与纯化 | 第35-38页 |
| ·hPRS2 蛋白质的表达与纯化 | 第38-40页 |
| ·hPRS1 野生型与七个突变体蛋白质生化性质的鉴定 | 第40-43页 |
| ·PRS1 野生型和突变体蛋白质聚集状态的初步研究 | 第43-46页 |
| ·PRS1-D52H 蛋白质二级结构的初步研究 | 第46-51页 |
| ·PRS1-N114S 蛋白质二级结构的初步研究 | 第51-56页 |
| ·PRS1 突变体蛋白和 PRS2 蛋白的晶体生长 | 第56-58页 |
| 本篇小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 第二篇 人源黑色素瘤分化相关抗原5（MDA5）各功能片段的结构和功能研究 | 第65-91页 |
| 第一章综述（MDA5 的表达与纯化） | 第65-73页 |
| ·天然免疫系统与模式识别受体 | 第65-68页 |
| ·膜结合受体 | 第65-66页 |
| ·细胞内的模式识别受体 | 第66-68页 |
| ·MDA5 的结构与功能研究现状 | 第68-70页 |
| ·MDA5 的信号转导通路 | 第70-71页 |
| ·开展MDA5 的结构与功能研究的目的和意义 | 第71-73页 |
| 第二章实验材料、设备和方法 | 第73-79页 |
| ·实验材料与设备 | 第73-74页 |
| ·菌株、质粒和培养基 | 第73页 |
| ·酶与试剂 | 第73页 |
| ·仪器设备 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-79页 |
| ·溶液的配置 | 第74页 |
| ·目的基因的重组克隆质粒构建 | 第74-76页 |
| ·引物设计 | 第74页 |
| ·PCR 扩增 | 第74-75页 |
| ·PCR 产物的回收和连接 | 第75页 |
| ·连接产物的转化和鉴定 | 第75-76页 |
| ·培养基配制 | 第76页 |
| ·目的蛋白的表达和纯化 | 第76-77页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞 | 第76页 |
| ·重组蛋白表达情况鉴定 | 第76页 |
| ·目标蛋白的大量表达 | 第76-77页 |
| ·蛋白纯化 | 第77页 |
| ·蛋白理化性质研究 | 第77-79页 |
| ·蛋白质浓度测定（pierce 公司BCA Protein Assay Kit） | 第77页 |
| ·凝胶层析判断蛋白颗粒的分子量 | 第77-79页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第79-87页 |
| ·质粒的构建（点突变PCR 的讨论） | 第79-82页 |
| ·MDA5 蛋白质各结构域的表达与纯化 | 第82-87页 |
| 本篇小结 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 其它工作 | 第91-93页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第93页 |
