| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-16页 |
| ·萘酰亚胺类化合物的概述 | 第11页 |
| ·免疫性疾病的研究进展 | 第11-13页 |
| ·概述 | 第11-12页 |
| ·恶性淋巴瘤与白血病 | 第12页 |
| ·免疫抑制剂 | 第12-13页 |
| ·萘酰亚胺类化合物毒性效应机制 | 第13-14页 |
| ·研究目标、创新点和意义 | 第14-16页 |
| ·研究目标 | 第14页 |
| ·创新点 | 第14页 |
| ·研究意义 | 第14-16页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第16-28页 |
| ·实验材料 | 第16-18页 |
| ·细胞株 | 第16页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物 | 第16页 |
| ·常用试剂 | 第16-18页 |
| ·仪器与设备 | 第18-19页 |
| ·常用试剂的配制 | 第19-23页 |
| ·常用方法 | 第23-28页 |
| ·灭菌 | 第23页 |
| ·复苏细胞步骤 | 第23页 |
| ·贴壁细胞的传代 | 第23页 |
| ·悬浮细胞的传代 | 第23页 |
| ·细胞的冻存 | 第23-24页 |
| ·细胞计数 | 第24页 |
| ·细胞中总蛋白的提取 | 第24页 |
| ·细胞质与细胞核蛋白的提取 | 第24-25页 |
| ·Bradford比色法测定蛋白质含量 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第25-26页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第26页 |
| ·Real-Time PCR | 第26-28页 |
| 第3章 萘酰亚胺类衍生物体外活性筛选 | 第28-35页 |
| ·引言 | 第28-29页 |
| ·材料与方法 | 第29-30页 |
| ·主要材料 | 第29页 |
| ·主要仪器和设备 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物对Raji B淋巴细胞的毒性分析 | 第29页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物对Jurkat T淋巴细胞的毒性分析 | 第29-30页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对正常人外周血单核细胞的毒性分析 | 第30页 |
| ·分离纯化正常人外周血单核细胞 | 第30页 |
| ·细胞给药培养 | 第30页 |
| ·细胞存活率测定 | 第30页 |
| ·数据处理 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-34页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物对Raji B淋巴细胞的毒性实验结果 | 第31-32页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物对Jurkat T淋巴细胞的毒性实验结果 | 第32-34页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对正常人外周血单核细胞的毒性实验结果 | 第34页 |
| ·讨论与小结 | 第34-35页 |
| 第4章 萘酰亚胺类衍生物7-B对RAJI B淋巴细胞作用的机理研究 | 第35-52页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·实验材料与方法 | 第35-40页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·MTT还原测定法——细胞毒性测定 | 第35-36页 |
| ·流式细胞术-PI染色法检测7-b对Raji B淋巴细胞周期的影响 | 第36-37页 |
| ·流式细胞术-DCFH-DA染色法检测7-b对Raji B淋巴细胞ROS的影响 | 第37页 |
| ·流式细胞术-Rho123染色法检测7-b对Raji B淋巴细胞线粒体膜电位的影响 | 第37页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术 | 第37-38页 |
| ·Hoechst染色 | 第38-39页 |
| ·Western blot检测p53、c-myc等蛋白表达量变化情况 | 第39页 |
| ·Real Time PCR法测定基因p53、c-myc、p21、Bax、Bcl-2的变化 | 第39-40页 |
| ·统计学方法 | 第40页 |
| ·实验结果 | 第40-49页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对Raji细胞存活率的影响 | 第40页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对Raji细胞周期的影响 | 第40-41页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对细胞内ROS含量的影响 | 第41-42页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对细胞内线粒体膜电位的影响 | 第42-43页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对细胞凋亡率的影响 | 第43-44页 |
| ·Hoechst染色结果 | 第44-45页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对p53、c-myc、p21、Bax、Bcl-2基因的影响 | 第45-49页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-B对P53、C-MYC等蛋白表达的影响 | 第45-47页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-B对BAX、BCL-2蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-B对P53、C-MYC等基因表达的影响 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| 第5章 萘酰亚胺类衍生物对JURKAT T淋巴细胞作用的机理研究 | 第52-73页 |
| ·引言 | 第52页 |
| ·实验材料与方法 | 第52-59页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·MTT还原测定法——细胞毒性测定 | 第53页 |
| ·流式细胞术-PI染色法检测7-b对Jurkat T淋巴细胞周期的影响 | 第53-54页 |
| ·流式细胞术-DCFH-DA染色法检测7-b对Jurkat T淋巴细胞ROS的影响 | 第54页 |
| ·流式细胞术-Rho123染色法检测7-b对Jurkat T淋巴细胞线粒体膜电位的影响 | 第54页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术 | 第54-55页 |
| ·Hoechst染色 | 第55页 |
| ·Western blot检测p73、UHRF1、p21、c-Myc蛋白表达量变化情况 | 第55页 |
| ·Real Time PCR法测定基因p73、UHRF1、p21、c-Myc、Bax、Bcl-2的变化 | 第55-56页 |
| ·ELISA方法检测7-b对IL-2细胞因子分泌水平的影响 | 第56-57页 |
| ·Real Time PCR法测定基因IL-2、TNF-a、IFN-r的变化 | 第57页 |
| ·ELISA方法检测7-b对NF-kB的DNA结合活性的影响 | 第57-58页 |
| ·Western blot检测Cox-2蛋白表达量变化情况 | 第58页 |
| ·统计学方法 | 第58-59页 |
| ·实验结果 | 第59-70页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对Jurkat T淋巴细胞存活率的影响 | 第59页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对Jurkat T细胞周期的影响 | 第59-60页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对细胞内ROS含量的影响 | 第60-61页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对细胞内线粒体膜电位的影响 | 第61-62页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对细胞凋亡率的影响 | 第62-63页 |
| ·Hoechst染色结果 | 第63-64页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对p73、UHRF1等基因表达的影响 | 第64-67页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-B对P73、UHRF1、P21、C-MYC蛋白表达的影响 | 第64-65页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-B对BAX、BCL-2蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-B对P73、UHRF1等基因表达的影响 | 第66-67页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对Jurkat T淋巴细胞上清中的IL-2的影响 | 第67-68页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对Jurkat T淋巴细胞IL-2、TNF-a等基因表达的影响 | 第68页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对NF-κB的DNA结合活性的影响 | 第68-69页 |
| ·萘酰亚胺类衍生物7-b对Jurkat T淋巴细胞中COX-2蛋白表达的影响 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 第6章 结论 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 论文及专利发表情况 | 第84页 |
