中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一部分 引言 | 第10-31页 |
1. 对虾病毒性疾病及危害 | 第10页 |
2. 对虾白斑综合症病毒 | 第10-21页 |
2.1 WSSV的危害及研究历史 | 第10-12页 |
2.2 白斑病的症状 | 第12-13页 |
2.3 宿主范围 | 第13页 |
2.4 WSSV粒子的大小和形态结构 | 第13-14页 |
2.5 WSSV的分子生物学 | 第14-18页 |
2.6 分类地位 | 第18页 |
2.7 WSSV的致病机理的研究 | 第18-19页 |
2.8 WSSV的诊断和防治的研究 | 第19页 |
2.9 对虾食性的变化 | 第19-20页 |
2.10 对虾的消化酶 | 第20页 |
2.11 对虾免疫学 | 第20-21页 |
3. 蓝藻基因工程 | 第21-30页 |
3.1 蓝藻及其特点 | 第21-23页 |
3.2 蓝藻的分子生物学进展 | 第23页 |
3.3 蓝藻的遗传系统 | 第23-25页 |
3.4 蓝藻的基因转移 | 第25-27页 |
3.5 外源基因在蓝藻中的表达 | 第27-30页 |
3.6 蓝藻与对虾的关系 | 第30页 |
3.7 蓝藻的拮抗现象 | 第30页 |
4. 本论文的研究目的和内容 | 第30-31页 |
第二部分 材料和方法 | 第31-42页 |
1. 实验材料 | 第31-33页 |
1.1 材料 | 第31-32页 |
1.2 主要试剂 | 第32页 |
1.3 主要仪器 | 第32-33页 |
2. 实验方法 | 第33-42页 |
2.1 WSSV的纯化 | 第33页 |
2.2 WSSV囊膜蛋白VP28的鉴定 | 第33页 |
2.3 兔抗WSSV的多克隆抗体的制备 | 第33-34页 |
2.4 VP28蛋白基因的扩增 | 第34-35页 |
2.5 穿梭表达载体的构建 | 第35-38页 |
2.6 蓝藻的转化 | 第38-40页 |
2.7 转基因藻的分子水平检测 | 第40-41页 |
2.8 转基因藻的生理活性分析 | 第41-42页 |
第三部分 结果和分析 | 第42-72页 |
第一章 WSSV的纯化和和多克隆抗体的制备 | 第42-49页 |
1.1 WSSV的纯化 | 第42页 |
1.2 WSSV蛋白的定量测定 | 第42-43页 |
1.3 WSSV的电镜观察 | 第43-44页 |
1.4 VP28的SDS-PAGE图谱 | 第44-46页 |
1.5 兔抗WSSV多克隆抗体的鉴定 | 第46-47页 |
1.6 讨论 | 第47-49页 |
第二章 WSSV囊膜蛋白VP28基因的克隆 | 第49-57页 |
2.1 引物设计和目的片段的PCR扩增 | 第49-51页 |
2.2 WSSV-中国株VP28蛋白基因的克隆载体的构建 | 第51-52页 |
2.3 DNA序列测定与分析 | 第52-54页 |
2.4 蛋白序列的分析 | 第54-55页 |
2.5 讨论 | 第55-57页 |
第三章 穿梭表达载体pRL-VP28的构建和对蓝藻的转化 | 第57-72页 |
3.1 穿梭表达载体的构建 | 第57-59页 |
3.2 三亲接合转移和转基因蓝藻的筛选 | 第59-63页 |
3.3 转基因藻的形态观察 | 第63-65页 |
3.4 转基因蓝藻的分子水平检测 | 第65-67页 |
3.5 转基因蓝藻的生长曲线 | 第67-68页 |
3.6 BG-11和50%海水中的鱼腥藻7120转化现象的比较 | 第68-69页 |
3.7 讨论 | 第69-72页 |
结论和展望 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
附件 | 第83页 |