| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-22页 |
| ·大环内酯的结构、功能及改造 | 第11-13页 |
| ·大环内酯的简介 | 第11-12页 |
| ·大环内酯的改造 | 第12-13页 |
| ·红霉素及其衍生物 | 第13-16页 |
| ·红霉素简介 | 第13页 |
| ·红霉素类衍生物 | 第13-14页 |
| ·红霉素的化学全合成 | 第14页 |
| ·红霉素的生物合成机理 | 第14-16页 |
| ·次级代谢产物的代谢工程改造 | 第16-21页 |
| ·代谢工程的简介 | 第16-17页 |
| ·代谢工程在次级代谢产物合成中的应用 | 第17-18页 |
| ·代谢工程在红霉素产生菌当中的应用 | 第18-21页 |
| ·本研究的主要内容和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第22-23页 |
| ·引物 | 第23页 |
| ·培养基及其培养条件 | 第23-24页 |
| ·工具酶和试剂 | 第24-25页 |
| ·DL5000 Marker | 第25页 |
| ·溶液 | 第25页 |
| ·实验仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的碱法小量制备 | 第27页 |
| ·DNA电泳 | 第27页 |
| ·DNA的酶切和连接 | 第27页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第28页 |
| ·S.erythraea HL3168 E3孢子的复苏与制备 | 第28页 |
| ·S.erythraea HL3168 E3和E.coli的属间接合转移 | 第28页 |
| ·S.erythraea双交换的挑选 | 第28-29页 |
| ·S.erythraea总DNA的提取 | 第29页 |
| ·S.erythraea的发酵方法和样品的处理 | 第29页 |
| ·PMV曲线的测定 | 第29页 |
| ·S.erythraea发酵产物HPLC和LC-MS的检测 | 第29-30页 |
| ·生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 第三章 提高红霉素工业菌株的红霉素A产量 | 第31-39页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·工业菌HL3168 E3染色体上attB插入盒子的构建简述 | 第31-32页 |
| ·链霉菌噬菌体ΦC31整合酶介导的位点特异性整合机制 | 第31-32页 |
| ·含有attB插入盒子重组菌的构建简述 | 第32页 |
| ·强化eryK和eryG基因的表达 | 第32-37页 |
| ·构建含有eryK和eryG基因的重组质粒 | 第32-33页 |
| ·重组菌S.erythraea-KGK的构建及其验证 | 第33-35页 |
| ·重组菌S.erythraea-KGK发酵液中红霉素A含量的增加 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-39页 |
| 第四章 构建高产红霉素C,B,D的重组菌 | 第39-48页 |
| ·引言 | 第39-40页 |
| ·产红霉素C(Er-C)重组菌的构建 | 第40-43页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·中断质粒的构建 | 第40-42页 |
| ·eryG基因失活重组菌的获得 | 第42-43页 |
| ·产红霉素B重组菌的构建 | 第43-46页 |
| ·引物设计 | 第43页 |
| ·重组质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·eryK基因缺失重组菌的获得 | 第44-46页 |
| ·产红霉素D重组菌的构建 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第五章 不同重组菌中红霉素各组分的积累 | 第48-55页 |
| ·重组菌QL-G,QL-K,和QL-KG中不同红霉素组分的积累 | 第48-52页 |
| ·各重组菌中不同红霉素组分的积累 | 第48-50页 |
| ·各重组菌中不同红霉素的产量 | 第50-51页 |
| ·重组菌和出发菌HL 3168E3发酵过程中的各组分浓度的变化 | 第51-52页 |
| ·重组菌基本生理特性的考察 | 第52-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 总结与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 成果 | 第62页 |
