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应用单克隆抗体评价稻田天敌的捕食作用——稻飞虱和弹尾虫单克隆抗体的制备及其应用

致谢第1-6页
中文摘要第6-17页
第一部分 文献综述及本研究的目的和意义第17-55页
 引言第18-20页
 第一章 节肢动物田间捕食作用研究概述第20-31页
  1 水稻害虫天敌资源第20-21页
  2 捕食性天敌对水稻害虫的控制作用第21-22页
  3 中性昆虫在稻田生态系统中的作用第22-23页
  4 节肢动物田间捕食作用的研究方法第23-31页
   4.1 实验室研究法第23-24页
   4.2 田间资料的统计分析法第24页
   4.3 生命表法第24页
   4.4 模型模拟法第24-25页
   4.5 直接观察法第25-26页
   4.6 田间笼罩法第26-27页
   4.7 标记回捕法第27页
   4.8 排泄物分析法第27-28页
   4.9 肠道解剖法第28页
   4.10 色谱法第28页
   4.11 电泳法第28-29页
   4.12 血清学方法第29-30页
   4.13 基因探针法第30-31页
 第二章 单克隆抗体及其免疫学检测方法简介第31-43页
  1 抗体的基本结构特点第31-33页
  2 杂交瘤技术的基本原理第33-34页
  3 杂交瘤技术的基本流程第34-37页
   3.1 动物免疫第34-36页
   3.2 细胞融合第36页
   3.3 杂交瘤细胞的筛选第36页
   3.4 杂交瘤细胞的克隆第36-37页
   3.5 单克隆抗体的制备第37页
   3.6 杂交瘤细胞的冻存第37页
  4 单克隆抗体和多克隆抗体的比较第37页
  5 常用的免疫学检测技术第37-39页
   5.1 沉淀法第37-38页
   5.2 凝集法第38-39页
   5.3 酶联免疫吸附试验第39页
   5.4 免疫斑点法第39页
   5.5 其它方法第39页
  6 单克隆抗体技术的发展第39-43页
   6.1 杂交瘤技术的拓展第39-41页
   6.2 基因工程抗体的发展第41-42页
   6.3 单克隆抗体的基因工程第42-43页
 第三章 单克隆抗体在害虫综合治理研究中的应用第43-53页
  1 单克隆抗体在害虫分类和鉴定中的应用第43页
  2 单克隆抗体在害虫检疫中的应用第43-44页
  3 单克隆抗体在害虫寄生性天敌研究中的应用第44页
  4 单克隆抗体在害虫病原微生物天敌研究中的应用第44页
  5 单克隆抗体在捕食性天敌研究中的应用第44-52页
   5.1 害虫捕食性天敌种类的确定第45页
   5.2 捕食者对害虫控制作用的定量评价第45-47页
   5.3 应用免疫学方法研究捕食作用的缺点及解决途径探讨第47-52页
    5.3.1 影响捕食性天敌种类确定的因子第48-50页
    5.3.2 影响捕食作用定量研究的因子第50-52页
  6 单克隆抗体在害虫综合治理研究中的应用前景第52-53页
 第四章 本研究的目的、意义和技术路线第53-55页
  1 研究的目的和意义第53页
  2 研究内容第53-54页
  3 研究的技术路线第54-55页
第二部分 实验研究第55-139页
 第一章 基本材料与方法第56-62页
  1 材料第56-58页
   1.1 实验动物第56页
    1.1.1 褐飞虱和白背飞虱第56页
    1.1.2 弹尾虫第56页
    1.1.3 稻田蜘蛛第56页
    1.1.4 Bal b/c白鼠第56页
   1.2 用于单克隆抗体制备的材料第56-57页
   1.3 用于ELISA检测的材料第57-58页
   1.4 用于抗体类型及亚类鉴定的材料第58页
   1.5 设备与仪器第58页
  2 方法第58-61页
   2.1 抗原的准备第58-59页
   2.2 单克隆抗体的制备第59-60页
    2.2.1 免疫第59页
    2.2.2 细胞融合第59页
    2.2.3 杂交瘤细胞筛选及克隆化第59页
    2.2.4 单克隆抗体的大量生产第59页
    2.2.5 单克隆抗体的纯化第59-60页
   2.3 间接ELISA第60页
   2.4 单克隆抗体类型及亚类鉴定第60-61页
   2.5 酶标抗体的制备及定量测定第61页
  3 数据的统计分析第61-62页
 第二章 褐飞虱单克隆抗体的制备及其特性研究第62-75页
  1 材料与方法第62-66页
   1.1 材料第62-63页
    1.1.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第62-63页
    1.1.2 Western blot印迹分析第63页
   1.2 方法第63-66页
    1.2.1 单克隆抗体的制备第63页
    1.2.2 单克隆抗体的效价测定第63页
    1.2.3 单克隆抗体的特异性检测第63-64页
    1.2.4 单克隆抗体结合的目标蛋白的鉴定第64-66页
    1.2.5 猎物可测定时间的测定第66页
    1.2.6 单克隆抗体类型及亚类鉴定第66页
  2 结果与分析第66-73页
   2.1 抗原的制备第66-67页
   2.2 杂交瘤细胞株的建立第67页
   2.3 单克隆抗体的含量测定第67页
   2.4 单克隆抗体的效价测定第67-68页
   2.5 单克隆抗体的特异性检测第68-71页
   2.6 单克隆抗体结合的目标抗原蛋白检测第71页
   2.7 猎物的可测定时间检测第71-72页
   2.8 单克隆抗体的类型及亚类鉴定第72-73页
  3 讨论第73-75页
 第三章 弹尾虫单克隆抗体的制备及其特性研究第75-83页
  1 材料与方法第75-76页
   1.1 单克隆抗体的制备第75-76页
   1.2 单克隆抗体的效价测定第76页
   1.3 单克隆抗体的特异性检测第76页
   1.4 单克隆抗体的类型及亚类鉴定第76页
  2 结果与分析第76-80页
   2.1 抗原的制备第76页
   2.2 单克隆抗体的制备第76-77页
   2.3 单克隆抗体的含量测定第77页
   2.4 单克隆抗体的效价测定第77-79页
   2.5 单克隆抗体的特异性测定第79-80页
   2.6 单克隆抗体的类型和亚类鉴定第80页
  3 讨论第80-83页
 第四章 褐飞虱抗原检测最佳ELISA条件的建立第83-94页
  1 材料与方法第83-85页
   1.1 酶标抗体的制备及定量测定第83页
   1.2 ELISA最佳检测浓度的确定第83-84页
    1.2.1 直接ELISA第83-84页
    1.2.2 间接ELISA第84页
    1.2.3 夹心ELISA第84页
   1.3 捕食者浓度对检测结果的影响第84-85页
   1.4 不同ELISA检测灵敏度的比较第85页
  2 结果与分析第85-91页
   2.1 酶标抗体的制备第85页
   2.2 不同ELISA检测最适条件的确定第85-88页
    2.2.1 直接ELISA第85-86页
    2.2.2 间接ELISA第86页
    2.2.3 夹心ELISA第86-88页
   2.3 捕食者浓度对检测OD值的影响第88页
   2.4 不同ELISA检测灵敏度的比较第88-91页
  3 讨论第91-94页
 第五章 弹尾虫抗原检测最佳ELISA条件的建立第94-104页
  1 材料与方法第94-95页
   1.1 酶标抗体的制备及定量测定第94页
   1.2 不同单克隆抗体夹心ELISA最适检测条件的确定第94-95页
   1.3 捕食者浓度对间接ELISA检测结果的影响第95页
   1.4 捕食者浓度对抗体夹心ELISA检测结果的影响第95页
   1.5 不同单克隆抗体间接ELISA检测灵敏度的比较第95页
   1.6 不同单克隆抗体夹心ELISA检测灵敏度的比较第95页
  2 结果与分析第95-102页
   2.1 酶标抗体的制备第95-96页
   2.2 不同单克隆抗体夹心ELISA最适检测条件的确定第96-97页
   2.3 捕食者浓度对间接ELISA检测OD值的影响第97-99页
   2.4 捕食者浓度对抗体夹心ELISA检测OD值的影响第99页
   2.5 不同单克隆抗体间接ELISA检测灵敏度的比较第99-101页
   2.6 不同单克隆抗体夹心ELISA检测灵敏度的比较第101-102页
  3 讨论第102-104页
 第六章 影响褐飞虱抗原在捕食者肠道中降解速率的因子分析第104-113页
  1 材料与方法第104-105页
   1.1 试验设计第104页
   1.2 样品处理和ELISA试验第104-105页
   1.3 数据处理第105页
  2 结果与分析第105-111页
   2.1 抗原标准曲线的建立第105页
   2.2 猎物残留量与拟环纹豹蛛个体大小的关系第105-106页
   2.3 猎物残留量与消化时间的关系第106-107页
   2.4 猎物残留率与消化时间的关系第107-108页
   2.5 猎物可测定时间与温度的关系第108页
   2.6 猎物可测定时间与捕食量的关系第108-110页
   2.7 捕食作用定量估计方程的建立第110-111页
  3 讨论第111-113页
 第七章 应用单克隆抗体评价捕食性天敌在稻田生态系统中的作用第113-133页
  1 材料与方法第113-116页
   1.1 田间调查和取样第113-114页
   1.2 天敌样品处理第114页
   1.3 褐飞虱单克隆抗体ELISA检测第114页
   1.4 白背飞虱单克隆抗体ELISA检测第114页
   1.5 弹尾虫单克隆抗体ELISA检测第114-115页
   1.6 数据处理第115页
   1.7 捕食量估计第115-116页
  2 结果与分析第116-128页
   2.1 褐飞虱、白背飞虱、弹尾虫和稻田常见捕食者的种群动态第116-119页
    2.1.1 褐飞虱、白背飞虱和弹尾虫的田间数量动态分析第116-117页
    2.1.2 稻田常见捕食性天敌的数量动态分析第117-119页
   2.2 捕食性天敌对3种猎物的捕食作用第119-120页
    2.2.1 捕食性天敌对3种猎物单克隆抗体的阳性反应率第119-120页
    2.2.2 捕食性天敌猎物种类的分布第120页
    2.2.3 捕食性天敌的猎物残留量比较第120页
   2.3 拟环纹豹蛛对3种猎物捕食作用的动态研究第120-128页
    2.3.1 拟环纹豹蛛对褐飞虱的捕食作用第120-123页
    2.3.2 拟环纹豹蛛对白背飞虱的捕食作用第123-124页
    2.3.3 拟环纹豹蛛对弹尾虫的捕食作用第124-126页
    2.3.4 拟环纹豹蛛对3种猎物的总捕食作用第126-128页
  3 讨论第128-133页
 第八章 总讨论第133-139页
参考文献第139-156页
英文摘要第156-159页
附录一: 博士期间已发表和待发表的论文第159页

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