五指山小型猪精原干细胞体外分离与培养方法的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| ·精原干细胞的体内发育内环境、起源及精子发生 | 第10-13页 |
| ·雄性生殖细胞的体内发育内环境 | 第10-12页 |
| ·精原干细胞的起源及精子发生 | 第12-13页 |
| ·精原干细胞的特征 | 第13-15页 |
| ·精原干细胞的数量 | 第13-14页 |
| ·精原干细胞的自我更新及分化潜能 | 第14页 |
| ·精原干细胞的迁移 | 第14页 |
| ·精原干细胞的细胞周期 | 第14页 |
| ·精原干细胞具有较特异的分子标记 | 第14-15页 |
| ·精原干细胞具有较高的端粒酶活性 | 第15页 |
| ·SSCs 的分离纯化方法 | 第15-16页 |
| ·精原干细胞分离方法 | 第15页 |
| ·SSCs 的冷冻保存 | 第15-16页 |
| ·SSCs 的应用 | 第16-19页 |
| 第二章 五指山小型猪睾丸的组织学观察 | 第19-23页 |
| ·材料与方法 | 第19-20页 |
| ·试验动物 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| ·主要溶液的配制 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20页 |
| ·结果 | 第20-21页 |
| ·讨论 | 第21-23页 |
| 第三章 饲养层细胞的分离与培养 | 第23-31页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验动物及材料 | 第23页 |
| ·主要仪器及用品 | 第23-24页 |
| ·主要试剂、溶液及配制 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·STO 饲养层的制备 | 第24-25页 |
| ·PEF 的分离培养与传代 | 第25-26页 |
| ·MEF 细胞的分离纯化 | 第26页 |
| ·Sertoli 的分离培养与传代 | 第26页 |
| ·Sertoli 细胞的HE 染色 | 第26-27页 |
| ·饲养层的制备 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| ·饲养层细胞的选定 | 第29页 |
| ·猪Sertoli 细胞的分离 | 第29-30页 |
| ·饲养层的处理 | 第30-31页 |
| 第四章 猪SSCS 的分离、纯化与培养 | 第31-40页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要药品和试剂 | 第31页 |
| ·主要试剂的配制 | 第31-32页 |
| ·试验方法 | 第32-35页 |
| ·猪睾丸组织消化和睾丸细胞收集的方法与步骤 | 第32页 |
| ·SSCs 的纯化方法 | 第32-34页 |
| ·MTT 活体染色法评定细胞活力 | 第34-35页 |
| ·猪Sertoli 细胞饲养层培养SSCs | 第35页 |
| ·结果 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·猪生殖细胞但细胞悬液制备影响因素 | 第38-39页 |
| ·细胞的污染问题 | 第39页 |
| ·饲养层的比较 | 第39-40页 |
| 第五章 猪精原干细胞的鉴定 | 第40-48页 |
| ·猪SSCs 的免疫学鉴定 | 第40-41页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·SSCs 标志基因表达的RT-PCR 分析 | 第41-45页 |
| ·实验试剂 | 第41页 |
| ·实验仪器 | 第41-42页 |
| ·试验方法 | 第42-45页 |
| ·结果 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
