摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
·未培养微生物的研究概况及其发展前景 | 第13-14页 |
·未培养微生物的研究概况 | 第13-14页 |
·未培养微生物的发展前景 | 第14页 |
·宏基因组学方法在微生物研究上的应用与进展 | 第14-16页 |
·宏基因组概念的提出 | 第14-15页 |
·宏基因组学研究方法 | 第15-16页 |
·目标克隆子的筛选 | 第16页 |
·纤维素酶的研究进展 | 第16-19页 |
·纤维素的结构 | 第16-17页 |
·纤维素降解机理 | 第17-18页 |
·纤维素酶的组成 | 第18页 |
·产纤维素酶微生物研究进展 | 第18页 |
·兔盲肠微生物及纤维素分解菌 | 第18-19页 |
·β-葡萄糖苷酶简介及研究概况 | 第19-23页 |
·β-葡萄糖苷酶简介 | 第19页 |
·β-葡萄糖苷酶产生菌 | 第19页 |
·β-葡萄糖苷酶作用机理的研究 | 第19-20页 |
·β-葡萄糖苷酶酶活力的测定 | 第20页 |
·β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第20-21页 |
·β-葡萄糖苷酶基因的克隆筛选 | 第21-22页 |
·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第22-23页 |
第二章 绪论 | 第23-27页 |
·研究目的与意义 | 第23页 |
·研究内容 | 第23-25页 |
·宏基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
·兔盲肠宏基因组文库的构建 | 第24页 |
·β-葡萄糖苷酶基因的分离研究 | 第24-25页 |
·技术路线 | 第25-27页 |
第三章 兔盲肠宏基因组DNA提取方法的优化 | 第27-35页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·材料 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-31页 |
·结果与分析 | 第31-33页 |
·酚氯仿提取法抽提宏基因组DNA | 第31-32页 |
·基因组提取试剂盒提取宏基因组DNA | 第32页 |
·PVPP-电洗脱提取抽提宏基因组DNA | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第四章 兔盲肠宏基因组DNA shotgun文库的构建 | 第35-45页 |
·材料、试剂和设备 | 第35-36页 |
·宏基因组DNA与载体质粒 | 第35页 |
·其它材料及试剂 | 第35-36页 |
·培养条件 | 第36页 |
·主要设备 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-40页 |
·宏基因组DNA的部分消化酶切 | 第36-37页 |
·酶切片段回收 | 第37页 |
·pUC118载体制备 | 第37-39页 |
·构建宏基因组DNA文库 | 第39页 |
·文库分析 | 第39页 |
·文库的保存 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-42页 |
·宏基因组DNA的部分消化酶切及回收 | 第40页 |
·pUC118质粒载体的构建 | 第40-41页 |
·宏基因组DNA shotgun文库构建 | 第41页 |
·文库分析 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
第五章 β-葡萄糖苷酶基因的分离及其酶学性质分析 | 第45-67页 |
·材料、试剂及设备 | 第45-48页 |
·文库、菌种与质粒 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45-48页 |
·培养基的配制 | 第48页 |
·主要仪器设备 | 第48页 |
·分析软件 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-51页 |
·β-葡萄糖苷酶基因阳性克隆的筛选 | 第48页 |
·β-葡萄糖苷酶基因阳性克隆的测序 | 第48页 |
·β-葡萄糖苷酶酶活力的测定 | 第48-49页 |
·葡萄糖标准曲线的绘制 | 第49页 |
·不同条件影响β-葡萄糖苷酶酶活力测定 | 第49-51页 |
·结果与分析 | 第51-63页 |
·β-葡萄糖苷酶基因阳性克隆的筛选 | 第51-53页 |
·β-葡萄糖苷酶阳性克隆测序分析 | 第53页 |
·β-葡萄糖苷酶基因编码蛋白质分析 | 第53-57页 |
·绘制葡萄糖标准曲线 | 第57-58页 |
·β-葡萄糖苷酶酶活力性质分析 | 第58-63页 |
·讨论 | 第63-67页 |
第六章 总结与展望 | 第67-71页 |
·兔盲肠内容物中宏基因组DNA文库的构建 | 第67-68页 |
·β-葡萄糖苷酶分离研究 | 第68-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
致谢 | 第77-78页 |