| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| ·漆酶 | 第11页 |
| ·能分泌漆酶的生物类群 | 第11页 |
| ·漆酶的结构 | 第11-12页 |
| ·漆酶的功能 | 第12-15页 |
| ·植物漆酶的功能 | 第12-13页 |
| ·真菌漆酶的功能 | 第13-15页 |
| ·漆酶与真菌毒力相关 | 第14页 |
| ·漆酶与真菌产黑色素有关 | 第14-15页 |
| ·漆酶的应用 | 第15-16页 |
| ·漆酶基因的分子生物学研究 | 第16-17页 |
| ·漆酶基因的克隆 | 第16页 |
| ·漆酶基因结构和组织分析 | 第16-17页 |
| ·漆酶基因的异源表达 | 第17页 |
| ·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第17-18页 |
| ·漆酶可能与稻瘟病侵染过程有关 | 第18-19页 |
| ·国内外对稻瘟病菌漆酶研究的现状 | 第19页 |
| ·稻瘟病菌功能基因组学的主要研究方法 | 第19-20页 |
| ·生物信息学研究 | 第20-21页 |
| ·同源检索 | 第20页 |
| ·结构域的预测 | 第20-21页 |
| ·信号肽的预测 | 第21页 |
| ·亚细胞定位 | 第21页 |
| ·EST(Expressed Sequence Tag)表达序列标签 | 第21页 |
| ·基于分子遗传和生物信息结合的基因功能研究 | 第21-22页 |
| ·研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2.材料与方法 | 第23-36页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·供试菌株 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·生化试剂 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-34页 |
| ·蛋白序列同源性搜索比较及其系统演化关系分析 | 第23-24页 |
| ·基因敲除载体的构建 | 第24-26页 |
| ·Mgg_00551.5敲除载体的构建 | 第25-26页 |
| ·Mgg_02876.5敲除载体的构建 | 第26页 |
| ·DNA片段的PCR扩增 | 第26-28页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第28页 |
| ·质粒酶切与连接 | 第28-29页 |
| ·质粒的双酶切 | 第28-29页 |
| ·酶切片段的去磷酸化(CIP)处理 | 第29页 |
| ·DNA片段的胶回收 | 第29页 |
| ·DNA片段的连接 | 第29页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第30页 |
| ·稻瘟病菌原生质体的制备 | 第30-31页 |
| ·稻瘟病菌原生质体转化 | 第31页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·总RNA提取及检测 | 第32-33页 |
| ·反转录 | 第33-34页 |
| ·稻瘟病菌的表型观察 | 第34-36页 |
| ·漆酶活性的检测 | 第34-35页 |
| ·生长速率测定 | 第35页 |
| ·产孢量测定 | 第35页 |
| ·附着胞形成率及洋葱表皮侵入实验 | 第35页 |
| ·植物致病性的测定 | 第35页 |
| ·交配能力鉴定 | 第35-36页 |
| 3.结果与分析 | 第36-50页 |
| ·稻瘟病菌基因组漆酶蛋白比对结果及结构域分析 | 第36-38页 |
| ·Mgg_00551.5基因的系统发育分析 | 第38-40页 |
| ·Mgg_00551.5基因功能缺失突变体的获得 | 第40-42页 |
| ·Mgg_00551.5基因缺失突变体表型分析 | 第42-45页 |
| ·Mgg_00551.5基因缺失突变体漆酶活性的测定 | 第42页 |
| ·Mgg_00551.5基因缺失对稻瘟病菌营养生长的影响 | 第42-43页 |
| ·Mgg_00551.5基因缺失对稻瘟病菌产胞能力的影响 | 第43-44页 |
| ·Mgg_00551.5基因缺失对稻瘟病菌附着胞的形成和发育的影响 | 第44-45页 |
| ·Mgg_00551.5基因缺失对稻瘟病菌致病性的影响 | 第45页 |
| ·Mgg_0551.5功能缺失对稻瘟病菌交配能力的影响 | 第45页 |
| ·Mgg_02876.5基因功能缺失突变体的获得 | 第45-47页 |
| ·Mgg_02876.5基因功能缺失突变体表型分析 | 第47-50页 |
| ·Mgg_02876.5基因缺失突变体的漆酶活性检测 | 第47页 |
| ·Mgg_02876.5基因缺失对稻瘟病菌营养生长的影响 | 第47-48页 |
| ·Mgg_02876.5基因缺失对稻瘟病菌产孢能力的影响 | 第48页 |
| ·Mgg_02876.5基因缺失对稻瘟病菌附着胞的形成和发育的影响 | 第48页 |
| ·Mgg_02876.5基因缺失对稻瘟病菌致病性的影响 | 第48-49页 |
| ·Mgg_2876.5基因缺失对稻瘟病菌交配能力的影响 | 第49-50页 |
| 4.讨论与小结 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
