| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-19页 |
| 前言 | 第19-24页 |
| 第一章 RalB在多种哺乳动物细胞和肝癌组织中的表达情况 | 第24-46页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·细胞 | 第25页 |
| ·培养基和溶液 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·技术路线 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-33页 |
| ·肝癌及其他肿瘤细胞的培养 | 第27-28页 |
| ·Western-blot鉴定RalB的表达 | 第28-29页 |
| ·免疫组化鉴定RalB的表达 | 第29-30页 |
| ·免疫细胞化学鉴定RalB的定位 | 第30页 |
| ·肝细胞器分离鉴定RalB的定位 | 第30-32页 |
| ·统计方法 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-41页 |
| ·RalB在肝癌细胞中的表达 | 第33-35页 |
| ·RalB在多种肿瘤细胞中的表达 | 第35-37页 |
| ·RalB在肝癌组织的定位 | 第37-39页 |
| ·RalB在肝癌细胞中的定位 | 第39-40页 |
| ·RalB在肝脏细胞器中的定位 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| ·参考文献 | 第44-46页 |
| 第二章 RalB真核表达载体的构建和鉴定,RalB稳定转染细胞系的构建和鉴定 | 第46-72页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46-49页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·质粒、菌株、细胞和引物 | 第47页 |
| ·培养基和溶液 | 第47-48页 |
| ·主要仪器设备 | 第48-49页 |
| ·技术路线 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-59页 |
| ·RalB基因的克隆 | 第50-54页 |
| ·pcDNA3.1(-)和pDsRed-C3/RalB真核表达载体的构建 | 第54-56页 |
| ·RalB导入肝癌细胞 | 第56-57页 |
| ·稳定转染细胞系的筛选培养 | 第57页 |
| ·稳定转染细胞系的鉴定 | 第57-58页 |
| ·统计方法 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-68页 |
| ·RalB目的基因的PCR产物鉴定 | 第59页 |
| ·pcDNA3.1(-)/RalB真核表达载体的构建 | 第59-62页 |
| ·RalB稳定表达株的鉴定 | 第62-67页 |
| ·pDsRed_1-C_3/RalB在293T和肾癌786-0细胞中的定位 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| ·参考文献 | 第71-72页 |
| 第三章 高表达RalB对肝癌细胞SMMC7721生长活动的影响 | 第72-94页 |
| ·引言 | 第72页 |
| ·试验材料 | 第72-74页 |
| ·主要试剂 | 第72-73页 |
| ·细胞 | 第73页 |
| ·培养基和溶液 | 第73页 |
| ·主要仪器设备 | 第73-74页 |
| ·技术路线 | 第74-75页 |
| ·实验方法 | 第75-79页 |
| ·MTT法鉴定转染RalB细胞的增殖情况 | 第75页 |
| ·高表达RalB对细胞周期蛋白的影响 | 第75-77页 |
| ·饥饿实验对RalB表达的影响 | 第77页 |
| ·高表达RalB对于凋亡的影响 | 第77-78页 |
| ·高表达RalB对于SMMC7721细胞侵袭转移的影响 | 第78页 |
| ·统计方法 | 第78-79页 |
| ·结果 | 第79-89页 |
| ·高表达RalB对肝癌细胞增殖的影响 | 第79-80页 |
| ·高表达RalB对周期蛋白mRNA水平的影响 | 第80-82页 |
| ·RalB在饥饿实验中的表达 | 第82-84页 |
| ·高表达RalB能抵抗饥饿诱导的凋亡 | 第84-88页 |
| ·高表达RalB促进SMMC7721细胞的侵袭转移 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| ·参考文献 | 第93-94页 |
| 第四章 高表达RalB促进NF-kB转录活性促进肝癌细胞的侵袭和转移 | 第94-111页 |
| ·前言 | 第94页 |
| ·实验材料 | 第94-99页 |
| ·主要试剂 | 第94-95页 |
| ·细胞 | 第95页 |
| ·溶液 | 第95-98页 |
| ·主要仪器设备 | 第98-99页 |
| ·技术路线 | 第99页 |
| ·实验方法 | 第99-103页 |
| ·转染细胞核蛋白的提取 | 第99-100页 |
| ·凝胶迁移实验 | 第100-101页 |
| ·高表达RalB对于MMP2的影响 | 第101-102页 |
| ·统计方法 | 第102-103页 |
| ·结果 | 第103-106页 |
| ·高表达RalB与NF-κB转录活性的活化 | 第103-104页 |
| ·高表达RalB对于MMP2 mRNA水平的影响 | 第104-106页 |
| ·讨论 | 第106-108页 |
| ·小结 | 第108-109页 |
| ·参考文献 | 第109-111页 |
| 第五章 STARD7在肝癌细胞中的表达及在肝癌组织中的定位 | 第111-128页 |
| ·引言 | 第111页 |
| ·实验材料 | 第111-113页 |
| ·主要试剂 | 第111-112页 |
| ·细胞 | 第112页 |
| ·培养基和溶液 | 第112页 |
| ·主要仪器设备 | 第112-113页 |
| ·技术路线 | 第113页 |
| ·实验方法 | 第113-115页 |
| ·肝癌细胞的培养 | 第113页 |
| ·Western-blot鉴定STARD7的表达 | 第113页 |
| ·免疫组化鉴定STARD7的表达 | 第113页 |
| ·免疫细胞化学和激光共聚焦技术鉴定STARD7的定位 | 第113-114页 |
| ·数据处理及统计方法 | 第114-115页 |
| ·结果 | 第115-125页 |
| ·STARD7在肝癌细胞中的表达 | 第115-117页 |
| ·STARD7在肝癌组织的中的定位 | 第117-119页 |
| ·STARD7在哺乳动物细胞中的定位 | 第119-125页 |
| ·讨论 | 第125-126页 |
| ·小结 | 第126-127页 |
| ·参考文献 | 第127-128页 |
| 第六章 STARD7真核表达载体的构建和鉴定,STARD7稳定转染细胞系的构建和鉴定以及高表达STARD7对肝癌细胞HepG2生长状况的影响 | 第128-152页 |
| ·引言 | 第128页 |
| ·实验材料 | 第128-131页 |
| ·主要试剂 | 第128-129页 |
| ·细胞、菌株、质粒和引物 | 第129-130页 |
| ·培养基和溶液 | 第130页 |
| ·主要仪器设备 | 第130-131页 |
| ·技术路线 | 第131-132页 |
| ·实验方法 | 第132-137页 |
| ·STARD7基因的克隆 | 第132-133页 |
| ·pcDNA3.1(-)和pDsRed-C3/STARD7真核表达载体的构建 | 第133-134页 |
| ·STARD7导入肝癌细胞HepG2 | 第134-135页 |
| ·稳定转染细胞系的筛选培养 | 第135页 |
| ·稳定转染细胞系的鉴定 | 第135页 |
| ·MTT法测定转染细胞的增殖情况并绘制细胞生长曲线 | 第135页 |
| ·统计方法 | 第135-137页 |
| ·结果 | 第137-146页 |
| ·STARD7目的基因的PCR产物鉴定 | 第137页 |
| ·pcDNA3.1(-)/STARD7真核表达载体的构建 | 第137-140页 |
| ·STARD7稳定表达株的鉴定 | 第140-145页 |
| ·pDsRed1-C3/STARD7在肾癌786-0细胞中的定位 | 第145页 |
| ·高表达STARD7对肝癌细胞增殖的影响结果 | 第145-146页 |
| ·讨论 | 第146-150页 |
| ·小结 | 第150-151页 |
| ·参考文献 | 第151-152页 |
| 全文小结 | 第152-154页 |
| 英文缩略词表 | 第154-156页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第156-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
