摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-20页 |
·立题背景 | 第10-11页 |
·乳杆菌的形态学特征及应用 | 第11页 |
·乳酸菌的传统鉴定方法 | 第11-12页 |
·乳酸菌的分子生物学鉴定方法 | 第12-18页 |
·16S rDNA/rRNA 序列分析 | 第12-13页 |
·变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第13-16页 |
·扩增片段长度多态性(AFLP) | 第16-18页 |
·本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
·研究目的 | 第18页 |
·研究意义 | 第18-19页 |
·本研究拟采取的技术路线 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-35页 |
·材料与设备 | 第20-24页 |
·供试菌株 | 第20页 |
·主要试剂及来源 | 第20-21页 |
·工具酶及试剂盒 | 第21页 |
·主要溶剂配置 | 第21-23页 |
·仪器与设备 | 第23-24页 |
·试验方法 | 第24-35页 |
·样品的采集 | 第24页 |
·菌株的分离与纯化 | 第24页 |
·分离菌株的生理生化试验 | 第24页 |
·分离菌株的糖发酵试验 | 第24-25页 |
·分离菌株的16S rDNA 序列同源性分析 | 第25-27页 |
·分离菌株标准指纹图谱的构建 | 第27-29页 |
·分离菌株遗传多态性的初步研究 | 第29-35页 |
3 结果与分析 | 第35-53页 |
·样品信息及菌株的分离情况 | 第35页 |
·形态学特征及生理生化鉴定 | 第35-41页 |
·分离菌株的形态学特征 | 第35-38页 |
·分离菌株的生理生化及糖发酵鉴定结果 | 第38-41页 |
·菌株基因组DNA 的提取 | 第41-42页 |
·分离菌株16S rDNA 序列同源性分析 | 第42-44页 |
·16S rDNA-PCR 扩增 | 第42页 |
·同源性分析及各菌株的GenBank 序列注册号 | 第42-44页 |
·标准指纹图谱的构建 | 第44-46页 |
·DGGE-PCR 扩增 | 第44-45页 |
·建立DGGE 标准指纹图谱 | 第45-46页 |
·遗传多态性的初步研究 | 第46-53页 |
·菌株基因组DNA 的酶切 | 第46页 |
·接头连接及预扩增 | 第46-47页 |
·选择性扩增引物的筛选 | 第47页 |
·选择性扩增 | 第47页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第47-48页 |
·多态性分析 | 第48-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
·传统鉴定方法的局限性 | 第53页 |
·16S rDNA 序列同源性分析方法对乳杆菌的鉴定 | 第53-54页 |
·DGGE 方法中各条件的确定 | 第54-55页 |
·PCR 扩增 | 第54页 |
·凝胶和变性剂梯度的确定 | 第54页 |
·电泳温度及时间的确定 | 第54-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第61页 |