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健康人粪便乳杆菌的分离、鉴定及遗传多态性的初步研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 前言第10-20页
   ·立题背景第10-11页
   ·乳杆菌的形态学特征及应用第11页
   ·乳酸菌的传统鉴定方法第11-12页
   ·乳酸菌的分子生物学鉴定方法第12-18页
     ·16S rDNA/rRNA 序列分析第12-13页
     ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)第13-16页
     ·扩增片段长度多态性(AFLP)第16-18页
   ·本研究的目的与意义第18-19页
     ·研究目的第18页
     ·研究意义第18-19页
   ·本研究拟采取的技术路线第19-20页
2 材料与方法第20-35页
   ·材料与设备第20-24页
     ·供试菌株第20页
     ·主要试剂及来源第20-21页
     ·工具酶及试剂盒第21页
     ·主要溶剂配置第21-23页
     ·仪器与设备第23-24页
   ·试验方法第24-35页
     ·样品的采集第24页
     ·菌株的分离与纯化第24页
     ·分离菌株的生理生化试验第24页
     ·分离菌株的糖发酵试验第24-25页
     ·分离菌株的16S rDNA 序列同源性分析第25-27页
     ·分离菌株标准指纹图谱的构建第27-29页
     ·分离菌株遗传多态性的初步研究第29-35页
3 结果与分析第35-53页
   ·样品信息及菌株的分离情况第35页
   ·形态学特征及生理生化鉴定第35-41页
     ·分离菌株的形态学特征第35-38页
     ·分离菌株的生理生化及糖发酵鉴定结果第38-41页
   ·菌株基因组DNA 的提取第41-42页
   ·分离菌株16S rDNA 序列同源性分析第42-44页
     ·16S rDNA-PCR 扩增第42页
     ·同源性分析及各菌株的GenBank 序列注册号第42-44页
   ·标准指纹图谱的构建第44-46页
     ·DGGE-PCR 扩增第44-45页
     ·建立DGGE 标准指纹图谱第45-46页
   ·遗传多态性的初步研究第46-53页
     ·菌株基因组DNA 的酶切第46页
     ·接头连接及预扩增第46-47页
     ·选择性扩增引物的筛选第47页
     ·选择性扩增第47页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳结果第47-48页
     ·多态性分析第48-53页
4 讨论第53-55页
   ·传统鉴定方法的局限性第53页
   ·16S rDNA 序列同源性分析方法对乳杆菌的鉴定第53-54页
   ·DGGE 方法中各条件的确定第54-55页
     ·PCR 扩增第54页
     ·凝胶和变性剂梯度的确定第54页
     ·电泳温度及时间的确定第54-55页
5 结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-61页
攻读学位期间发表的学术论文第61页

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