| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 缩略表 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-27页 |
| 一 胁迫引起的细胞内代谢物质的变化 | 第11-15页 |
| 1 LEA蛋白 | 第11-13页 |
| 2 氨基酸代谢 | 第13-14页 |
| 3 ROS | 第14页 |
| 4 胺 | 第14-15页 |
| 5 海藻糖 | 第15页 |
| 二 植物抗水分胁迫的信号转导途径 | 第15-26页 |
| 1 植物感受胁迫信号的感受器 | 第16-17页 |
| 2 参与水分胁迫的第二信使 | 第17-18页 |
| 3 胁迫诱导的转录因子 | 第18-26页 |
| ·不依赖于ABA的信号途径中胁迫基因的表达 | 第20-23页 |
| ·依赖于ABA的信号途径中胁迫基因的表达 | 第23-25页 |
| ·DREB调节因子和其他调节因子之间存在信号交叉 | 第25-26页 |
| 本论文的选题依据和意义 | 第26-27页 |
| 第二部分 实验材料和方法 | 第27-38页 |
| 一 实验材料 | 第27页 |
| 1 植物材料 | 第27页 |
| 2 菌种和质粒 | 第27页 |
| 3 引物、测序 | 第27页 |
| 二 实验试剂 | 第27-30页 |
| 1 常用的分子生物学试剂 | 第27-28页 |
| 2 常用培养基 | 第28-30页 |
| ·LB培养基配方 | 第28页 |
| ·1/2 MS培养基配方 | 第28页 |
| ·含mannitol的1/2 MS培养基配方 | 第28-29页 |
| ·Phytagel琼脂培养基的配方 | 第29页 |
| ·B5营养液配方 | 第29页 |
| ·气孔观察缓冲液 | 第29-30页 |
| 三 实验方法 | 第30-38页 |
| 1 植物的培养 | 第30页 |
| 2 基因芯片材料 | 第30页 |
| 3 干旱和mannitol胁迫处理方法 | 第30-31页 |
| ·干旱处理方法 | 第30页 |
| ·营养土里培养的材料用mannitol进行胁迫处理 | 第30-31页 |
| 4 生理指标分析 | 第31-32页 |
| ·失水速率的测定 | 第31页 |
| ·气孔的观察与气孔孔径大小的测定 | 第31页 |
| ·便携式光合仪测定蒸腾速率、气孔导度及光合作用速率 | 第31页 |
| ·叶片水势测定 | 第31-32页 |
| ·培养皿上的材料用mannitol进行胁迫处理 | 第32页 |
| ·phytagel琼脂无菌培养 | 第32页 |
| 5 DREB2A、RD29A、COR47和STZ基因的RT-PCR分析 | 第32-38页 |
| ·总RNA提取(Trizol法) | 第32页 |
| ·RNA的紫外分光分析 | 第32-33页 |
| ·RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·RT-PCR扩增目的片断 | 第33-34页 |
| ·切胶回收PCR产物 | 第34页 |
| ·连接T载体 | 第34-35页 |
| ·电击感受态细菌的制备 | 第35页 |
| ·电击转化及蓝白斑筛选 | 第35页 |
| ·碱法提质粒 | 第35-36页 |
| ·酶切检测体系 | 第36-37页 |
| ·检测基因表达差异时材料的处理 | 第37页 |
| ·RT-PCR扩增检测基因表达差异 | 第37-38页 |
| 第三部分 实验结果与讨论 | 第38-70页 |
| 一 基因芯片数据及分析 | 第38-55页 |
| 1 物质代谢相关基因发生明显变化 | 第38-43页 |
| 2 光合作用相关酶基因下调 | 第43-44页 |
| 3 相关功能蛋白基因上调 | 第44-49页 |
| ·膜保护系统基因纷纷上调 | 第47页 |
| ·产生可溶性高亲水产物的酶系统上调 | 第47-48页 |
| ·毒性清除相关基因上调 | 第48-49页 |
| 4 相关调节蛋白上调表达 | 第49-55页 |
| ·钙调素蛋白基因上调 | 第51页 |
| ·蛋白激酶增高表达 | 第51页 |
| ·转录因子明显的增高表达 | 第51-55页 |
| 二 t387突变体的抗旱机理分析 | 第55-62页 |
| 1 t387突变体有较强的抵御干旱的能力 | 第55-57页 |
| ·t387突变体抗旱能力强 | 第55页 |
| ·t387突变体抵御甘露醇胁迫能力强 | 第55-57页 |
| 2 生理指标的检测分析 | 第57-62页 |
| ·t387突变体失水速率较野生型快 | 第57-58页 |
| ·t387突变体气孔孔径比野生型大 | 第58-59页 |
| ·t387突变体气孔导度大、蒸腾速率快、光合作用速率低 | 第59页 |
| ·t387突变体叶片水势 #5l | 第59-60页 |
| ·t387突变体更耐受渗透胁迫 | 第60-61页 |
| ·t387突变体侧根发达 | 第61-62页 |
| 三 DREB2A、COR47、RD29A和STZ基因的RT-PCR分析 | 第62-66页 |
| 1 拟南芥总RNA检测 | 第62-63页 |
| 2 扩增DREB2A、COR47、RD29A和STZ基因 | 第63-64页 |
| 3 差异结果分析 | 第64-66页 |
| 讨论 | 第66-70页 |
| 第四部分 小结和展望 | 第70页 |
| 一 小结 | 第70页 |
| 二 展望 | 第70页 |
| 在读期间发表文章情况 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
