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LIM蛋白FHL1C对急性T淋巴细胞白血病的作用和机制研究

缩略语表第1-9页
中文摘要第9-12页
Abstract第12-16页
前言第16-18页
文献回顾第18-32页
第一部分 FHL1C 真核表达载体和慢病毒表达载体构建及验证第32-43页
 1 实验材料第32-34页
   ·材料、质粒、细胞系和细菌品系第32页
   ·常用分子生物学试剂第32-33页
   ·常用缓冲液试剂第33页
   ·主要仪器第33-34页
 2 实验方法第34-36页
   ·RNA 提取和RT-PCR第34页
   ·分子克隆第34-35页
   ·细胞培养第35页
   ·真核表达载体构建及转染第35页
   ·病毒表达载体构建及转染第35-36页
   ·流式细胞检测第36页
   ·Western blot第36页
 3 实验结果第36-42页
   ·FHL1C 基因克隆,载体成功构建第36-39页
   ·真核表达载体pCMV-myc-FHL1C 的构建及验证第39-40页
   ·慢病毒表达载体pLenti6/V5-FHL1C-IRES-GFP 构建及验证第40-42页
 4 讨论第42-43页
第二部分 过表达FHL1C 对于JURKAT 细胞(急性T 淋巴白血病细胞)的生物学特征的影响第43-56页
 1 实验材料第43-45页
   ·材料、质粒、细胞系和细菌品系第43页
   ·常用分子生物学试剂第43-44页
   ·主要缓冲液和试剂第44页
   ·主要仪器第44-45页
 2 实验方法第45-48页
   ·真核表达载体构建第45页
   ·细胞培养第45页
   ·Amaxa 核酸转染第45页
   ·Western Blot第45-46页
   ·细胞生长曲线绘制第46页
   ·细胞周期第46-47页
   ·Hoechst 染色第47页
   ·透射电镜第47-48页
   ·AnnexinV/ PI 凋亡检测第48页
 3 实验结果第48-54页
   ·pEGFP-C1-FHL1C 真核表达载体构建第48-49页
   ·过表达FHL1C 的Jurkat 细胞绝对数明显减少第49-50页
   ·过表达FHL1C 的Jurkat 细胞增殖无异常第50-51页
   ·过表达FHL1C 的Jurkat 细胞凋亡增多第51-54页
 4. 讨论第54-56页
第三部分 FHL1C抑制NOTCH信号诱导T-ALL细胞凋亡的分子机制初步探讨第56-66页
 1 实验材料第56-58页
   ·材料、质粒、细胞系、细菌品系第56页
   ·常用分子生物学试剂第56-57页
   ·常用缓冲液试剂第57页
   ·主要仪器第57页
   ·实时定量PCR 引物序列第57-58页
 2 实验方法第58-60页
   ·细胞培养及转染第58页
   ·双荧光素酶报告基因第58-59页
   ·Amaxa 核酸转染第59页
   ·流式细胞分选第59页
   ·RNA 提取和 RT-PCR第59页
   ·Real-time PCR第59-60页
   ·Western blot第60页
 3 实验结果第60-64页
   ·过表达FHL1C 抑制RBP-J 介导Notch 信号途径的转录第60-61页
   ·过表达FHL1C 的Jurkat 细胞中 Notch 下游基因表达下调第61-62页
   ·过表达FHL1C 的Jurkat 细胞中凋亡分子表达上调,抗凋亡分子表达下调第62-64页
 4 讨论第64-66页
小结第66-67页
参考文献第67-76页
个人简历和研究成果第76-77页
致谢第77页

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