摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-33页 |
·概述 | 第19页 |
·蛋白质组学研究的历史背景 | 第19-22页 |
·蛋白质组学发展历程 | 第19-20页 |
·蛋白质组学研究的特点与难点 | 第20-21页 |
·蛋白质组学主要的研究方法 | 第21-22页 |
·蛋白质组学的研究策略 | 第22页 |
·蛋白质组学的应用 | 第22页 |
·昆虫蛋白质组学研究 | 第22-26页 |
·果蝇蛋白质组学研究 | 第23-24页 |
·蚊子蛋白质组学研究 | 第24-25页 |
·其他昆虫蛋白质组学研究 | 第25-26页 |
·家蚕蛋白质组学研究进展 | 第26-33页 |
·家蚕丝腺蛋白质组学研究进展 | 第26-28页 |
·家蚕胚胎蛋白质组学研究进展 | 第28-30页 |
·雌性生殖腺附属物蛋白质组研究进展 | 第30-31页 |
·家蚕血液蛋白质组学研究进展 | 第31-33页 |
第二章 引言 | 第33-37页 |
·家蚕基因组计划和课题的推进 | 第33页 |
·蛋白质组学技术在家蚕功能基因组研究中的重要意义 | 第33-34页 |
·家蚕蛋白质组研究对鳞翅目害虫防治的重要意义 | 第34页 |
·家蚕蛋白质组学对产业发展的重要意义 | 第34页 |
·主要研究内容和技术路线 | 第34-37页 |
·家蚕蛋白质组学研究平台的建立 | 第34-35页 |
·利用家蚕蛋白质组学研究平台对家蚕丝腺等组织的分析研究 | 第35页 |
·利用比较蛋白质组学手段对家蚕发育、免疫等重要生理反应进行研究 | 第35-37页 |
第三章 家蚕蛋白质组学关键技术和研究方法的建立 | 第37-57页 |
·材料与方法 | 第37-47页 |
·材料 | 第37页 |
·实验试剂和仪器 | 第37-41页 |
·实验购买的主要试剂 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37-38页 |
·配制试剂 | 第38-41页 |
·试验方法 | 第41-47页 |
·双向电泳的组织样品预处理 | 第41-42页 |
·等点聚焦电泳 | 第42-43页 |
·胶条平衡方案 | 第43-44页 |
·IPG胶条的转移和SDS-PAGE电泳 | 第44页 |
·蛋白质染色方案 | 第44页 |
·图象扫描与软件分析 | 第44-45页 |
·胶内取点与酶切 | 第45-46页 |
·MALDI-TOF MS上样处理 | 第46页 |
·MS数据库的构建与蛋白点鉴定 | 第46-47页 |
·结果与分析 | 第47-55页 |
·双向电泳条件的优化 | 第47-52页 |
·不同样品处理方法对双向电泳结果的影响 | 第48页 |
·不同聚焦条件对双向电泳结果的影响 | 第48-49页 |
·不同蛋白质染色方法的比较 | 第49-50页 |
·IPGphor和Multiphor仪器的双向电泳结果比较 | 第50-51页 |
·双向电泳中常见问题分析 | 第51-52页 |
·胶内酶切和MALDI-TOF MS分析 | 第52页 |
·本地MS数据库的构建与分析 | 第52-55页 |
·已知蛋白在本地检索与在线检索的比较分析 | 第52-54页 |
·未知蛋白在本地检索与在线检索的比较分析 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
·影响家蚕样品双向电泳质量的关键因素 | 第55页 |
·凝胶挖点方法比较 | 第55页 |
·适合于家蚕蛋白质鉴定的MALDI-TOF MS分析方法 | 第55-56页 |
·家蚕蛋白质组数据库检索和蛋白质鉴定 | 第56-57页 |
第四章 家蚕丝腺蛋白质组学研究 | 第57-77页 |
·材料与方法 | 第58-60页 |
·材料 | 第58页 |
·实验试剂和仪器 | 第58页 |
·试验方法 | 第58-60页 |
·样品处理 | 第58页 |
·等电聚焦电泳 | 第58页 |
·胶条平衡 | 第58页 |
·大胶的制备和SDS-PAGE电泳 | 第58-59页 |
·丝腺双向电泳图谱的染色 | 第59页 |
·中部丝腺和后部丝腺比较分析 | 第59页 |
·丝腺蛋白点胶内取点与酶切 | 第59页 |
·MALDI-TOF MS对蛋白点的分析 | 第59页 |
·MALDI-TOF MS PSD分析 | 第59页 |
·丝腺蛋白点的肽质量指纹图谱检索 | 第59-60页 |
·结果与分析 | 第60-73页 |
·家蚕丝腺蛋白的双向电泳结果 | 第60-61页 |
·后部丝腺蛋白质鉴定 | 第61-66页 |
·中部丝腺与后部丝腺比较蛋白质组分析 | 第66-68页 |
·中部丝腺与后部丝腺差异蛋白点的鉴定 | 第68-69页 |
·中部丝腺和后部丝腺差异蛋白点1和3肽质量指纹图谱分析 | 第69-70页 |
·MALDI-TOF PSD对家蚕蛋白点的鉴定分析 | 第70-71页 |
·差异蛋白点1和差异蛋白点3的序列结构和组织表达分析 | 第71-73页 |
·差异蛋白点1家蚕同源体序列分析 | 第71-72页 |
·Bm_serpin蛋白在cDNA水平上各组织间的表达差异分析 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-77页 |
·家蚕丝腺蛋白点的鉴定 | 第73-75页 |
·丝素蛋白的鉴定 | 第73页 |
·热激蛋白和分子伴侣相关蛋白 | 第73-74页 |
·与DNA复制、转录和翻译相关的蛋白质 | 第74页 |
·蛋白酶类 | 第74-75页 |
·其他蛋白 | 第75页 |
·家蚕中部丝腺和后部丝腺比较蛋白质组学研究 | 第75-77页 |
第五章 家蚕血液蛋白质组学研究 | 第77-101页 |
·材料与方法 | 第78-79页 |
·材料 | 第78页 |
·实验试剂和仪器 | 第78页 |
·试验方法 | 第78-79页 |
·样品处理 | 第78页 |
·等电聚焦电泳 | 第78页 |
·胶条平衡 | 第78页 |
·SDS-PAGE电泳分析 | 第78页 |
·丝腺双向电泳图谱的染色 | 第78页 |
·家蚕血液双向电泳图谱分析 | 第78-79页 |
·家蚕血液中蛋白点胶内取点与酶切 | 第79页 |
·MALDI-TOF MS对蛋白点的分析 | 第79页 |
·血液蛋白点肽质量指纹图谱的检索及数据分析 | 第79页 |
·结果与分析 | 第79-96页 |
·家蚕血液蛋白随发育时期变化的SDS-PAGE电泳 | 第79-81页 |
·家蚕不同发育变态阶段血液蛋白双向电泳图 | 第81-82页 |
·家蚕不同发育变态阶段差异蛋白点鉴定分析 | 第82-88页 |
·Apolipoprotein D homolog分析 | 第84-85页 |
·Apolipophorin III蛋白 | 第85-86页 |
·Diapanse bioclock protein分析 | 第86-87页 |
·Chymotrypsin inhibitors 8 和Aldo reductase homolog | 第87-88页 |
·家蚕不同种类30K蛋白的鉴定 | 第88-91页 |
·家蚕5龄第3天主要蛋白点鉴定 | 第91-95页 |
·家蚕免疫后血液蛋白分析 | 第95-96页 |
·讨论 | 第96-101页 |
·发育变态时期血液中一些差异表达蛋白的功能预测 | 第96-97页 |
·家蚕血液30K蛋白鉴定 | 第97-98页 |
·家蚕5龄第3天蛋白点鉴定 | 第98页 |
·家蚕免疫反应相关蛋白 | 第98-101页 |
第六章 家蚕脂肪体蛋白质组学研究 | 第101-115页 |
·材料与方法 | 第101-103页 |
·材料 | 第101-102页 |
·实验试剂和仪器 | 第102页 |
·蛋白质的抽提 | 第102页 |
·脂肪体组织双向电泳分析 | 第102页 |
·DIGE实验分析 | 第102页 |
·2D图谱分析 | 第102页 |
·蛋白点的胶内消化 | 第102-103页 |
·蛋白质质谱分析 | 第103页 |
·蛋白质肽质量指纹图谱的检索 | 第103页 |
·结果与分析 | 第103-109页 |
·家蚕5龄第5天脂肪体双向凝胶电泳图谱 | 第103-104页 |
·脂肪体蛋白质MALDI-TOF MS质谱分析 | 第104-106页 |
·家蚕化蛹前后脂肪体蛋白质组学比较 | 第106-108页 |
·利用蛋白荧光差异显示的方法研究家蚕变态期的脂肪体 | 第108-109页 |
·讨论 | 第109-115页 |
·家蚕5龄第5天脂肪体蛋白质鉴定分析 | 第109-110页 |
·家蚕化蛹前后差异蛋白鉴定分析 | 第110-115页 |
第七章 家蚕中肠、精巢、胚胎蛋白质组学研究初探 | 第115-125页 |
·材料与方法 | 第115-117页 |
·材料 | 第115-116页 |
·实验试剂和仪器 | 第116页 |
·样品组织蛋白质的抽提 | 第116页 |
·中肠、精巢组织双向电泳分析 | 第116页 |
·家蚕各时期卵蛋白的SDS-PAGE电泳分析 | 第116页 |
·双向电泳图谱扫描与分析 | 第116页 |
·蛋白点的胶内消化 | 第116页 |
·蛋白质质谱分析 | 第116-117页 |
·蛋白质肽质量指纹图谱的检索 | 第117页 |
·结果与分析 | 第117-121页 |
·家蚕中肠双向电泳分析与蛋白点鉴定 | 第117-119页 |
·家蚕5龄第3天中肠双向凝胶电泳图谱分析 | 第117-118页 |
·MALDI-TOF MS质谱分析 | 第118页 |
·中肠蛋白点的鉴定 | 第118-119页 |
·家蚕精巢组织双向电泳分析 | 第119-120页 |
·家蚕胚胎SDS-PAGE电泳分析及差异蛋白带鉴定 | 第120-121页 |
·家蚕胚胎不同发育阶段SDS-PAGE电泳分析 | 第120-121页 |
·家蚕胚胎不同发育阶段差异蛋白带鉴定 | 第121页 |
·讨论 | 第121-125页 |
·中肠蛋白点鉴定分类 | 第121-122页 |
·家蚕胚胎发育阶段蛋白差异分析 | 第122-125页 |
第八章 综合与结论 | 第125-129页 |
·建立了高质量的家蚕蛋白质组学的研究平台体系 | 第125页 |
·家蚕丝腺等组织双向电泳研究分析 | 第125-126页 |
·利用MALDI-TOF MS技术对家蚕组织蛋白质的鉴定 | 第126页 |
·差异蛋白点的鉴定和功能分析 | 第126-129页 |
论文的创新点 | 第129-131页 |
参考文献 | 第131-139页 |
博士在读期间发表文章及参研课题情况 | 第139-141页 |
致谢 | 第141-142页 |