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家蚕丝腺、血液、脂肪体蛋白质双向电泳及质谱分析

摘要第1-9页
Abstract第9-19页
第一章 文献综述第19-33页
   ·概述第19页
   ·蛋白质组学研究的历史背景第19-22页
     ·蛋白质组学发展历程第19-20页
     ·蛋白质组学研究的特点与难点第20-21页
     ·蛋白质组学主要的研究方法第21-22页
     ·蛋白质组学的研究策略第22页
     ·蛋白质组学的应用第22页
   ·昆虫蛋白质组学研究第22-26页
     ·果蝇蛋白质组学研究第23-24页
     ·蚊子蛋白质组学研究第24-25页
     ·其他昆虫蛋白质组学研究第25-26页
   ·家蚕蛋白质组学研究进展第26-33页
     ·家蚕丝腺蛋白质组学研究进展第26-28页
     ·家蚕胚胎蛋白质组学研究进展第28-30页
     ·雌性生殖腺附属物蛋白质组研究进展第30-31页
     ·家蚕血液蛋白质组学研究进展第31-33页
第二章 引言第33-37页
   ·家蚕基因组计划和课题的推进第33页
   ·蛋白质组学技术在家蚕功能基因组研究中的重要意义第33-34页
   ·家蚕蛋白质组研究对鳞翅目害虫防治的重要意义第34页
   ·家蚕蛋白质组学对产业发展的重要意义第34页
   ·主要研究内容和技术路线第34-37页
     ·家蚕蛋白质组学研究平台的建立第34-35页
     ·利用家蚕蛋白质组学研究平台对家蚕丝腺等组织的分析研究第35页
     ·利用比较蛋白质组学手段对家蚕发育、免疫等重要生理反应进行研究第35-37页
第三章 家蚕蛋白质组学关键技术和研究方法的建立第37-57页
   ·材料与方法第37-47页
     ·材料第37页
     ·实验试剂和仪器第37-41页
       ·实验购买的主要试剂第37页
       ·主要仪器第37-38页
       ·配制试剂第38-41页
     ·试验方法第41-47页
       ·双向电泳的组织样品预处理第41-42页
       ·等点聚焦电泳第42-43页
       ·胶条平衡方案第43-44页
       ·IPG胶条的转移和SDS-PAGE电泳第44页
       ·蛋白质染色方案第44页
       ·图象扫描与软件分析第44-45页
       ·胶内取点与酶切第45-46页
       ·MALDI-TOF MS上样处理第46页
       ·MS数据库的构建与蛋白点鉴定第46-47页
   ·结果与分析第47-55页
     ·双向电泳条件的优化第47-52页
       ·不同样品处理方法对双向电泳结果的影响第48页
       ·不同聚焦条件对双向电泳结果的影响第48-49页
       ·不同蛋白质染色方法的比较第49-50页
       ·IPGphor和Multiphor仪器的双向电泳结果比较第50-51页
       ·双向电泳中常见问题分析第51-52页
     ·胶内酶切和MALDI-TOF MS分析第52页
     ·本地MS数据库的构建与分析第52-55页
       ·已知蛋白在本地检索与在线检索的比较分析第52-54页
       ·未知蛋白在本地检索与在线检索的比较分析第54-55页
   ·讨论第55-57页
     ·影响家蚕样品双向电泳质量的关键因素第55页
     ·凝胶挖点方法比较第55页
     ·适合于家蚕蛋白质鉴定的MALDI-TOF MS分析方法第55-56页
     ·家蚕蛋白质组数据库检索和蛋白质鉴定第56-57页
第四章 家蚕丝腺蛋白质组学研究第57-77页
   ·材料与方法第58-60页
     ·材料第58页
     ·实验试剂和仪器第58页
     ·试验方法第58-60页
       ·样品处理第58页
       ·等电聚焦电泳第58页
       ·胶条平衡第58页
       ·大胶的制备和SDS-PAGE电泳第58-59页
       ·丝腺双向电泳图谱的染色第59页
       ·中部丝腺和后部丝腺比较分析第59页
       ·丝腺蛋白点胶内取点与酶切第59页
       ·MALDI-TOF MS对蛋白点的分析第59页
       ·MALDI-TOF MS PSD分析第59页
       ·丝腺蛋白点的肽质量指纹图谱检索第59-60页
   ·结果与分析第60-73页
     ·家蚕丝腺蛋白的双向电泳结果第60-61页
     ·后部丝腺蛋白质鉴定第61-66页
     ·中部丝腺与后部丝腺比较蛋白质组分析第66-68页
     ·中部丝腺与后部丝腺差异蛋白点的鉴定第68-69页
     ·中部丝腺和后部丝腺差异蛋白点1和3肽质量指纹图谱分析第69-70页
     ·MALDI-TOF PSD对家蚕蛋白点的鉴定分析第70-71页
     ·差异蛋白点1和差异蛋白点3的序列结构和组织表达分析第71-73页
       ·差异蛋白点1家蚕同源体序列分析第71-72页
       ·Bm_serpin蛋白在cDNA水平上各组织间的表达差异分析第72-73页
   ·讨论第73-77页
     ·家蚕丝腺蛋白点的鉴定第73-75页
       ·丝素蛋白的鉴定第73页
       ·热激蛋白和分子伴侣相关蛋白第73-74页
       ·与DNA复制、转录和翻译相关的蛋白质第74页
       ·蛋白酶类第74-75页
       ·其他蛋白第75页
     ·家蚕中部丝腺和后部丝腺比较蛋白质组学研究第75-77页
第五章 家蚕血液蛋白质组学研究第77-101页
   ·材料与方法第78-79页
     ·材料第78页
     ·实验试剂和仪器第78页
     ·试验方法第78-79页
       ·样品处理第78页
       ·等电聚焦电泳第78页
       ·胶条平衡第78页
       ·SDS-PAGE电泳分析第78页
       ·丝腺双向电泳图谱的染色第78页
       ·家蚕血液双向电泳图谱分析第78-79页
       ·家蚕血液中蛋白点胶内取点与酶切第79页
       ·MALDI-TOF MS对蛋白点的分析第79页
       ·血液蛋白点肽质量指纹图谱的检索及数据分析第79页
   ·结果与分析第79-96页
     ·家蚕血液蛋白随发育时期变化的SDS-PAGE电泳第79-81页
     ·家蚕不同发育变态阶段血液蛋白双向电泳图第81-82页
     ·家蚕不同发育变态阶段差异蛋白点鉴定分析第82-88页
       ·Apolipoprotein D homolog分析第84-85页
       ·Apolipophorin III蛋白第85-86页
       ·Diapanse bioclock protein分析第86-87页
       ·Chymotrypsin inhibitors 8 和Aldo reductase homolog第87-88页
     ·家蚕不同种类30K蛋白的鉴定第88-91页
     ·家蚕5龄第3天主要蛋白点鉴定第91-95页
     ·家蚕免疫后血液蛋白分析第95-96页
   ·讨论第96-101页
     ·发育变态时期血液中一些差异表达蛋白的功能预测第96-97页
     ·家蚕血液30K蛋白鉴定第97-98页
     ·家蚕5龄第3天蛋白点鉴定第98页
     ·家蚕免疫反应相关蛋白第98-101页
第六章 家蚕脂肪体蛋白质组学研究第101-115页
   ·材料与方法第101-103页
     ·材料第101-102页
     ·实验试剂和仪器第102页
     ·蛋白质的抽提第102页
     ·脂肪体组织双向电泳分析第102页
     ·DIGE实验分析第102页
     ·2D图谱分析第102页
     ·蛋白点的胶内消化第102-103页
     ·蛋白质质谱分析第103页
     ·蛋白质肽质量指纹图谱的检索第103页
   ·结果与分析第103-109页
     ·家蚕5龄第5天脂肪体双向凝胶电泳图谱第103-104页
     ·脂肪体蛋白质MALDI-TOF MS质谱分析第104-106页
     ·家蚕化蛹前后脂肪体蛋白质组学比较第106-108页
     ·利用蛋白荧光差异显示的方法研究家蚕变态期的脂肪体第108-109页
   ·讨论第109-115页
     ·家蚕5龄第5天脂肪体蛋白质鉴定分析第109-110页
     ·家蚕化蛹前后差异蛋白鉴定分析第110-115页
第七章 家蚕中肠、精巢、胚胎蛋白质组学研究初探第115-125页
   ·材料与方法第115-117页
     ·材料第115-116页
     ·实验试剂和仪器第116页
     ·样品组织蛋白质的抽提第116页
     ·中肠、精巢组织双向电泳分析第116页
     ·家蚕各时期卵蛋白的SDS-PAGE电泳分析第116页
     ·双向电泳图谱扫描与分析第116页
     ·蛋白点的胶内消化第116页
     ·蛋白质质谱分析第116-117页
     ·蛋白质肽质量指纹图谱的检索第117页
   ·结果与分析第117-121页
     ·家蚕中肠双向电泳分析与蛋白点鉴定第117-119页
       ·家蚕5龄第3天中肠双向凝胶电泳图谱分析第117-118页
       ·MALDI-TOF MS质谱分析第118页
       ·中肠蛋白点的鉴定第118-119页
     ·家蚕精巢组织双向电泳分析第119-120页
     ·家蚕胚胎SDS-PAGE电泳分析及差异蛋白带鉴定第120-121页
       ·家蚕胚胎不同发育阶段SDS-PAGE电泳分析第120-121页
       ·家蚕胚胎不同发育阶段差异蛋白带鉴定第121页
   ·讨论第121-125页
     ·中肠蛋白点鉴定分类第121-122页
     ·家蚕胚胎发育阶段蛋白差异分析第122-125页
第八章 综合与结论第125-129页
   ·建立了高质量的家蚕蛋白质组学的研究平台体系第125页
   ·家蚕丝腺等组织双向电泳研究分析第125-126页
   ·利用MALDI-TOF MS技术对家蚕组织蛋白质的鉴定第126页
   ·差异蛋白点的鉴定和功能分析第126-129页
论文的创新点第129-131页
参考文献第131-139页
博士在读期间发表文章及参研课题情况第139-141页
致谢第141-142页

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