摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1 嗜卷书虱的研究概况 | 第11-13页 |
·发生与危害 | 第11页 |
·抗性问题 | 第11-12页 |
·抗性机制 | 第12-13页 |
2 昆虫乙酰胆碱酯酶与抗药性 | 第13-22页 |
·乙酰胆碱酯酶的功能位点 | 第14-15页 |
·昆虫(螨)变构AChE的生物化学特性 | 第15-16页 |
·昆虫(螨)AChE基因点突变与抗药性的关系 | 第16-18页 |
·昆虫乙酰胆碱酯酶的量变与抗药性的关系 | 第18页 |
·生物体内存在多个AChE基因 | 第18-20页 |
·昆虫乙酰胆碱酯酶基因克隆的研究进展 | 第20页 |
·AChE分子研究的意义和实用价值 | 第20-22页 |
第二章 引言 | 第22-23页 |
第三章 嗜卷书虱乙酰胆碱酯酶生化及毒理学特性研究 | 第23-33页 |
1 材料与方法 | 第23-27页 |
·供试虫源 | 第23页 |
·主要供试药剂及仪器 | 第23-24页 |
·主要试剂配制 | 第24页 |
·测定方法 | 第24-27页 |
2 结果与分析 | 第27-29页 |
·酶源蛋白含量测定结果 | 第27页 |
·AChE活性测定结果 | 第27页 |
·AChE动力学参数(K_m和V_(max))测定结果 | 第27-28页 |
·AChE抑制中浓度(I_(50))测定结果 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-33页 |
第四章 嗜卷书虱乙酰胆碱酯酶基因克隆及序列分析 | 第33-62页 |
1 材料与方法 | 第33-35页 |
·供试虫源 | 第33页 |
·主要试剂和仪器 | 第33-34页 |
·常用储备液及培养基的配制 | 第34页 |
·总RNA的提取 | 第34-35页 |
2 实验方法 | 第35-44页 |
·3'RACE扩增 | 第35-36页 |
·5'RACE扩增 | 第36-38页 |
·TaKaRa 3’RACE和TaKaRa 5'RACE试剂盒获得序列的通测 | 第38-39页 |
·使用Clontech试剂盒做5'RACE扩增的步骤 | 第39-41页 |
·AChE基因全长扩增 | 第41-42页 |
·目的片段的克隆和测序 | 第42-44页 |
·序列分析 | 第44页 |
·蛋白同源模拟 | 第44页 |
3 结果与分析 | 第44-60页 |
·嗜卷书虱总RNA的提取 | 第44-45页 |
·AChE cDNA3'RACE结果 | 第45-47页 |
·使用TaKaRa试剂盒进行的5'RACE结果 | 第47-49页 |
·TaKaRa3'RACE和TaKaRa5'RACE试剂盒获得序列通测结果 | 第49-50页 |
·使用Clontech试剂盒进行的5'RACE结果 | 第50-51页 |
·嗜卷书虱AChE基因全长扩增结果 | 第51页 |
·序列分析 | 第51-59页 |
·嗜卷书虱AChE的蛋白同源模拟 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
第五章 主要结论与研究展望 | 第62-64页 |
1 主要结论 | 第62页 |
2 研究展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
附录1.缩略词 | 第73-74页 |
附录2.表4-3 | 第74-76页 |
附录3.在读期间发表的论文 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |