中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第1章 水稻耐冷分子育种研究与水稻转基因工程 | 第9-23页 |
·水稻耐冷分子机理 | 第9-10页 |
·耐冷相关基因 | 第10-15页 |
·抗冻蛋白基因 | 第10-11页 |
·冰冻脱水保护蛋白基因 | 第11页 |
·调节基因 | 第11-15页 |
·水稻耐冷分子育种研究进展 | 第15-21页 |
·水稻耐冷性基因定位 | 第15-17页 |
·水稻耐冷相关基因转基因工程 | 第17页 |
·农杆菌介导法 | 第17-21页 |
·展望 | 第21-23页 |
第2章 材料与方法 | 第23-37页 |
·材料 | 第23-25页 |
·水稻品种 | 第23页 |
·菌株及质粒 | 第23页 |
·培养基配方 | 第23-24页 |
·PCR 引物和 Southern 杂交探针 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-37页 |
·水稻愈伤组织培养体系的优化 | 第25-27页 |
·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第27-28页 |
·细菌中克隆载体的快速检测 | 第28-29页 |
·SDS 碱裂解法制备质粒 DNA | 第29-30页 |
·质粒 DNA 的 PCR 鉴定 | 第30-31页 |
·农杆菌感受态细胞的制备和电击转化 | 第31-32页 |
·外源基因对早粳稻的转化 | 第32页 |
·转基因水稻外源基因的 PCR 鉴定 | 第32-34页 |
·Southern 斑点杂交鉴定转基因水稻外源基因 BnCS 的整合 | 第34-37页 |
第3章 结果与分析 | 第37-51页 |
·遗传转化水稻品种筛选及转化体系的优化 | 第37-46页 |
·不同品种组培特性 | 第37-38页 |
·愈伤诱导前处理 | 第38页 |
·组织培养的培养基 | 第38-39页 |
·继代培养基中激素成分 | 第39-40页 |
·预分化培养 | 第40-41页 |
·分化培养基及其激素成分 | 第41页 |
·水稻愈伤组织对PPT 和 G418 的抗性 | 第41-43页 |
·水稻幼胚和成熟胚的组培及遗传转化特性 | 第43页 |
·侵染时的农杆菌浓度 | 第43页 |
·浸染和共培养时的 AS 浓度 | 第43-45页 |
·共培养后的清菌 | 第45-46页 |
·水稻的遗传转化 | 第46-51页 |
·耐冷相关基因BrDREB 细菌转化子构建 | 第46-47页 |
·BrDREB 基因对早粳稻的转化株 | 第47-48页 |
·转BnCS 基因水稻转化株 PCR 鉴定 | 第48-49页 |
·转 BnCS 水稻转化株 Southern 杂交检测 | 第49-51页 |
第4章 讨论 | 第51-54页 |
·水稻遗传转化体系的优化 | 第51-52页 |
·外源基因对水稻的遗传转化 | 第52-53页 |
·今后进一步研究的问题 | 第53-54页 |
第5章 结论 | 第54-56页 |
·适合水稻遗传转化的早粳稻品种 | 第54页 |
·优化的早粳稻组织培养体系 | 第54页 |
·优化的农杆菌介导粳稻遗传转化体系关键技术 | 第54-55页 |
·转 BnCS 基因和 BrDREB 基因的早粳稻植株 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-63页 |
附图 | 第63-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
攻读学位期间发表论文 | 第66-67页 |