| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 概述 | 第11-16页 |
| ·菌毛的类型及特点 | 第11页 |
| ·鸡大肠杆菌1型菌毛的变异类型 | 第11-12页 |
| ·1型菌毛的基因簇结构及其功能 | 第12-14页 |
| ·亚单位FimA | 第12-13页 |
| ·FimB与FimE蛋白 | 第13页 |
| ·亚单位FimC | 第13页 |
| ·亚单位FimD | 第13页 |
| ·亚单位FimF、FimG、FimH | 第13-14页 |
| ·亚单位FimI | 第14页 |
| ·1型菌毛的同源性 | 第14-15页 |
| ·菌毛表达外源蛋白的研究 | 第15-16页 |
| 2 鸡新城疫病毒的研究进展 | 第16-18页 |
| ·鸡新城疫病毒的一般特征 | 第16-17页 |
| ·鸡新城疫病毒HN蛋白的结构 | 第17-18页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 具有1型菌毛非致病性鸡源大肠杆菌的分离与鉴定 | 第19-30页 |
| 1 材料与方法 | 第19-24页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·试验动物 | 第19页 |
| ·菌株和工具酶 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-24页 |
| ·鸡源大肠杆菌的初步分离培养 | 第21页 |
| ·具有1型菌毛的鸡源大肠杆菌的筛选 | 第21-24页 |
| ·鸡源大肠杆菌非致病性的鉴定 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-28页 |
| ·鸡源大肠杆菌的分离培养 | 第24-25页 |
| ·具有1型菌毛的鸡源大肠杆菌的筛选 | 第25-28页 |
| ·PCR产物电泳分析 | 第25页 |
| ·阳性克隆的酶切鉴定 | 第25-26页 |
| ·序列测定与分析 | 第26-28页 |
| ·鸡源大肠杆菌非致病性的鉴定 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-30页 |
| ·1型菌毛的检测 | 第28-29页 |
| ·非致病性的鉴定 | 第29-30页 |
| 第三章 同源重组自杀载体的构建及插入突变探索 | 第30-51页 |
| 1 材料与方法 | 第30-41页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第30-31页 |
| ·酶及主要试剂 | 第31页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-41页 |
| ·大肠杆菌1型菌毛主要亚单位蛋白FimA的预测分析 | 第31页 |
| ·NDV La Sota系HN基因编码蛋白的抗原表位的分析 | 第31页 |
| ·HNS基因插入fimA基因后编码蛋白的预测分析 | 第31-32页 |
| ·同源臂的扩增 | 第32-33页 |
| ·同源性核苷酸片段fimALRT的制备 | 第33-36页 |
| ·同源性核苷酸片段fimALR-HNS的制备 | 第36-38页 |
| ·重组自杀载体质粒的构建 | 第38-39页 |
| ·构建插入突变株初探 | 第39-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-48页 |
| ·FimA亚单位蛋白的预测分析及突变位点的选择 | 第41-42页 |
| ·HN基因编码蛋白的抗原表位的预测分析 | 第42页 |
| ·HNS基因插入fimA基因后编码蛋白的预测分析 | 第42-43页 |
| ·同源臂的制备 | 第43-44页 |
| ·同源性核苷酸片段fimALR的PCR扩增结果 | 第43页 |
| ·同源性核苷酸片段fimALR的重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·同源性核苷酸片段fimALRT的制备 | 第44-45页 |
| ·通过重叠延伸PCR引入酶切位点 | 第44页 |
| ·fimALRT同源性核苷酸片段克隆的鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·同源性核苷酸片段fimALR-HNS的制备 | 第45-47页 |
| ·外源抗原表位的制备 | 第45页 |
| ·外源抗原表位插入的鉴定 | 第45-47页 |
| ·重组自杀载体质粒构建的鉴定 | 第47页 |
| ·插入突变株构建初探 | 第47-48页 |
| ·电转化方法筛选结果 | 第47-48页 |
| ·接合转移方法筛选结果 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-51页 |
| ·FimA亚单位蛋白和HNS基因编码蛋白的预测分析 | 第48-49页 |
| ·重叠延伸PCR方法引入酶切位点 | 第49页 |
| ·重组自杀质粒的构建 | 第49页 |
| ·插入突变株构建初探 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
